1.安徽中醫(yī)藥大學(xué)，安徽 合肥 230031；2. 安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，安徽 合肥 230031

真武湯對(duì)慢性心力衰竭大鼠血清sFas、sFas-L的影響

張華芳1胡業(yè)彬2何佳2姚淮芳2

1.安徽中醫(yī)藥大學(xué)，安徽 合肥 230031；2. 安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，安徽 合肥 230031

目的探討真武湯對(duì)CHF大鼠血清sFas、sFas-L的影響。方法建立心衰大鼠模型，采用Elisa法檢測(cè)血清sFas、sFas-L的表達(dá)。結(jié)果與模型組比較，中藥組真武湯和西藥組依那普利血清中sFas及sFas-L明顯隆低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論真武湯有明顯的延緩大鼠CHF進(jìn)展，顯著減輕CHF大鼠心衰癥狀，增強(qiáng)心肌收縮力的作用，能通過(guò)調(diào)控血清中sFas、sFas-L的水平變化來(lái)影響CHF大鼠心肌細(xì)胞的凋亡。

真武湯；細(xì)胞凋亡；sFas；sFas-L

近年來(lái)，隨著我國(guó)人口呈現(xiàn)老齡化的問(wèn)題，尾隨其后的社會(huì)問(wèn)題也引起了人們的廣泛關(guān)注。慢性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)是一個(gè)復(fù)雜的臨床綜合征，由于其患病率和死亡率高，倍受臨床關(guān)注。據(jù)世界衛(wèi)生組織估計(jì)，到2020年心衰將成為死亡的首要病因[1]。當(dāng)前采用的藥物治療雖能改善心衰癥狀，延緩死亡，但要使其治愈尚乏良策。本文通過(guò)簡(jiǎn)易縮窄腹主動(dòng)脈的方法，制造容量負(fù)荷，建立大鼠心肌肥厚和心力衰竭模型，來(lái)觀察大鼠血清中sFas、sFas-L變化，從而為臨床提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wister大鼠60只，體重在180～220g，由安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)：皖醫(yī)實(shí)動(dòng)準(zhǔn)字01號(hào)。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物 “真武湯”方藥組成：熟附片10g，茯苓15g，白術(shù)10g，白芍15g，生姜15g，按比例配伍組成，加入500ml清水，煎30min，過(guò)濾濃縮至1.0g/ml的生藥煎劑，4℃保存，給藥前復(fù)溫。 整個(gè)藥材的來(lái)源與制作來(lái)自安徽中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院。

1.3 實(shí)驗(yàn)試劑 sFas和sFasL酶聯(lián)免疫試劑盒，購(gòu)自上海森熊科技實(shí)業(yè)有限公司。

1.4 方法 選取健康雄性Wister大鼠60只，分為假手術(shù)組10只，造模組50只。造模組采用腹主動(dòng)脈縮窄法復(fù)制慢性心力衰竭大鼠模型,術(shù)后將造模組隨機(jī)分為3組，即：模型組、中藥組、西藥組，并在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中觀察大鼠的一般情況。各組均在造模4周后給藥，中藥組給予真武湯灌胃，西藥組給予依那普利灌胃，模型組給予相同體積的生理鹽水灌胃，各給藥組劑量按臨床劑量折算。實(shí)驗(yàn)4周后腹主動(dòng)脈取血，ELISA法檢測(cè)血清中sFas、sFas-L的水平變化。

2 結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與假手術(shù)組比較，模型組大鼠血清中sFas及sFas-L明顯升高，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),表明造模成功。與模型組比較，中藥組真武湯和西藥組依那普利血清中sFas及sFas-L明顯隆低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)果見表1：

表1 真武湯對(duì)慢性心力衰竭大鼠sFas、sFas-L的影響

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

3 討論

慢性心力衰竭(CHF)是各種心臟疾病導(dǎo)致心功能不全的一種綜合征，近年來(lái)研究證明，心肌細(xì)胞凋亡是CHF過(guò)程中心肌細(xì)胞喪失的重要機(jī)制,心肌細(xì)胞凋亡參與了CHF的基本病理生理進(jìn)程[2-3]，而Fas家族參與其過(guò)程。Fas即CD95分子, Fas的可溶性形式(sFas)以可溶性形式存在于血液中。Fas配體(Fas-L)是由金屬蛋白酶類裂解膜結(jié)合Fas-L形成的一種可溶性形式，即可溶性Fas配體(sFas-L)[4],血漿sFas-L可與靶細(xì)胞表面的Fas結(jié)合后,向攜帶Fas的靶細(xì)胞內(nèi)部傳遞死亡信號(hào),觸發(fā)靶細(xì)胞的凋亡程序,造成細(xì)胞的凋亡[5]。有些學(xué)者認(rèn)為sFas是凋亡的制因子,而Fas、Fas-L、和sFas-L則是凋亡的誘導(dǎo)因子。同時(shí)近年來(lái)中醫(yī)藥治療心力衰竭的機(jī)制不斷被深入探討，中醫(yī)心血管研究專家也已從心力衰竭細(xì)胞凋亡基因表達(dá)的分子生物學(xué)角度來(lái)觀察中醫(yī)藥療效，使中醫(yī)心血管治療有了長(zhǎng)足的發(fā)展。據(jù)此許多學(xué)者應(yīng)用真武湯治療CHF取得了顯著療效。劉鎮(zhèn)等[6]通過(guò)真武湯對(duì)心腎陽(yáng)虛型心力衰竭(CHF)患者血漿B型鈉尿肽(BNP)與一氧化氮(NO)水平的影響，證實(shí)真武湯治療CHF療效確切，可明顯改善患者的心功能。張根生[7]通過(guò)觀察真武湯加減方結(jié)合西醫(yī)治療慢性心力衰竭的臨床療效得出結(jié)論：真武湯加減方結(jié)合西醫(yī)常規(guī)治療可有效治療慢性心衰，且臨床療效顯著。我們也通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)真武湯具有明顯增加CHF大鼠心肌收縮力，改善CHF大鼠心衰癥狀的作用，能顯著延緩CHF大鼠心室重塑。其機(jī)制可能是通過(guò)調(diào)控血清中sFas、sFas-L的水平來(lái)減緩CHF大鼠的心肌細(xì)胞的凋亡進(jìn)程，從而達(dá)到減輕癥狀，延緩心衰進(jìn)程的作用。

[1]李立志.陳可冀治療充血性心力衰竭經(jīng)驗(yàn)[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志,2006,4(2):136-138.

[2]Konstantinidis K,Whelan RS,Kitsis RN.Mechanisms of cell death in heart disease[J].Cardiovasc Drugs Ther,2012,26(4):321-30.

[3]Chiong M,Wang ZV,Pedrozo Z, et al.Cardiomyocyte death:mechanisms and transational implications[J].Cell Death Dis,2011,12(2):E244.

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[5]Poonyachoti S,Deachapunya C.Mochilatory effects of phytoestrogens on the expression of Fas ligand and the release of cytochrome C in normal and cancerous endometrial cell[J].J MED ASSOC,2012,12:S105-12.

[6]劉鎮(zhèn)，宋銀枝，古春花，等.心腎陽(yáng)虛型心衰患者用真武湯治療前后血漿B型鈉尿肽與一氧化氮的變化[J].黑龍江醫(yī)學(xué)，2012,36(6):407-408,419.

[7]張根生.真武湯治療慢性心力衰竭50例[J].中國(guó)中醫(yī)藥遠(yuǎn)程教育，2011，9(3)：164-165.

安徽省教育廳自然科學(xué)研究項(xiàng)目，編號(hào)：KJ2009A043Z。

張華芳(1984-)，女，碩士研究生。

姚淮芳，安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院干部心內(nèi)科。

R285.5

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1007-8517(2014)03-0027-01

2013.12.11)