黃寧芳，唐國傳，余祖輝，顏鐘生，唐尚偉，陳強(qiáng)，李汶桎，勞顯麗，黃芫，方叢麗，宋志強(qiáng)

三七總皂苷對(duì)急性腦梗死患者血清VEGF和VEGFR含量的影響

黃寧芳，唐國傳，余祖輝，顏鐘生，唐尚偉，陳強(qiáng)，李汶桎，勞顯麗，黃芫，方叢麗，宋志強(qiáng)

目的：研究三七總皂苷（PNS）對(duì)急性腦梗死（ACI）患者血清血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）和VEGF受體（VEGFR）的含量影響。方法：選擇60例腦梗死患者分為治療組和對(duì)照組各30例，并設(shè)立健康組60例，治療組和對(duì)照組均給予腦梗死治療，治療組還給予PNS。采用ELISA法測定VEGF和VEGFR于入院時(shí)和治療第14天血清含量的變化，治療前及治療后14 d進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分。結(jié)果：治療后14 d，治療組的VEGF、VEGFR水平高于對(duì)照組（P＜0.05）；治療組的神經(jīng)功能評(píng)分與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：PNS能提高ACI患者的VEGF和VEGFR表達(dá)水平，且能改善神經(jīng)功能缺損。

腦梗死；三七總皂苷；血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子；血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體

ningfangjie＠163 com

血管內(nèi)皮生長因子（vascularendothelialgrowth factor，VEGF）又稱血管通透因子，是誘導(dǎo)和調(diào)控血管新生的多種因子中最重要的因子之一[1]，是目前已知的所有促血管生成因子中同時(shí)具備促血管增生和增強(qiáng)血管通透性功能的生長因子。血管內(nèi)皮生長因子受體（vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR）是VEGF的特異性受體。近年文獻(xiàn)報(bào)道，VEGF和VEGFR在缺血性腦卒中（acute cerebral infarction，ACI）患者組織中的表達(dá)與血管發(fā)生有密切的關(guān)系[2]。三七總皂苷（panax notoginseng saponins，PNS）對(duì)ACI有保護(hù)作用，雖然從促血管新生的角度，PNS對(duì)ACI后血漿VEGF表達(dá)有影響的研究已有不少報(bào)道，但對(duì)VEGFR的研究不多。本研究同時(shí)測定ACI患者血漿VEGF和VEGFR的含量，并觀察PNS對(duì)其影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2012年5月至2013年10月在我科住院的發(fā)病時(shí)間＜72 h的初發(fā)ACI患者60例，均符合中國急性缺血性腦卒中診治指南2010[3]，經(jīng)頭顱CT證實(shí)；男40例，女20例；年齡48～82歲，平均（79.1±9.1）歲；基底核梗死32例，額葉、顳葉、頂葉梗死20例，腦干梗死5例，小腦梗死3例；合并原發(fā)性高血壓病39例，2型糖尿病7例，冠心病14例。本研究獲得我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者或家屬簽署知情同意書。排除出血性卒中及有感染、腫瘤、免疫性疾病、血液病、心肝腎功能不全、急性心肌缺血、手術(shù)或外傷史及昏迷者。60例患者按入院先后順序按1∶1的比例分為2組各30例：①治療組30例，男17例，女13例；年齡49～82 歲，平均（78.8±8.2）歲；基底核梗死 15例，額葉、顳葉、頂葉梗死10例，腦干梗死3例，小腦梗死2例；合并原發(fā)性高血壓病20例，2型糖尿病3例，冠心病7例；②對(duì)照組30例，男16例，女14例；年齡48～81歲，平均（78.9±8.5）歲；基底核梗死16例，額葉、顳葉、頂葉梗死11例，腦干梗死2例，小腦梗死1例；合并原發(fā)性高血壓病19例，2型糖尿病3例，冠心病6例。2組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。另收集在我院體檢的職工干部中正常的人員60例為健康組，男38例，女 22例；年齡 51～81歲，平均（63.2±4.25）歲。3組年齡、性別經(jīng)齊同性檢驗(yàn)后差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

本研究采用前瞻性設(shè)計(jì)，通過住院觀察并分析各組患者的癥狀、相關(guān)檢驗(yàn)值及用藥干預(yù)后的變化情況。

1.2.1 治療方法 2組給予曲克蘆丁400mg+胞二磷膽堿1 000mg加入0.9%氯化鈉注射液250m L i.v.gtt，qd，腸溶阿司匹林100mg qd，伴有顱內(nèi)高壓者加用20%甘露醇。治療組在此基礎(chǔ)上加用注射用PNS 400mg（購于哈爾濱珍寶島制藥有限公司，400mg/支）加入0.9%氯化鈉注射液250m L i.v.gtt，qd，2周為一療程。

1.2.2 標(biāo)本采集及處理 所有患者均于發(fā)病后72 h內(nèi)和第14天時(shí)各采血1次，均于早晨空腹時(shí)抽取肘靜脈血3m L，所有血樣均以無菌試管留取，靜置30m in，3 000 r離心10m in收集血清，－20℃保存，健康組空腹采血1次。采用雙抗體夾心ELISA法測定血清VEGF和VEGFR濃度，VEGF和VEGFR試劑盒購自深圳晶美生物制品有限公司，嚴(yán)格按操作說明書進(jìn)行檢驗(yàn)。

1.2.3 臨床療效判定標(biāo)準(zhǔn) 神經(jīng)功能評(píng)分采用中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的《腦卒中患者臨床神經(jīng)功能缺損程度及療效評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)》[4]；使用改良愛丁堡斯堪的納維亞量表（Scandinavian stroke scale，SSS），將患者分為 3 型：輕型（10～15分）18例，中型（16～30分）26例，重型（31～45分）16例。全部患者分別在治療前及治療14 d進(jìn)行評(píng)分。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 21.0軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量結(jié)果以（x±s）表示，t檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組VEGF、VEGFR水平比較

入院后及第14天時(shí)，對(duì)照組、治療組的VEGF、VEGFR水平明顯高于健康組（P＜0.05），入院后治療組、對(duì)照組 VEGF和VEGFR水平無明顯無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療 14 d 后，治療組的 VEGF、VEGFR 水平高于對(duì)照組（P＜0.05），見表1。

2.2 治療組與對(duì)照組神經(jīng)功能評(píng)分比較

治療前，對(duì)照組與治療組的神經(jīng)功能評(píng)分分別為 （24.75±4.33） 分、（25.49±9.63）分，2組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，2組神經(jīng)功能明顯改善，對(duì)照組與治療組的神經(jīng)功能評(píng)分分別為（13.36±6.53）分、（10.66±4.23）分，治療組與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.3 不同神經(jīng)功能缺損程度VEGF、VEGFR水平比較

隨著神經(jīng)功能缺損程度加重，VEGF和VEGFR水平均于發(fā)病后72 h及14 d逐漸升高，輕型、中型和重型患者在組間、不同時(shí)點(diǎn)、組間和不同時(shí)點(diǎn)交互作用中差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表 2。

3 討論

研究發(fā)現(xiàn)，ACI急性期有大量的生長因子和細(xì)胞因子表達(dá)以對(duì)抗興奮毒性、缺氧、酸中毒、氧化應(yīng)激等損傷。Marti等[1]和何佳等[5]發(fā)現(xiàn)，在腦缺血48 h和72 h的缺血中心區(qū)及周圍腦組織可見VEGF和兩種VEGFR不同程度上調(diào)。VEGF和VEGFR是對(duì)血管形成具有特異性的重要生長因子，VEGF和VEGFR有高度親和力，VEGF通過與其受體結(jié)合調(diào)控血管發(fā)生和成熟。由于腦組織對(duì)缺氧非常敏感，低氧作為一種信號(hào)激活VEGF/VEGFR系統(tǒng)，促使半暗帶VEGF和VEGFR高表達(dá)，并能特異性地作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，促使半暗帶大量新生血管形成，促進(jìn)側(cè)枝循環(huán)的建立，增加受累腦組織的灌注及供氧，使神經(jīng)元凋亡或壞死數(shù)量減少，從而最終減輕腦缺血再灌注腦損傷。

本研究顯示，ACI患者血清VEGF和VEGFR水平明顯升高，于發(fā)病后即升高，持續(xù)至第14天。大量實(shí)驗(yàn)表明，ACI發(fā)生后數(shù)小時(shí)梗死灶內(nèi)及缺血半暗帶區(qū)均可見 VEGF-mRNA、VEGF蛋白及 VEGFR表達(dá)，7 d達(dá)高峰，后逐漸下降，至14 d仍維持高水平，其含量的多少與缺血缺氧程度呈正比，這與動(dòng)物研究結(jié)果一致，顯示在第1～14天VEGF和VEGFR免疫活性增高，3 d后表現(xiàn)強(qiáng)烈的血管生成活性[5,6]。這提示在腦梗死急性期缺血腦組織對(duì)VEGF和VEGFR的需求增加，有利于內(nèi)皮細(xì)胞增殖和血管再生的長期需求。隨著側(cè)枝循環(huán)的建立，VEGF和VEGFR的表達(dá)也逐漸減少，說明VEGF和VEGFR的變化隨缺血缺氧的程度動(dòng)態(tài)變化。

表1 3組不同時(shí)點(diǎn)血清VEGF和VEGFR水平比較（x±s）

表2 不同神經(jīng)功能缺損程度VEGF、VEGFR水平比較

動(dòng)物研究發(fā)現(xiàn)，VEGF和VEGFR既可反映病情的嚴(yán)重程度，也是腦梗死急性期的自我保護(hù)因素，其直接的神經(jīng)保護(hù)作用可以減輕急性期的缺血損傷，而神經(jīng)元發(fā)生、血管再生有助腦損傷的長期修復(fù)[5,7,8]。本研究中不同神經(jīng)功能缺損程度VEGF、VEGFR水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），這表明 VEGF和 VEGFR 水平與損傷程度有關(guān)，對(duì)判斷缺血缺氧程度和病情輕重有一定價(jià)值。亦有文獻(xiàn)報(bào)道，VEGR和VEGFR水平與患者預(yù)后密切相關(guān)[9,10]。

本研究還顯示，ACI經(jīng)PNS干預(yù)治療后，能有效促進(jìn)VEGF和VEGFR表達(dá)，且使其維持在一個(gè)相對(duì)較高的水平。目前已有藥理研究證明PNS是一種Ca2+阻滯劑，能降低細(xì)胞內(nèi)鈣、鈉等含量，抑制鈣超載，緩解腦水腫，對(duì)缺血再灌注損傷有保護(hù)作用，能明顯抑制由ADP引起的血小板凝集，可抑制血栓形成，降低腦細(xì)胞耗氧量，延長細(xì)胞生存時(shí)間，縮小梗死范圍，減少致殘率和死亡率。同時(shí)有學(xué)者發(fā)現(xiàn)急性腦損傷48 h內(nèi)開始應(yīng)用PNS可促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)[11]。結(jié)合本研究結(jié)果，ACI患者入院前后VEGF和VEGFR明顯高于健康組；治療組應(yīng)用PNS干預(yù)后VEGF和VEGFR明顯高于對(duì)照組，且治療組神經(jīng)功能恢復(fù)優(yōu)于對(duì)照組。筆者認(rèn)為PNS主要通過誘導(dǎo)VEGF和VEGFR的表達(dá)，同時(shí)加強(qiáng)腦梗死患者新生血管的形成和側(cè)枝循環(huán)的建立，改善腦血液供應(yīng)，促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)。因此，VEGF和VEGFR可能可以成為反映腦梗死缺血缺氧嚴(yán)重程度與預(yù)后的一個(gè)指標(biāo)，但PNS治療上調(diào)VEGF和VEGFR濃度的確切機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

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E ffect of Panax Notoginseng Saponins on the Concentration of Plasm a VEGF and VEGFR of

the Patients with Acute Cerebral In farction

HUANG Ning-fang,TANG Guo-chuan,YU Zu-hui,YAN Zhong-sheng,TANG Shang-wei,CHEN Qiang,LIWen-zhi,LAO Xian-li,HUANG Yuan,FANG Cong-li,SONG Zhi-qiang.Departmentof InternalMedicine,Fangcheng DistrictPeople'sHospitalofFangchenggang city,Guangxi 538021,China

Objective:To study the effectof Panax Notoginseng Saponins(PNS)on the concentration of plasma vascular endothelialgrowth factor(VEGF）and plasma vascular endothelial growth factor receptor(VEGFR)of the patientswith acute cerebral infarction(ACI).Methods:Sixty ACIpatientswere divided into treatmentGroup and controlgroup(n=30 in each group).Healthy Group of 60 healthy casesalso setup.The treatmentgroup and control group were given routine therapy,and the treatment group was given PNS.At admission and 14 days after the treatment,ELISA was used to determine VEGF and VEGFR concentration,and neurological deficit scoreswere recorded.Results:At the 14 days,the concentration of VEGFand VEGFR in the treatmentgroup were higher than those of the controlgroup (P＜0.05),and therewassignificantdifference between the neurologicaldeficitscoresof the treatmentgroup and the controlGroup(P＜0.05).Conclusion:PNS can improve VEGFand VEGFR expression,and can improveneural function defectof ACIpatients.

cerebral infarction;Panax Notoginseng Saponins;vascular endothelial growth factor;vascular endothelialgrowth factor receptor

R741;R741.05

A

DOI10.3870/sjsscj.2014.05.009

防城港市防城區(qū)人民醫(yī)院內(nèi)科 廣西防城港538021

廣西防城港市科研課題 [No.防科字(2012)9號(hào)]

2014-05 -24

黃寧芳

（本文編輯：王晶）