石玉祥，甄 龍，張永英，玄家潔

(1.河北工程大學(xué),河北 邯鄲 056038；2.河北省禽病工程技術(shù)研究中心，河北 邯鄲 056001)

復(fù)方中藥和益生素聯(lián)合應(yīng)用對肉雞舍環(huán)境質(zhì)量和抗病力影響

石玉祥1，2，甄 龍1，2，張永英1，2，玄家潔1，2

(1.河北工程大學(xué),河北 邯鄲 056038；2.河北省禽病工程技術(shù)研究中心，河北 邯鄲 056001)

為研究改善雞舍環(huán)境質(zhì)量和增強肉雞抗病力的生態(tài)調(diào)控技術(shù)，試驗通過在肉雞飲水中添加復(fù)方中藥和益生素，分析雞舍空氣氨氣濃度、大腸桿菌數(shù)量及肉雞小腸SIgA和盲腸中大腸桿菌、乳酸桿菌數(shù)量，并統(tǒng)計分析了肉雞盲腸和舍內(nèi)空氣中致病性大腸桿菌的血清型。結(jié)果表明，與對照組相比，肉雞飲用復(fù)方中藥和益生素后，雞舍空氣氨氣濃度、盲腸內(nèi)大腸桿菌數(shù)量下降了6.2 mg/m3、1.62此處是否確實單位(mg/m3)，胸腺、法氏囊免疫指數(shù)、SIgA、盲腸內(nèi)乳酸桿菌數(shù)量分別上升了0.71、0.68、0.35 OD、1.45 log CFU/g，上述檢測指標(biāo)均有顯著性變化(P<0.05)。這表明復(fù)方中藥和益生素聯(lián)合應(yīng)用可改善雞舍環(huán)境質(zhì)量和增強肉雞抗病力，從雞舍空氣分離的致病性大腸桿菌血清型及其對雞舍空氣的污染程度與肉雞腸道內(nèi)致病性大腸桿菌的種類和數(shù)量有關(guān)。

肉雞；益生素；復(fù)方中藥；環(huán)境；抗病力

雞舍生態(tài)環(huán)境質(zhì)量已經(jīng)成為養(yǎng)雞業(yè)可持續(xù)性發(fā)展的主要瓶頸之一，雞舍內(nèi)空氣中致病性大腸桿菌和氨氣對雞舍環(huán)境污染尤為嚴(yán)重[1-3]。目前改善雞舍生態(tài)環(huán)境質(zhì)量的研究主要集中在改善雞舍通風(fēng)換氣、雞糞便的處理、雞舍消毒及降低飼養(yǎng)密度方面，臨床應(yīng)用中盡管在一定程度上控制了雞舍空氣中致病性大腸桿菌和氨氣，但仍存在引起生態(tài)環(huán)境的改變?nèi)绛h(huán)境中細(xì)菌種類的變化和細(xì)菌耐藥性等某些難以克服關(guān)鍵技術(shù)的問題[1,4]。本試驗研究改善雞舍環(huán)境質(zhì)量和增強肉雞抗病力的生物防治方法，為復(fù)方中藥和益生素的開發(fā)和利用提供理論依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗肉雞購于山東聊城鳳祥集團；小白鼠購于河北醫(yī)科大學(xué)。普通肉湯、斜面培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂、麥康凱、伊紅美藍均按其使用說明進行配制。復(fù)方中藥由黃芪、紅花、女貞子等12味市銷中藥組方，水煎，達到1 mL藥液相當(dāng)于1 g中藥。益生素復(fù)合物其主要成分為芽孢桿菌、乳酸菌、酵母菌及菊糖，活菌含量為 1.5 ×109CFU/g。大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)抗O血清購于中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，共80種。

1.2 試驗設(shè)計與分組

隨機選擇結(jié)構(gòu)和周圍環(huán)境相似的雞舍作為Ⅰ、Ⅱ組,每組各有三個重復(fù)，每個雞舍各飼養(yǎng)5000只817肉雞，根據(jù)其飼養(yǎng)管理和免疫方法進行日常管理和免疫。從1至9日齡向Ⅱ組肉雞飲水中添加0.15%益生素復(fù)合物，于10日至12日齡時向Ⅱ組飲水中添加0.1%復(fù)方中藥；2周后，再依次按同樣劑量和方法分別添加益生素復(fù)合物和復(fù)方中藥；Ⅰ組作為對照組，除不向飲水中添加益生素復(fù)合物和復(fù)方中藥外，其他條件均相同。

1.3 指標(biāo)檢測及方法

于21 d、42 d按照 HJ 534-2009[5]檢測雞舍空氣氨的濃度；在每個雞舍的走廊內(nèi)距地面1.0 m處均勻放置16個平皿，采用自然沉降法接種細(xì)菌，然后分離致病性大腸桿菌。同時各組隨機選擇50只肉雞，采集心臟血液5 mL，待凝固后收集血清；然后剖開肉雞腹腔后，取其胸腺、法氏囊，剔除周圍脂肪，稱其鮮重，并按下式計算免疫器官指數(shù)；同時用細(xì)線緊緊扎住肉雞小腸和盲腸入口處，將扎口小腸和盲腸分別取下來，保持盲腸內(nèi)容物與外界隔絕，按常規(guī)方法檢測肉雞盲腸內(nèi)容物中大腸桿菌、乳酸桿菌數(shù)量；再利用試劑盒按ELLSA方法檢測小腸的SIgA濃度；比較42日齡肉雞的腸道中致病性大腸桿菌和舍內(nèi)空氣中致病性大腸桿菌血清型的差異性。

免疫器官指數(shù)計算公式：免疫器官指數(shù)=(免疫器官鮮重/活重)×100 %

1.4 數(shù)據(jù)處理

檢測數(shù)據(jù)用SPSS 11.5軟件進行方差分析與多重比較，統(tǒng)計結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 雞舍內(nèi)氨氣濃度和雞舍空氣致病性大腸桿菌檢測結(jié)果

由表1可知，21日齡時，與正常對照組相比，Ⅱ組肉雞應(yīng)用益生菌和復(fù)方中藥后，雞舍內(nèi)氨氣濃度顯著降低(P<0.05)；42日齡時，與正常對照組相比，Ⅱ組肉雞應(yīng)用益生菌和復(fù)方中藥后，雞舍內(nèi)氨氣濃度和大腸桿菌檢出率均顯著降低(P<0.05)。

表1 雞舍內(nèi)氨氣濃度和雞舍空氣致病性大腸桿菌檢測結(jié)果Table 1 The results of test on ammonia in henhouse and pathogenic escherichia coli in the henhouse air

注：同列肩注不同小寫字母表示差異性顯著(P<0.05)。下同。

Notes: Values with different lowercase superscripts in the same column indicate significant difference (P<0.05).The same as below.

2.2 肉雞免疫指標(biāo)和盲腸中大腸桿菌、乳酸桿菌檢測結(jié)果

由表2可知，21日齡時，與正常對照組相比，Ⅱ組肉雞使用益生素和復(fù)方中藥后，盲腸大腸桿菌有顯著性差異(P<0.05)。而胸腺免疫指數(shù)、法氏囊免疫指數(shù)和腸道SIgA濃度及乳酸桿菌數(shù)量均無顯著性差異(P>0.05)；42日齡時，與正常對照組相比，Ⅱ組肉雞使用益生素和復(fù)方中藥后，法氏囊免疫指數(shù)和腸道SIgA濃度及盲腸大腸桿菌和乳酸桿菌數(shù)量均有顯著性差異(P<0.05)。

2.3 肉雞盲腸和舍內(nèi)空氣中致病性大腸桿菌的血清型比較結(jié)果

由表3可知，42日齡時，Ⅰ、Ⅱ二組從肉雞盲腸和雞舍內(nèi)分離的致病性大腸桿菌數(shù)均有顯著性差異(P<0.05)。此外，二組從肉雞盲腸中分離的致病性大腸桿菌分別與從各自雞舍內(nèi)空氣中分離的致病性大腸桿菌血清型相比，均有相似性。

3 討 論

腸道微生物既具有參與并促進分解消化道內(nèi)含氮化合物的能力，又具有利用氮源合成氨基酸和菌體蛋白質(zhì)的能力。研究表明，普通雛雞后端消化道內(nèi)的蛋白質(zhì)與氨基酸含量明顯低于無菌雛雞，主要在于普通雞能利用尿素，而無菌雞則無此功能。由腸道細(xì)菌尿素酶分解尿素而產(chǎn)生的部分氨可被腸道吸收，作為合成氨基酸的原料。此外，腸道和瀉殖腔中的尿酸氮也可以通過腸管逆蠕動，轉(zhuǎn)移到盲腸，由盲腸微生物分解，進入再循環(huán)，有利于動物充分利用低蛋白日糧中氮源[3,6]。本試驗結(jié)果表明，肉雞應(yīng)用益生菌和復(fù)方中藥后，肉雞舍空氣氨氣濃度、盲腸內(nèi)大腸桿菌數(shù)量明顯下降，盲腸內(nèi)乳酸桿菌數(shù)量顯著上升，肉雞舍空氣中分離出致病性大腸桿菌數(shù)量也明顯減少。這表明聯(lián)合應(yīng)用益生菌和復(fù)方中藥可能優(yōu)化了腸道內(nèi)的菌群，提高了飼料中的氮源利用率，氮排泄量減少，其作用機理有待于進一步研究。

表2 肉雞免疫指標(biāo)和盲腸中大腸桿菌、乳酸桿菌數(shù)量Table 2 The immune index and pathogenic escherichia coli and Lactobacillus of broiler cecum

表3 42日齡肉雞盲腸和舍內(nèi)空氣中致病性大腸桿菌的血清型比較Table 3 Comparisons on serotype of pathogenic escherichia coli from broiler cecum and henhouse air

益生菌和某些中藥不僅本身作為抗原物質(zhì)激活免疫系統(tǒng)，還能促進免疫器官如黏膜相關(guān)性淋巴組織或腸黏膜相關(guān)性淋巴組織的發(fā)育，增強體液免疫或細(xì)胞免疫功能[7-8]。本試驗結(jié)果顯示，肉雞應(yīng)用益生菌和復(fù)方中藥后，改善了肉雞腸道菌群，抑制了致病性大腸桿菌的繁殖；另一方面也說明復(fù)方中藥和益生菌能夠共同刺激肉雞的免疫器官發(fā)育和腸道淋巴細(xì)胞分泌功能，提高肉雞抑制病原感染的能力。此外，試驗結(jié)果表明早期給雛雞補充益生素比后期補充益生素效果好，其原因有待于進一步研究。

患病動物和帶菌者是大腸桿菌病的主要傳染源，通過糞便排出病原菌，散布于外界，污染水源、空氣等周圍環(huán)境或畜禽體表，當(dāng)畜禽采食、飲水或呼吸空氣時，往往通過呼吸道或消化道而感染疾病[9]。本研究結(jié)果表明，肉雞盲腸內(nèi)致病性大腸桿菌和肉雞舍內(nèi)空氣中致病性大腸桿菌的血清型有相似性。這表明空氣內(nèi)致病性大腸桿菌可能來源于腸道，其同源性有待于進一步研究。

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[2]李萬軍.益生素對肉雞生產(chǎn)性能及雞舍空氣質(zhì)量的影響[J].畜牧與獸醫(yī),2012,44(6):53-54.

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《家畜生態(tài)學(xué)報》連續(xù)入選RCCSE中國核心學(xué)術(shù)期刊(A)

武漢大學(xué)中國科學(xué)評價研究中心( Research Center for Chinese Science Evaluation，RCCSE)2013年中國學(xué)術(shù)期刊評價報告業(yè)已公布，《家畜生態(tài)學(xué)報》繼續(xù)入選RCCSE中國核心學(xué)術(shù)期刊(A)。

武漢大學(xué)中國科學(xué)評價研究中心是一個文理交叉的跨學(xué)科的學(xué)術(shù)機構(gòu)，是我國高等院校中第一個綜合性的科學(xué)評價研究中心，是集科學(xué)研究、人才培養(yǎng)和評價咨詢服務(wù)為一體的多功能的中介性實體機構(gòu)。中心學(xué)術(shù)期刊評價主要采用定性與定量相結(jié)合的綜合集成方法，通過信息計量(包括文獻計量、科學(xué)計量等)等多種途徑進行綜合性的定量研究和評價，并用層次分析法確定權(quán)重，建立指數(shù)模型，由此而得到的期刊綜合指數(shù)及其排序。

由中國科教評價網(wǎng)和中國科學(xué)評價研究中心共同推出的第三屆中國學(xué)術(shù)期刊評價排行榜中，共評選出權(quán)威期刊(A+)312種，核心期刊(A)961種，擴展核心期刊(A-)653種，準(zhǔn)核心期刊(B+)1291種，一般期刊(B)1903種，較差期刊(C)1280種。評價期刊總數(shù)達到6400種。《家畜生態(tài)學(xué)報》在2013～2014年畜牧、獸醫(yī)科學(xué)學(xué)術(shù)期刊中位列第16位。

EffectofProbioticsandIntegratedChineseHerbMedicineonEnvironmentalQualityinHenhouseandDiseaseResistanceofBroiler

SHI Yu-xiang1,2，ZE Long1,2，ZHANG Yong-ying1,2，XUAN Jia-jie1,2

(1.HebeiUniversityofEngineering,Hebei056001,China;2.HebeiEngineeringresearchcentreforpoultrydiseaseHandan,Hebei056001,China)

The present experiment studied the ecological control techniques used to improve the environmental quality in henhouse and disease resistance of the broilers.The ammonia concentration was detected according to HJ 534-2009 standard.The amount of pathogenic escherichia coli in the air and SIgA in the small intestine of broilers,pathogenic escherichia coli and Lactobacillus in the cecum of broilers were detected respectively with conventional method.The results of the test showed that after broilers were fed probiotics and integrated Chinese Herb Medicine,the ammonia of henhouse and pathogenic escherichia coli of broiler cecum decreased by 6.2 mg/m3and 1.62(mg/m3)respectively；thymus and fabricius immune index,SIgA and Lactobacillus in the cecum of broilers increased by 0.71、0.68、0.35 OD、1.45 log CFU/g respectively.Significant changes displayed in the above indexes (P<0.05),which suggested that probiotics and integrated Chinese Herb Medicine combined could improve the environmental quality in henhouse and the disease resistance of broilers; the serotype of separated pathogenic escherichia coli and the state of their pollution to the henhouse air were closely related to the amount and the kinds of the pathogenic escherichia coli in the cecum of broilers.

broiler; probiotics; integrated Chinese Herb Medicine; environment; disease resistance

2013-07-15，

2014-04-08

河北省人力資源和社會保障廳資助項目(2012-26)；河北省科技計劃項目(1227101069)

石玉祥(1972-)男，山東陽谷人，教授，碩士，主要從事中藥防治禽傳染病研究。E-mail:hbyxshi@126.com

S811.6

A

1005-5228(2014)03-0063-04