閆傳真　關(guān)靖宇

[摘 要] 目的：總結(jié)重癥動脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血患者腦脊液的IL-11與預(yù)后的相關(guān)性。方法：收集檢測26例hunt4-5級重癥蛛網(wǎng)膜下腔出血患者腦脊液標本 40份，ElISA法檢測腦脊液IL-11濃度。統(tǒng)計分析死亡組與生存組腦脊液IL-11檢測結(jié)果。結(jié)果：生存組16例，死亡組10例。死亡組腦脊液IL-11（185.2±84.5 pg/mL）明顯高于生存組（101.2±65.6pg/mL）。結(jié)論：重癥蛛網(wǎng)膜下腔出血患者腦脊液IL-11水平可以作為判斷預(yù)后的有效指標。

[關(guān)鍵詞] 蛛網(wǎng)膜下腔出血； 腦脊液； 細胞因子

中圖分類號：R743.35 文獻標識碼：A 文章編號：2095-5200（2014）05-060-03

盡管近年來神經(jīng)影像學(xué)技術(shù)、顯微外科和血管內(nèi)介入治療技術(shù)已有長足進步，但重癥蛛網(wǎng)膜下腔出血（ SAH ） 的病死率和致殘率仍很高，尤其是臨床分級不良患者，依然是神經(jīng)外科治療的一個難點[1]。

患者的格拉斯哥（GCS）評分、蛛網(wǎng)膜下腔的fisher評分、年齡、出血量均提示病情的嚴重程度及預(yù)后不良程度[2]。但實驗室生物指標還是缺乏。研究發(fā)現(xiàn)在高血壓自發(fā)腦出血的患者的血清中 IL-6 水平與腦損傷的程度（包括血腫量與占位效應(yīng)）相關(guān)，腦出血后局部與系統(tǒng)的驗證反應(yīng)隨疾病的嚴重程度變化[3]。血清IL-11 的水平與腦出血的預(yù)后也密切相關(guān)，提示IL-11 的水平是腦損傷的有效生物標記。 但腦脊液IL-11 的水平是否與重癥蛛網(wǎng)膜下腔出血預(yù)后相關(guān)，尚無報道。本項研究收集檢測重癥蛛網(wǎng)膜下腔出血患者腦脊液標本檢測腦脊液IL-11濃度。統(tǒng)計分析死亡組與生存組腦脊液IL-11結(jié)果。研究總結(jié)重癥動脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血患者腦脊液的IL-11與預(yù)后的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 研究對象

26例患者，男11例，女15例。年齡22-84歲，平均（54.3±12.0）歲。hunt-hess分級4級20例，5級6例?；颊叱霈F(xiàn)腦疝的選擇開顱手術(shù)。未出現(xiàn)腦疝的選擇腦室外引流術(shù)。

12例行腦室外引流：均在局麻下進行，選擇額角穿刺點，局部麻醉，切開頭皮約0.5cm，顱錐鉆孔，引流管穿刺約5cm，見血性腦脊液流出后，固定引流管，接通引流系統(tǒng)，最高點置于外耳道連線上15cm。

14例行開顱動脈瘤夾閉：均在全麻下進行，均取翼點入路，切開頭皮，皮瓣懸吊，骨窗成型約5×5cm，“Y”切開硬膜，分離蛛網(wǎng)膜，暴露載瘤動脈及動脈瘤頸，夾閉動脈瘤，減張縫合硬膜，棄骨瓣，置硬膜外引流，縫合頭皮。其中四例患者因腦室積血同時行腦室外引流術(shù)。

1.2 研究方法

腦脊液通過腦室外引流管及術(shù)中抽取腦池中腦脊液獲得，腦脊液標本離心20min，取上清-80℃保存。ELISA法檢測（制劑購于R&D 公司）：用0.05M PH9.碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/mL。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1mL，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3min。加一定稀釋的待檢樣品0.1mL于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1h，然后洗滌。同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔。于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1mL。37℃孵育0.5～1h，洗滌。于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1mL，37℃，10～30min。于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05mL。到酶標儀上讀數(shù)（OPD為底物是讀數(shù)波長為490nm，TMB為底物時波長為450nm）。

計劃收集所有患者前三天腦脊液標本[3]，因為在高血壓腦出血的研究中，發(fā)病前三天的腦脊液炎癥反應(yīng)程度與預(yù)后密切相關(guān)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS13.0軟件進行數(shù)據(jù)處理，數(shù)據(jù)間比較采用χ2檢驗與fisher精確概率法，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 腦脊液收集

26例患者共收集標本40例（計劃收集所有患者前三天腦脊液標本，但開顱手術(shù)患者未行腦室外引流的僅能術(shù)中收集一次。10例死亡患者僅能收集到死亡前一天。）。

收集方式：通過腦室外引流管12例，開顱術(shù)中獲得14例，其中4例開顱合并腦室外引流。

收集時間分布：40份腦脊液標本，發(fā)病第一天收集20份（10例發(fā)病當(dāng)天開顱手術(shù)者+4例開顱手術(shù)合并腦室外引流者+6例當(dāng)天行腦室外引流者），第二天14份（6例發(fā)病第二天行腦室外引流者+4例第一天行腦室外引流生存者+4例開顱手術(shù)合并腦海外引流生存者），第三天8份（6例腦室外引流管生存者+2例開顱手術(shù)合并腦海外引流生存者），第四天8份（6例腦室外引流管生存者+2例開顱手術(shù)合并腦海外引流生存者）。

2.2 生存組16例，死亡組10例

死亡組腦脊液IL-11（185.2±84.5 pg/mL）明顯高于生存組（101.2±65.6pg/mL），P<0.05，（本組患者病例數(shù)較少，僅能應(yīng)用fisher精確概率法）。

3 討論

中樞神經(jīng)系統(tǒng)是一個相對封閉且由其自身內(nèi)部動態(tài)調(diào)節(jié)平衡的系統(tǒng)，正常生理情況下，血腦屏障可以限制各種致病因子侵犯 。一旦病原體侵入，誘發(fā)局部的炎癥反應(yīng)，同時由于血腦屏障受損、通透性的增加，各種炎性細胞及因子侵入，產(chǎn)生免疫病理過程。

腦損傷早期，腦組織破壞，產(chǎn)生了大量刺激免疫系統(tǒng)的抗原，血腦屏障破壞、血管通透性增高，大量炎性細胞浸潤和激活。小膠質(zhì)細胞活躍，星形膠質(zhì)細胞增生，氧自由基和興奮性氨基酸增多。同時傷后腦水腫，組織缺血、缺氧，產(chǎn)生二次繼發(fā)腦損害引起強烈的免疫應(yīng)答過程[3]。

另外，動物實驗研究表明，不管是在顱腦損傷的臨床還是動物實驗中。急性顱腦損傷的病理過程與炎性細胞因子關(guān)系密切[4]。

在眾多的細胞因子中，IL-11是一種負有多種生物活性的多潛能細胞因子，同時具有抗炎作用?？梢砸种破乒羌毎钚?，改變神經(jīng)分型，刺激組織纖維化，調(diào)節(jié)軟骨細胞及B細胞功能[5-8]。健康人血清中的IL-11參考值不超過30 pg/mL，IL-11的半衰期很短，經(jīng)肝腎迅速代謝。僅有尿中可檢測到少量IL-11，因為腎小管的重吸收作用[9]。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元體外增殖中發(fā)現(xiàn)有 IL-11。體外實驗中IL-11刺激神經(jīng)干細胞的增殖并是神經(jīng)發(fā)育的重要調(diào)節(jié)因子[10]。臨床上發(fā)現(xiàn)IL-11參與哮喘患者氣道粘膜下纖維化與慢性重建并與疾病嚴重程度正相關(guān)[11]。

本項研究提示腦脊液中IL-11水平明顯與蛛網(wǎng)膜下腔出血患者的嚴重程度相關(guān)。結(jié)果說明隨著腦組織損傷的嚴重程度加大，釋放到腦脊液中的炎癥因子明顯增多。同時因為IL-11的半衰期短，使其可成為腦損傷的實時標記，反映腦損傷的嚴重程度并預(yù)測預(yù)后。為重度蛛網(wǎng)膜下腔出血的預(yù)后提供實驗室依據(jù)。

另外，本項研究雖然沒有腦積水患者，仍需要討論腦積水，因為腦積水的發(fā)生是影響腦出血預(yù)后的重要因素[12]。而蛛網(wǎng)膜下腔出血是誘發(fā)腦積水的重要原因，因而IL-11的升高無疑間接證明了其發(fā)生的原因。血清IL-11水平與腦積水也明顯相關(guān)。分析原因可能是IL-11刺激中腦導(dǎo)水管內(nèi)膜下纖維增生。

本項研究中腦室外引流應(yīng)用12例，其中部分引流目的不是因為腦積水，而是引流蛛網(wǎng)膜下腔積血，特別是腦室內(nèi)積血，因而未就是否有腦積水及其與IL-11關(guān)系做以分析。

總之，本項研究顯示，對于重癥蛛網(wǎng)膜下腔出血的患者，腦脊液的IL-11水平可以反映疾病的嚴重程度，預(yù)測預(yù)后。但導(dǎo)致IL-11增高釋放入中樞神經(jīng)系統(tǒng)的機制以及影響受損腦組織IL-11的因素需要進一步研究，另外，由于標本數(shù)目有限，關(guān)于IL-11在發(fā)病后時間推移后的變化需要進一步研究。

參 考 文 獻

[1] 關(guān)靖宇，盧天舒.顱內(nèi)破裂微小動脈瘤的急性期顯微手術(shù)治療[J].臨床軍醫(yī)雜志，2011，39（3）：427-428.

[2] Qureshi AI，Tuhrim S，Broderick JP，et al.Spontaneous intracerebral hemorrhage[J]. N Engl J Med，2001，344：1450-1460.

[3] TruetnerJS，SuzukiT，Dietrich WI .The effect of therapeutic hypothermia on the expression of inflammatory response genes following moderate traumatic brain injury in the rat[J]. Brain ResMolBrain Res，2005，138（2）：124-134.

[4] Morganti M C，Otto VI，el al. The role of inflammation in neurologic disease[J]. Current Opin Crit Care，2000，6（2）：98.

[5] Perini F，Morra M，Alecci M，et al. Temporal profile of serum anti-inflammatory and pro-inflammatory interleukins in acute ischemic stroke patients[J]. Neurol Sci，2001，22：289-296.

[6] Hsin YF，Wen JK，Ching YL.Plasma interleukin 11 levels correlate with outcome of spontaneous intracerebral hemorrhage[J]. Surgical eurology，2005，64：515-518.

[7] Harmegnies D，Wang XM，Vandenbussche P，et al. Characterization of a potent human interleukin-11 agonist[J]. Biochem J，2003，375：23-32.

[8] Mahboubi K，Biedermann BC，Carroll JM，et al. IL-11 activates human endothelial cells to resist immune-mediated injury[J]. J Immunol，2000，164：3837-3846.

[9] Cremer M，Schulze H，Linthorst G，et al. Serum levels of thrombopoietin，IL-11，and IL-6 in pediatric thrombocytopenias. Ann Hematol[J].1999，78：401-407.

[10] Mehler MF，Rozental R，Dougherty M，et al. Cytokine regulation of neuronal differentiation of hippocampal progenitor cells[J].Nature，1993，362：62-65.

[11] Minshall E，Chakir J，Laviolette M，et al. IL-11 expression is increased in severe asthma： association with epithelial cells and eosinophils[J].J Allergy Clin Immunol，2000，105：232-238.

[12] Liliang PC，Liang CL，Lu CH，Chang HW，Cheng CH，Lee TC，Chen HJ. Hypertensive caudate hemorrhage prognostic predictor，outcome，and role of external ventricular drainage[J]. Stroke，2001，32：1195-2000.