黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)佳木斯學(xué)院,黑龍江 佳木斯 154007
七菊蘆薈飲對黃褐斑模型小鼠SOD活性和MDA含量影響的實驗研究
韓瑩張巖李英姿趙晶李懷軍
黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)佳木斯學(xué)院,黑龍江 佳木斯 154007
目的探討七菊蘆薈飲內(nèi)服對黃褐斑小鼠皮膚及血液中SOD, MDA含量的影響。方法實驗采用紫外線照射法構(gòu)建黃褐斑小鼠模型,檢測皮膚及血清中的SOD及MDA含量。結(jié)果七菊蘆薈飲給藥組小鼠皮膚中SOD活性較模型組明顯升高,MDA含量降低。結(jié)論七菊蘆薈飲對紫外線照射所致黃褐斑有明顯的改善作用。
七菊蘆薈飲;黃褐斑;超氧化岐化酶;丙二醛
黃褐斑是臨床上常見而又難以治愈的皮膚病之一, 是多發(fā)性損容性慢性皮膚病,嚴(yán)重影響患者的身心健康,且其發(fā)病率有逐年增加的趨勢,多見于成年女性,臨床表現(xiàn)常見發(fā)生在面部的對稱性蝴蝶狀或局限性褐色或淡褐色斑。本研究基于中醫(yī)對黃褐斑的研究和黃褐斑臨床療程較長的特點,采用七菊蘆薈飲治療黃褐斑。旨在從現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的角度研究七菊蘆薈飲祛斑的作用機理,為中醫(yī)美容找到現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的理論依據(jù),為進(jìn)一步研制中藥美容制劑奠定實驗基礎(chǔ)。
1.1 材料
1.1.1 藥物 七菊蘆薈飲由蘆薈葉,白菊花,三七根組成,購于佳院中藥制劑室,取三七根50g,白菊花50g煎藥取汁,將新鮮蘆薈20g榨汁加入,備用;維生素C泡騰片,由廈門美好醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)。
1.1.2 試劑 硫化鈉,由廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn),批號20001204-2;SOD和MDA活性測定試劑盒,均購自南京建成生物工程研究所,批號20041221。
1.1.3 實驗動物 昆明種小鼠,雌性,體重18~20g,由佳木斯大學(xué)實驗動物中心提供,合格證號:黑動第99102001號。
1.1.4 儀器設(shè)備 SS—03型紫外線光療儀,由上海Sigma高技術(shù)有限公司生產(chǎn);奧林巴斯BX41型研究用熒光顯微鏡,由日本奧林巴斯公司生產(chǎn);半自動生化分析SBA-710,由長春塞諾邁得公司生產(chǎn);電子分析天平FA2004N,由塞多利斯公司生產(chǎn);722N型分光光度計,由上海精密儀器有限公司分析儀器廠生產(chǎn);組織粉碎機FW135,由天津泰斯特公司生產(chǎn);PL602S型電子天平,由梅特勒-托利多儀器有限公司生產(chǎn);組織勻漿機JJ-2,由金壇市榮華儀器廠生產(chǎn)。
1.2 方法
1.2.1 實驗動物分組 選取昆明種普通級雌性小白鼠60只,體重18~20g,隨機分為6組,每組10只,即空白對照組、模型對照組、陽性對照組、七菊蘆薈飲低劑量組、七菊蘆薈飲中劑量組和七菊蘆薈飲高劑量組。
1.2.2 動物模型的制備[1]先將小鼠背部右側(cè)器械脫毛,面積4cm×3cm,后用10%的硫化鈉水溶液每周去毛一次,除空白對照組不進(jìn)行紫外線照射外,其余各組均選取波長為275nm~320nm 的中波紫外線每日照射小鼠1次,每次照射60min,連續(xù)照射8周,奧林巴斯熒光顯微鏡觀察造模是否成功。
1.2.3 給藥 動物成模后,各組均灌胃給藥,正常對照組和模型對照組分別灌服蒸餾水10ml/kg/d,陽性對照組灌服維生素C溶液(按維生素C的劑量折算), 七菊蘆薈飲低、中、高劑量組分別灌服七菊蘆薈飲溶液10ml/kg/d、20ml/kg/d、30ml/kg/d,連續(xù)給藥8周。
1.2.4 指標(biāo)測定[2]采用眼球摘除法取血3~5ml, 3000~4000r/min離心, 取血清,檢測血清中SOD和MDA含量;實驗小鼠全部斷頸處死,取適量背部脫毛處的皮膚,組織勻漿后測定SOD和MDA含量。
實驗結(jié)果表明,與正常對照組比較,小鼠經(jīng)紫外線照射后,模型對照組皮膚組織及血液中SOD活性下降,MDA含量增加,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);與模型對照組比較,各給藥組皮膚組織及血液中SOD活性顯著升高,MDA含量顯著降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與陽性對照組比較,中藥低、中、高劑量組均無顯著性差異(P>0.05)七菊蘆薈低、中、高劑量組之間無差異統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果見表1、表2。
表1 七菊蘆薈飲對黃褐斑小鼠皮膚組織中SOD活性及MDA含量的影響
注:與模型對照組相比:*P<0.05,**P<0.01。
表2 七菊蘆薈飲對黃褐斑小鼠血液中SOD活性及MDA含量的影響
注:與模型組對照組相比,*P<0.05,**P<0.01。
黃褐斑是常見于顏面部位的色素代謝障礙性皮膚病,它不但影響美觀,而且與機體的整個功能狀態(tài)密切相關(guān)。黃褐斑的發(fā)病機理復(fù)雜,一般認(rèn)為是由多種因素導(dǎo)致黑素細(xì)胞中黑色素過量表達(dá)及代謝障礙所致[3]。黑色素的形成與脂質(zhì)過氧化和酪氨酸酶密切相關(guān)。人體在應(yīng)激狀態(tài)下或免疫功能體下時,可使體內(nèi)氧自由基增多,SOD相對不足,導(dǎo)致過多的氧自由基與真皮層細(xì)胞產(chǎn)生氧化反應(yīng),形成大量的脂褐素(過氧化脂質(zhì)),形成黃褐斑或妊娠斑[4]。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為,黃褐斑多與肝失條達(dá)、憂思無度、飲食失調(diào)等導(dǎo)致氣機郁滯,氣滯而血行不暢,血瘀氣滯,面部肌膚失營養(yǎng)、脈絡(luò)瘀阻,而發(fā)為黃褐斑[5]。肝氣郁結(jié)化火,瘀血郁積化熱。故而對于氣滯血瘀兼熱型黃褐斑,應(yīng)從疏肝理氣,活血化瘀兼清熱進(jìn)行論治。
本研究自擬方藥七菊蘆薈飲,由三七、菊花和蘆薈三味藥組成,三七自古以來就被稱為活血化淤,消腫定痛、清熱平肝之佳品,白菊花具有平肝清熱之功,蘆薈有美白、袪斑、潤膚的功效。全方共奏活血化瘀、清肝解毒之效。本實驗研究結(jié)果表明:七菊蘆薈飲能顯著提高紫外線照射模型動物皮膚組織及血液中SOD的活性, 降低皮膚組織及血液中MDA的含量,抑制機體內(nèi)過氧化程度,從而使黑色素細(xì)胞的生成減少,減少皮膚的色素沉著。本研究為內(nèi)服中藥治療黃褐斑的臨床應(yīng)用提供了實驗依據(jù)。
[1] 汪南玥,陳家旭,吳曉丹.肝郁型黃褐斑小鼠模型的建立與現(xiàn)有模型的比較研究[J].中華中醫(yī)藥雜志,2007,22(5):325-327
[2] 鄭慕雄,郭義龍,陳玉興.柴紅丸治療黃褐斑小鼠模型的實驗研究[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志,2011,6(2):112-114.
[3] 劉冬梅,高進(jìn),朱林學(xué),等.400例黃褐斑患者發(fā)病因素分析[J].中國麻風(fēng)皮膚病雜病,2006,22(4):303-304.
[4] 苑光軍,姜醒,劉斌,等.當(dāng)歸芍藥散對黃褐斑模型SOD、MDA及病理形態(tài)學(xué)影響的研究[J].中醫(yī)藥信息,2008,25(6):81-82.
[5] 葉世龍.論黃褐斑的病因病機[J].中華中醫(yī)藥雜志,2007,22(9): 636-638.
黑龍江省中醫(yī)藥管理局科研項目,項目編號:ZHY12-W020。
韓瑩,黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)佳木斯學(xué)院,講師,Tel: 15846998960。
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