崔洪泉等

[摘要] 目的 觀察CIK細(xì)胞免疫治療對(duì)轉(zhuǎn)移性腎癌患者免疫功能的影響。方法 選取2010～2012年收治的轉(zhuǎn)移性腎癌患者，在常規(guī)治療措施的基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用CIK細(xì)胞免疫方法進(jìn)行臨床治療，治療3個(gè)療程后，監(jiān)測(cè)治療前后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值等免疫功能指標(biāo)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 治療后患者外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平優(yōu)于治療前（P<0.05）。結(jié)論 采用CIK細(xì)胞免疫治療能有效提高轉(zhuǎn)移性腎癌患者的免疫功能。

[關(guān)鍵詞] CIK細(xì)胞；轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌；免疫功能

[中圖分類號(hào)] R737.11 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2014）29-0132-02

Effect of CIK cells immunotherapy on immunological function of patients with metastatic renal cell carcinoma

CUI Hongquan1 ZHAO Junfeng1 LI Baodong2 ZHANG Linchao3

1.Department of Urology， Traditional Chinese Medicine Hospital of Henan Province， Zhengzhou 450002，China；2.Department of Urology， Cancer Hospital of Henan Province， Zhengzhou 450008， China； 3.Department of Urology， Central Hospital of Zhengzhou City， Zhengzhou 450000， China

[Abstract] Objective To study the effect of cytokine-induced killer（CIK） cells immunotherapy on immunological function of patients with metastatic renal cell carcinoma. Methods A total of 70 patients with metastatic renal cell carcinoma were randomly divided into 2 groups， 35 cases of the treatment group were added with CIK cells， while the control group was given IL-2 and IFN-α， detected the immunological function of 70 cases including the levels of CD3+， CD4+， CD8+T cells， ratio of CD4+/CD8+， one week before therapy of CIK cells and one month week after treatment. Results The levels of CD3+、CD4+ cells， ratio of CD4+/CD8+ in peripheral blood of patients with renal cancer of two groups were much higher than those before therapy（P<0.05）， the levels CD8+ was lower after treatment， there were significant changes （P<0.05）. Conclusion CIK cells immunotherapy can enhance the immunological function of patients with metastatic renal cell carcinoma.

[Key words] CIK cells； Metastatic renal cell carcinoma；Immunological function

CIK細(xì)胞免疫治療被認(rèn)為是新一代抗腫瘤過(guò)繼細(xì)胞免疫治療首選方案。研究表明，CIK細(xì)胞在腎癌治療中顯示了良好的抗腫瘤作用[1]。腎癌具有多藥物耐藥基因，對(duì)化療、放療不敏感，生物免疫治療有一定療效。為了尋找治療腎癌更為有效的方法，本研究采用CIK細(xì)胞免疫治療轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌，觀察治療前后患者免疫功能指標(biāo)的變化，了解其對(duì)轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌患者免疫功能的影響。

1資料與方法

1.1一般資料

70例轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌患者為河南省中醫(yī)院、河南省腫瘤醫(yī)院、鄭州市中心醫(yī)院2010年1月～2012年2月住院觀察病例，均經(jīng)免疫組化病理證實(shí)。男48例，女 22例；年齡38～73歲，平均56歲。按入院先后均分為兩組，其中肺轉(zhuǎn)移26例，骨轉(zhuǎn)移21例，肝轉(zhuǎn)移8例，腦轉(zhuǎn)移9例，其他部位轉(zhuǎn)移6例。70例患者ECOG分級(jí)≥Ⅲ級(jí)，預(yù)計(jì)生存期≥3個(gè)月。兩組在年齡、性別、病程、病理類型等方面均無(wú)顯著差異（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

1.2.1治療方案對(duì)照組采用常規(guī)治療 IL-2（5×106 U/m2，d 1、d 3、d 5）和IFN-α（3×106 U/m2，d 2、d 4、d 6），連用4周，停藥2周，每6周為1個(gè)治療周期。治療組在常規(guī)治療一個(gè)周期后采用CIK治療，患者至少接受3個(gè)療程CIK治療。

1.2.2 CIK細(xì)胞的制備 免疫表型的測(cè)定及細(xì)胞殺傷活性的檢測(cè)見參考文獻(xiàn)[2-3]。

1.2.3細(xì)胞回輸 細(xì)胞培養(yǎng)完成后，用生理鹽水離心洗滌兩次，加入生理鹽水中分2次靜脈回輸，每月接受1次CIK回輸，中間間隔1 d，每次回輸CIK數(shù)量為（10.07±1.37）×109，回輸前患者肌注鹽酸異丙嗪，肌肉注射地塞米松。endprint

1.2.4 免疫指標(biāo)的檢測(cè) 觀察治療前1周及治療后3個(gè)月患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）水平變化。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)兩組治療前后各項(xiàng)免疫指標(biāo)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用配對(duì)t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

兩組治療前后CD3+、CD4+和CD4+/CD8+比值上升（t=2.56、2.32、3.12、2.45、2.83、2.16，P<0.05），CD8+細(xì)胞比例下降（t=2.31、2.03，P<0.05），差異均具有顯著性；并且治療組上升值或下降值明顯大于對(duì)照組（t=3.31、2.02、2.53、2.19，P<0.05），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

表1 兩組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群變化（x±s，n=35）

注：與治療前比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（*P<0.05），與對(duì)照組治療后比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（△P<0.05）

3 討論

腎細(xì)胞癌是起源于腎實(shí)質(zhì)泌尿小管上皮系統(tǒng)的惡性腫瘤，占腎臟惡性腫瘤的80%～90%[4]，轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌為伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，大約25%～30%腎細(xì)胞癌患者在初次診斷時(shí)伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，局限性RCC行根治性腎切除術(shù)后約20%～40%的患者將出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，在RCC患者中30%～50%最終將發(fā)展成為轉(zhuǎn)移性RCC[5]。

細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷性細(xì)胞（cytokine-induce killer cell，CIK）其前體是T細(xì)胞，1991年Stan-ford大學(xué)的Schmidt-Wolf培養(yǎng)出一個(gè)有強(qiáng)大抗腫瘤活性的細(xì)胞群[6]，利用人外周血分離獲得單個(gè)核細(xì)胞，在體外用IFN-γ、抗人體CD3+抗體、IL-2共同培養(yǎng)后獲得一群異質(zhì)細(xì)胞[7]。CIK細(xì)胞不是單一種類的細(xì)胞群，其增殖能力及殺瘤活性明顯優(yōu)于CD3AK細(xì)胞，CIK對(duì)A-549細(xì)胞的殺傷活性顯著高于LAK細(xì)胞[8]（P<0.05），具有較強(qiáng)的殺瘤能力；其細(xì)胞成分主要為CD3+CD56+細(xì)胞和CD3+CD8+雙陽(yáng)性細(xì)胞群， 前者在培養(yǎng)體系中增殖倍數(shù)最多，殺瘤活性最強(qiáng)，是主要的效應(yīng)細(xì)胞，CIK細(xì)胞具有較強(qiáng)的擴(kuò)增和殺瘤能力，是腫瘤過(guò)繼免疫治療中更為有效的殺瘤效應(yīng)細(xì)胞，是一種新型的廣譜抗腫瘤免疫活性細(xì)胞，在臨床中越來(lái)越受到重視。

惡性腫瘤的預(yù)后與免疫功能密切相關(guān)，腎細(xì)胞癌為免疫性惡性腫瘤，外周血CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+等免疫指標(biāo)是反映細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo)，晚期患者可出現(xiàn)不同程度免疫功能抑制，在外周靜脈血中表現(xiàn)為細(xì)胞亞群功能的異常，表現(xiàn)為CD3+、CD4+T細(xì)胞的減少和CD8+T細(xì)胞的增多，CD4+T/CD8+T細(xì)胞比例的下降或倒置。本研究結(jié)果顯示兩組患者治療后CD3+、CD4+比例均升高，CD8+比例下降，CD4+/CD8+比值上升，與治療前相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。體外研究表明，CIK可以增強(qiáng)腫瘤患者機(jī)體的免疫功能[9]，自體CIK細(xì)胞治療可以明顯提高CD3T細(xì)胞和NK細(xì)胞的比例，緩解CD4+/CD8+的免疫倒置，增強(qiáng)患者的細(xì)胞免疫功能[10]。亦有研究發(fā)現(xiàn)，CIK細(xì)胞在治療Ⅲ、Ⅳ期腎細(xì)胞癌患者5年P(guān)FS、OS率明顯高于對(duì)照組且中位PFS、OS時(shí)間明顯長(zhǎng)于對(duì)照組，證實(shí)CIK治療可以改善Ⅲ、Ⅳ期腎細(xì)胞癌患者的預(yù)后，增加CIK免疫治療療程可能獲益更多[11]。

抗腫瘤作用的主要機(jī)制包括兩個(gè)方面，一是直接或間接殺傷抑制腫瘤細(xì)胞，二是通過(guò)促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖活化，從而提高機(jī)體抗腫瘤免疫能力，清除腫瘤患者體內(nèi)微小殘余病灶，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，同時(shí)能夠防止腫瘤復(fù)發(fā)。CIK細(xì)胞作為免疫治療的方法之一，可以明顯提高惡性腫瘤患者的免疫功能，抑制腫瘤的生長(zhǎng)，同時(shí)其體內(nèi)分布的廣泛性表明，它可以用于身體各部位惡性腫瘤的治療[12]，為治療轉(zhuǎn)移性腫瘤奠定了良好的基礎(chǔ)，有報(bào)道增加CIK治療療程數(shù)可以提高療效[10]，并且CIK細(xì)胞免疫治療無(wú)外源細(xì)胞因子維持作用，副作用少，顯示了良好的發(fā)展前景，尤其是近年來(lái)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的多種基因修飾功能，使CIK細(xì)胞免疫治療具有了更為廣闊的應(yīng)用前景。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Wang H，Zhou FJ，Wang QJ，et al. Efficacy of autologous renal tumor cell lysate-loaded dendritic cell vaccine in combination with cyto-kine-induced killer cells on advanced renal cell carcinoma-A report of ten cases[J]. Ai Zheng，2006，25（5）：625-630.

[2] Li H，Wang C，Yu J，et al. Dendritic cell-activated cytokine-induced killer cells enhance the anti-tumor effect of chemotherapy on non-small cell lung cancer in patients after surgery[J]. Cyto-therapy，2009，11（8）：1076-1083.

[3] Ren X，Yu J，Liu H，et al. Th1 bias in PBMC induced by multi-cycles of auto-CIKs infusion in malignant solid tumor patients[J]. Cancer Biother Radiopharm，2006，21（1）：22-33.

[4] 那彥群，孫則禹，葉章群，等. 中國(guó)泌尿外科疾病診斷治療指南[M]. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2013：8-9.

[5] Ljungberg B，Hanbury DC，Kuczyk MA，et al. Guidelines on renal cell carcinoma[M]. European Association of Urology，2008：10-12.

[6] 雷靜，錢旻，吳芝莉，等. 體外CIK細(xì)胞的細(xì)胞因子表達(dá)譜研究的初步探討[J]. 中國(guó)免疫學(xué)雜志，2005，21（8）：589-592.

[7] 匡志鵬，謝裕安，梁安民，等. 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞的生物學(xué)特性及抗腫瘤作用研究[J]. 廣西醫(yī)學(xué)，2006，28（8）：1149-1151.

[8] 王佳烈，馬國(guó)強(qiáng)，包利清，等. 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞體外擴(kuò)增及其生物學(xué)特性的研究[J]. 中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2007，4（36）：10.

[9] Schmidt-Wolf IG，Lefterova P，Mehta BA，et al. Phenotypic char-acterization and identification of effector cells involved in tumor cell recognition of cytokine-induced killer cells[J]. Exp Hematol，1993，21（13）：1673-1679.

[10] 黃朝暉，王豐，華東，等. 腫瘤患者自體CIK細(xì)胞治療及其對(duì)患者免疫功能的影響[J]. 江南大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，3（1）：20.

[11] 張靜，劉亮，于津浦，等. 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞治療腎細(xì)胞癌臨床療效的評(píng)價(jià)[J]. 中國(guó)腫瘤生物治療雜志，2011，18（5）：480.

[12] 安秀梅，岳欣，李慧，等. 應(yīng)用結(jié)腸癌動(dòng)物模型探討CIK細(xì)胞的抗腫瘤活性和體內(nèi)分布特點(diǎn)[J]. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2008，14（3）：260.

（收稿日期：2014-05-29）endprint

1.2.4 免疫指標(biāo)的檢測(cè) 觀察治療前1周及治療后3個(gè)月患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）水平變化。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)兩組治療前后各項(xiàng)免疫指標(biāo)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用配對(duì)t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

兩組治療前后CD3+、CD4+和CD4+/CD8+比值上升（t=2.56、2.32、3.12、2.45、2.83、2.16，P<0.05），CD8+細(xì)胞比例下降（t=2.31、2.03，P<0.05），差異均具有顯著性；并且治療組上升值或下降值明顯大于對(duì)照組（t=3.31、2.02、2.53、2.19，P<0.05），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

表1 兩組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群變化（x±s，n=35）

注：與治療前比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（*P<0.05），與對(duì)照組治療后比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（△P<0.05）

3 討論

腎細(xì)胞癌是起源于腎實(shí)質(zhì)泌尿小管上皮系統(tǒng)的惡性腫瘤，占腎臟惡性腫瘤的80%～90%[4]，轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌為伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，大約25%～30%腎細(xì)胞癌患者在初次診斷時(shí)伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，局限性RCC行根治性腎切除術(shù)后約20%～40%的患者將出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，在RCC患者中30%～50%最終將發(fā)展成為轉(zhuǎn)移性RCC[5]。

細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷性細(xì)胞（cytokine-induce killer cell，CIK）其前體是T細(xì)胞，1991年Stan-ford大學(xué)的Schmidt-Wolf培養(yǎng)出一個(gè)有強(qiáng)大抗腫瘤活性的細(xì)胞群[6]，利用人外周血分離獲得單個(gè)核細(xì)胞，在體外用IFN-γ、抗人體CD3+抗體、IL-2共同培養(yǎng)后獲得一群異質(zhì)細(xì)胞[7]。CIK細(xì)胞不是單一種類的細(xì)胞群，其增殖能力及殺瘤活性明顯優(yōu)于CD3AK細(xì)胞，CIK對(duì)A-549細(xì)胞的殺傷活性顯著高于LAK細(xì)胞[8]（P<0.05），具有較強(qiáng)的殺瘤能力；其細(xì)胞成分主要為CD3+CD56+細(xì)胞和CD3+CD8+雙陽(yáng)性細(xì)胞群， 前者在培養(yǎng)體系中增殖倍數(shù)最多，殺瘤活性最強(qiáng)，是主要的效應(yīng)細(xì)胞，CIK細(xì)胞具有較強(qiáng)的擴(kuò)增和殺瘤能力，是腫瘤過(guò)繼免疫治療中更為有效的殺瘤效應(yīng)細(xì)胞，是一種新型的廣譜抗腫瘤免疫活性細(xì)胞，在臨床中越來(lái)越受到重視。

惡性腫瘤的預(yù)后與免疫功能密切相關(guān)，腎細(xì)胞癌為免疫性惡性腫瘤，外周血CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+等免疫指標(biāo)是反映細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo)，晚期患者可出現(xiàn)不同程度免疫功能抑制，在外周靜脈血中表現(xiàn)為細(xì)胞亞群功能的異常，表現(xiàn)為CD3+、CD4+T細(xì)胞的減少和CD8+T細(xì)胞的增多，CD4+T/CD8+T細(xì)胞比例的下降或倒置。本研究結(jié)果顯示兩組患者治療后CD3+、CD4+比例均升高，CD8+比例下降，CD4+/CD8+比值上升，與治療前相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。體外研究表明，CIK可以增強(qiáng)腫瘤患者機(jī)體的免疫功能[9]，自體CIK細(xì)胞治療可以明顯提高CD3T細(xì)胞和NK細(xì)胞的比例，緩解CD4+/CD8+的免疫倒置，增強(qiáng)患者的細(xì)胞免疫功能[10]。亦有研究發(fā)現(xiàn)，CIK細(xì)胞在治療Ⅲ、Ⅳ期腎細(xì)胞癌患者5年P(guān)FS、OS率明顯高于對(duì)照組且中位PFS、OS時(shí)間明顯長(zhǎng)于對(duì)照組，證實(shí)CIK治療可以改善Ⅲ、Ⅳ期腎細(xì)胞癌患者的預(yù)后，增加CIK免疫治療療程可能獲益更多[11]。

抗腫瘤作用的主要機(jī)制包括兩個(gè)方面，一是直接或間接殺傷抑制腫瘤細(xì)胞，二是通過(guò)促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖活化，從而提高機(jī)體抗腫瘤免疫能力，清除腫瘤患者體內(nèi)微小殘余病灶，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，同時(shí)能夠防止腫瘤復(fù)發(fā)。CIK細(xì)胞作為免疫治療的方法之一，可以明顯提高惡性腫瘤患者的免疫功能，抑制腫瘤的生長(zhǎng)，同時(shí)其體內(nèi)分布的廣泛性表明，它可以用于身體各部位惡性腫瘤的治療[12]，為治療轉(zhuǎn)移性腫瘤奠定了良好的基礎(chǔ)，有報(bào)道增加CIK治療療程數(shù)可以提高療效[10]，并且CIK細(xì)胞免疫治療無(wú)外源細(xì)胞因子維持作用，副作用少，顯示了良好的發(fā)展前景，尤其是近年來(lái)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的多種基因修飾功能，使CIK細(xì)胞免疫治療具有了更為廣闊的應(yīng)用前景。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Wang H，Zhou FJ，Wang QJ，et al. Efficacy of autologous renal tumor cell lysate-loaded dendritic cell vaccine in combination with cyto-kine-induced killer cells on advanced renal cell carcinoma-A report of ten cases[J]. Ai Zheng，2006，25（5）：625-630.

[2] Li H，Wang C，Yu J，et al. Dendritic cell-activated cytokine-induced killer cells enhance the anti-tumor effect of chemotherapy on non-small cell lung cancer in patients after surgery[J]. Cyto-therapy，2009，11（8）：1076-1083.

[3] Ren X，Yu J，Liu H，et al. Th1 bias in PBMC induced by multi-cycles of auto-CIKs infusion in malignant solid tumor patients[J]. Cancer Biother Radiopharm，2006，21（1）：22-33.

[4] 那彥群，孫則禹，葉章群，等. 中國(guó)泌尿外科疾病診斷治療指南[M]. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2013：8-9.

[5] Ljungberg B，Hanbury DC，Kuczyk MA，et al. Guidelines on renal cell carcinoma[M]. European Association of Urology，2008：10-12.

[6] 雷靜，錢旻，吳芝莉，等. 體外CIK細(xì)胞的細(xì)胞因子表達(dá)譜研究的初步探討[J]. 中國(guó)免疫學(xué)雜志，2005，21（8）：589-592.

[7] 匡志鵬，謝裕安，梁安民，等. 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞的生物學(xué)特性及抗腫瘤作用研究[J]. 廣西醫(yī)學(xué)，2006，28（8）：1149-1151.

[8] 王佳烈，馬國(guó)強(qiáng)，包利清，等. 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞體外擴(kuò)增及其生物學(xué)特性的研究[J]. 中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2007，4（36）：10.

[9] Schmidt-Wolf IG，Lefterova P，Mehta BA，et al. Phenotypic char-acterization and identification of effector cells involved in tumor cell recognition of cytokine-induced killer cells[J]. Exp Hematol，1993，21（13）：1673-1679.

[10] 黃朝暉，王豐，華東，等. 腫瘤患者自體CIK細(xì)胞治療及其對(duì)患者免疫功能的影響[J]. 江南大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，3（1）：20.

[11] 張靜，劉亮，于津浦，等. 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞治療腎細(xì)胞癌臨床療效的評(píng)價(jià)[J]. 中國(guó)腫瘤生物治療雜志，2011，18（5）：480.

[12] 安秀梅，岳欣，李慧，等. 應(yīng)用結(jié)腸癌動(dòng)物模型探討CIK細(xì)胞的抗腫瘤活性和體內(nèi)分布特點(diǎn)[J]. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2008，14（3）：260.

（收稿日期：2014-05-29）endprint

1.2.4 免疫指標(biāo)的檢測(cè) 觀察治療前1周及治療后3個(gè)月患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）水平變化。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)兩組治療前后各項(xiàng)免疫指標(biāo)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用配對(duì)t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

兩組治療前后CD3+、CD4+和CD4+/CD8+比值上升（t=2.56、2.32、3.12、2.45、2.83、2.16，P<0.05），CD8+細(xì)胞比例下降（t=2.31、2.03，P<0.05），差異均具有顯著性；并且治療組上升值或下降值明顯大于對(duì)照組（t=3.31、2.02、2.53、2.19，P<0.05），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

表1 兩組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群變化（x±s，n=35）

注：與治療前比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（*P<0.05），與對(duì)照組治療后比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（△P<0.05）

3 討論

腎細(xì)胞癌是起源于腎實(shí)質(zhì)泌尿小管上皮系統(tǒng)的惡性腫瘤，占腎臟惡性腫瘤的80%～90%[4]，轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌為伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，大約25%～30%腎細(xì)胞癌患者在初次診斷時(shí)伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，局限性RCC行根治性腎切除術(shù)后約20%～40%的患者將出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，在RCC患者中30%～50%最終將發(fā)展成為轉(zhuǎn)移性RCC[5]。

細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷性細(xì)胞（cytokine-induce killer cell，CIK）其前體是T細(xì)胞，1991年Stan-ford大學(xué)的Schmidt-Wolf培養(yǎng)出一個(gè)有強(qiáng)大抗腫瘤活性的細(xì)胞群[6]，利用人外周血分離獲得單個(gè)核細(xì)胞，在體外用IFN-γ、抗人體CD3+抗體、IL-2共同培養(yǎng)后獲得一群異質(zhì)細(xì)胞[7]。CIK細(xì)胞不是單一種類的細(xì)胞群，其增殖能力及殺瘤活性明顯優(yōu)于CD3AK細(xì)胞，CIK對(duì)A-549細(xì)胞的殺傷活性顯著高于LAK細(xì)胞[8]（P<0.05），具有較強(qiáng)的殺瘤能力；其細(xì)胞成分主要為CD3+CD56+細(xì)胞和CD3+CD8+雙陽(yáng)性細(xì)胞群， 前者在培養(yǎng)體系中增殖倍數(shù)最多，殺瘤活性最強(qiáng)，是主要的效應(yīng)細(xì)胞，CIK細(xì)胞具有較強(qiáng)的擴(kuò)增和殺瘤能力，是腫瘤過(guò)繼免疫治療中更為有效的殺瘤效應(yīng)細(xì)胞，是一種新型的廣譜抗腫瘤免疫活性細(xì)胞，在臨床中越來(lái)越受到重視。

惡性腫瘤的預(yù)后與免疫功能密切相關(guān)，腎細(xì)胞癌為免疫性惡性腫瘤，外周血CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+等免疫指標(biāo)是反映細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo)，晚期患者可出現(xiàn)不同程度免疫功能抑制，在外周靜脈血中表現(xiàn)為細(xì)胞亞群功能的異常，表現(xiàn)為CD3+、CD4+T細(xì)胞的減少和CD8+T細(xì)胞的增多，CD4+T/CD8+T細(xì)胞比例的下降或倒置。本研究結(jié)果顯示兩組患者治療后CD3+、CD4+比例均升高，CD8+比例下降，CD4+/CD8+比值上升，與治療前相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。體外研究表明，CIK可以增強(qiáng)腫瘤患者機(jī)體的免疫功能[9]，自體CIK細(xì)胞治療可以明顯提高CD3T細(xì)胞和NK細(xì)胞的比例，緩解CD4+/CD8+的免疫倒置，增強(qiáng)患者的細(xì)胞免疫功能[10]。亦有研究發(fā)現(xiàn)，CIK細(xì)胞在治療Ⅲ、Ⅳ期腎細(xì)胞癌患者5年P(guān)FS、OS率明顯高于對(duì)照組且中位PFS、OS時(shí)間明顯長(zhǎng)于對(duì)照組，證實(shí)CIK治療可以改善Ⅲ、Ⅳ期腎細(xì)胞癌患者的預(yù)后，增加CIK免疫治療療程可能獲益更多[11]。

抗腫瘤作用的主要機(jī)制包括兩個(gè)方面，一是直接或間接殺傷抑制腫瘤細(xì)胞，二是通過(guò)促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖活化，從而提高機(jī)體抗腫瘤免疫能力，清除腫瘤患者體內(nèi)微小殘余病灶，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，同時(shí)能夠防止腫瘤復(fù)發(fā)。CIK細(xì)胞作為免疫治療的方法之一，可以明顯提高惡性腫瘤患者的免疫功能，抑制腫瘤的生長(zhǎng)，同時(shí)其體內(nèi)分布的廣泛性表明，它可以用于身體各部位惡性腫瘤的治療[12]，為治療轉(zhuǎn)移性腫瘤奠定了良好的基礎(chǔ)，有報(bào)道增加CIK治療療程數(shù)可以提高療效[10]，并且CIK細(xì)胞免疫治療無(wú)外源細(xì)胞因子維持作用，副作用少，顯示了良好的發(fā)展前景，尤其是近年來(lái)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的多種基因修飾功能，使CIK細(xì)胞免疫治療具有了更為廣闊的應(yīng)用前景。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Wang H，Zhou FJ，Wang QJ，et al. Efficacy of autologous renal tumor cell lysate-loaded dendritic cell vaccine in combination with cyto-kine-induced killer cells on advanced renal cell carcinoma-A report of ten cases[J]. Ai Zheng，2006，25（5）：625-630.

[2] Li H，Wang C，Yu J，et al. Dendritic cell-activated cytokine-induced killer cells enhance the anti-tumor effect of chemotherapy on non-small cell lung cancer in patients after surgery[J]. Cyto-therapy，2009，11（8）：1076-1083.

[3] Ren X，Yu J，Liu H，et al. Th1 bias in PBMC induced by multi-cycles of auto-CIKs infusion in malignant solid tumor patients[J]. Cancer Biother Radiopharm，2006，21（1）：22-33.

[4] 那彥群，孫則禹，葉章群，等. 中國(guó)泌尿外科疾病診斷治療指南[M]. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2013：8-9.

[5] Ljungberg B，Hanbury DC，Kuczyk MA，et al. Guidelines on renal cell carcinoma[M]. European Association of Urology，2008：10-12.

[6] 雷靜，錢旻，吳芝莉，等. 體外CIK細(xì)胞的細(xì)胞因子表達(dá)譜研究的初步探討[J]. 中國(guó)免疫學(xué)雜志，2005，21（8）：589-592.

[7] 匡志鵬，謝裕安，梁安民，等. 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞的生物學(xué)特性及抗腫瘤作用研究[J]. 廣西醫(yī)學(xué)，2006，28（8）：1149-1151.

[8] 王佳烈，馬國(guó)強(qiáng)，包利清，等. 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞體外擴(kuò)增及其生物學(xué)特性的研究[J]. 中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2007，4（36）：10.

[9] Schmidt-Wolf IG，Lefterova P，Mehta BA，et al. Phenotypic char-acterization and identification of effector cells involved in tumor cell recognition of cytokine-induced killer cells[J]. Exp Hematol，1993，21（13）：1673-1679.

[10] 黃朝暉，王豐，華東，等. 腫瘤患者自體CIK細(xì)胞治療及其對(duì)患者免疫功能的影響[J]. 江南大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，3（1）：20.

[11] 張靜，劉亮，于津浦，等. 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞治療腎細(xì)胞癌臨床療效的評(píng)價(jià)[J]. 中國(guó)腫瘤生物治療雜志，2011，18（5）：480.

[12] 安秀梅，岳欣，李慧，等. 應(yīng)用結(jié)腸癌動(dòng)物模型探討CIK細(xì)胞的抗腫瘤活性和體內(nèi)分布特點(diǎn)[J]. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2008，14（3）：260.

（收稿日期：2014-05-29）endprint