覃大保 米長(zhǎng)忠 楊 力 周 琴 羅選騏 米璽霖

(吉首大學(xué)醫(yī)學(xué)院，湖南 吉首 416000)

筒鞘蛇菰Balanophora involucrate Hook.f.是蛇菰科蛇菰屬草本寄生植物，筒鞘蛇菰別名雞心七，是湘西土家族傳統(tǒng)的“四大名藥”之一[1－5]。具有清熱解毒、涼血止血、益腎養(yǎng)陰的功效。主要用于治療腎虛腰痛、肺熱咳嗽、咯血、血崩、痔瘡腫痛等癥，民間多應(yīng)用于治療陽(yáng)痿病人[6]。

我國(guó)是把蛇菰入藥最早的一個(gè)國(guó)家，《本草綱目》有較詳細(xì)記載，稱蛇菰為“葛花菜”和“葛乳”。俗稱為“鹿仙草”。植物的形態(tài)在《中國(guó)植物志》等文獻(xiàn)中有詳細(xì)描述[2－6]。

2009～2011年我們?cè)谥鞒趾鲜】萍紡d項(xiàng)目中發(fā)現(xiàn)湘西產(chǎn)筒鞘蛇菰，對(duì)其生態(tài)環(huán)境及寄生植物、肝保護(hù)成分的提取及對(duì)酒精性肝病保護(hù)作用作了相關(guān)研究[3－10]。

對(duì)筒鞘蛇菰的壯陽(yáng)作用研究，是為了進(jìn)一步搞清楚壯陽(yáng)時(shí)間及機(jī)理，對(duì)于科學(xué)合理的臨床用藥，藥物標(biāo)準(zhǔn)制定具有深遠(yuǎn)的意義。國(guó)內(nèi)外學(xué)者在蛇菰的化學(xué)成分和藥理活性等方面做了一定的研究工作，為蛇菰資源的開(kāi)發(fā)利用和保護(hù)奠定了基礎(chǔ)[8－10]。該研究觀察筒鞘蛇菰對(duì)腎陽(yáng)虛作用的影響。

1 材料

1.1 藥物:筒鞘蛇菰 Balanophora involucrate Hook.f.是蛇菰科蛇菰屬草本寄生植物，采于湖南省永順縣。

1.2 動(dòng)物:湖南省長(zhǎng)沙市天勤生物有限公司購(gòu)買，機(jī)構(gòu)代碼:67359287－2，實(shí)驗(yàn)等級(jí):SPF級(jí)，動(dòng)物品種品系:大鼠，SD，動(dòng)物規(guī)格:體重180～220g，性別:雄性大鼠40只，雌性大鼠20只。

1.3 藥品與試劑:氫化可的松注射液(上海市現(xiàn)代哈森藥業(yè)有限公司生產(chǎn))，批號(hào):H41021930，男寶(長(zhǎng)春長(zhǎng)紅制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào):Z22023282)，雌二醇 、NO試劑盒(南京建成生物工程研究所生產(chǎn))。

1.4 實(shí)驗(yàn)分組:將雄性SD大鼠40只隨機(jī)分成5組，即正常大鼠生理鹽水組，陽(yáng)虛大鼠生理鹽水組，陽(yáng)虛大鼠蛇菰高劑量組，陽(yáng)虛大鼠蛇菰低劑量組，陽(yáng)虛大鼠男寶組，每組8只。

1.5 模型制備與給藥:除正常組外，其余待SD大鼠適應(yīng)環(huán)境后，背部皮下注射氫化可的松25mg/kg，連續(xù)7d，制造腎陽(yáng)虛模型。高劑量組按蛇菰0.65g/kg灌胃，低劑量組按蛇菰0.15g/kg灌胃，陽(yáng)性對(duì)照組按男寶0.65g/kg灌胃，正常對(duì)照組和腎虛模型組按生理鹽水0.65g/kg灌胃，每日給藥1次，連續(xù)21d。

1.6 結(jié)果用 記錄，利用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件，單因素方差分析，組間比較采用q比較，P ＜0.05。

2 方法與結(jié)果

2.1 騎跨實(shí)驗(yàn)[7]:在雄鼠末次給藥前2h，將每只雌鼠灌雌二醇，末次給藥后1h，每組隨機(jī)取2只，先將其中1只雄鼠放入鼠籠中5min，使其適應(yīng)環(huán)境，再將2只雌鼠放入其中，保持環(huán)境安靜，計(jì)時(shí)20min，按上述方法將剩余的雄鼠交配完，然后觀察下列指標(biāo):(1)捉捕次數(shù)(以雄鼠舔外生殖器為標(biāo)準(zhǔn));(2)20min交配次數(shù)(以雄鼠有騎跨動(dòng)作為標(biāo)準(zhǔn))。

由表1可知，在大鼠交配能力中，陽(yáng)性對(duì)照組交配能力最強(qiáng);空白組與模型組相比，交配能力增加，高劑量組與空白組相比，交配能力有所提高。

表1 蛇菰對(duì)雄性大鼠交配能力的影響(n=8，±s)

表1 蛇菰對(duì)雄性大鼠交配能力的影響(n=8，±s)

注:與模型組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;

0.65g/kg 25.21±4.11 0.67±0.35陽(yáng)虛大鼠生理鹽水組 0.65g/kg 23.01±5.09 4.01±0.82陽(yáng)虛大鼠蛇菰高劑量組 0.65g/kg 15.33±3.78* 2.67±0.92*陽(yáng)虛大鼠蛇菰低劑量組 0.13g/kg 8.00±0.01* 0.33±0.15*陽(yáng)虛大鼠男寶組 0.65g/kg 35.51±4.65＊＊ 7.50±2.52組別 劑量 捉捕次數(shù) 交配次數(shù)正常大鼠生理鹽水組＊＊

2.2 雄性附睪、精囊腺、前列腺稱重[7]:手術(shù)取下大鼠陰莖、睪丸、附睪、精囊腺、用電子秤稱重。蛇菰對(duì)大鼠陰莖、睪丸、附睪、精囊腺無(wú)明顯影響，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 大鼠陰莖、睪丸、附睪、精囊腺如下(n=8，±s)

表2 大鼠陰莖、睪丸、附睪、精囊腺如下(n=8，±s)

注:器官質(zhì)量與模型組間無(wú)顯著差別，P＞0.05

±0.18組別 劑量g/kg±0.23腎陽(yáng)虛大鼠生理鹽水組 0.65g/kg 0.23±0.03 3.43±0.39 0.71±0.10 1.061±0.05腎陽(yáng)虛大鼠蛇菰高劑量組 0.65g/kg 0.25±0.03 3.23±0.3 0.80±0.05 1.053±0.15腎陽(yáng)虛大鼠蛇菰低劑量組 0.13g/kg 0.24±0.01 3.14±0.26 0.75±0.07 1.08±0.05腎陽(yáng)虛大鼠男寶組 0.65g/kg 0.27±0.02 3.3±0.35 0.78±0.13 0.803陰莖質(zhì)量 睪丸質(zhì)量 附睪質(zhì)量 精囊腺質(zhì)量正常大鼠生理鹽水組 0.65g/kg 0.22±0.06 3.07±0.20 0.97±0.09 0.94

2.3 蛇菰對(duì)大鼠臟器系數(shù)的影響[7]:蛇菰對(duì)大鼠胸腺、脾、 腎系數(shù)無(wú)顯著影響，結(jié)果見(jiàn)表3

表3 蛇菰對(duì)大鼠胸腺、脾、腎系數(shù)的影響(n=8，±s)

表3 蛇菰對(duì)大鼠胸腺、脾、腎系數(shù)的影響(n=8，±s)

注:臟器系數(shù)各用藥組與模型組間無(wú)顯著差別，P＞0.05

胸腺系數(shù) 脾系數(shù) 右腎系數(shù) 左腎系數(shù)正常大鼠生理鹽水組 0.65 0.37±0.05 1.00±0.12 1.09±0.30 1.17±0.29組別 劑量g/kg腎陽(yáng)虛大鼠生理鹽水組 0.65 0.41±0.12 1.05±0.12 1.06±0.12 1.21±0.09腎陽(yáng)虛大鼠蛇菰高劑量組 0.65 0.29±0.03 1.08±0.26 1.14±0.17 1.02±0.13腎陽(yáng)虛大鼠蛇菰低劑量組 0.13 0.27±0.09 0.78±0.16 1.06±0.14 1.05±0.09腎陽(yáng)虛大鼠男寶組 0.65 0.28±0.11 0.73±0.12 1.20±0.23 0.99±0.12

2.4 一氧化氮指標(biāo)的檢測(cè):SD大鼠灌胃結(jié)束后，頸總動(dòng)脈插管取血5mL，再取其2mL血液于離心管中，于3000rpm離心15min，吸取上清液10μL作進(jìn)一步分析[9]。對(duì)大鼠的血液NO含量比較中，空白組NO的含量比模型組高，高、低劑量組、陽(yáng)性對(duì)照組與模型組相比，NO含量明顯增高，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 一氧化氮的含量(n=8，±s)

表4 一氧化氮的含量(n=8，±s)

注:與模型組比較，*P＜0.05，＊＊P＜0.01

組別 NO濃度(mmol/L)3255.3±82.02腎陽(yáng)虛大鼠生理鹽水組 1909.033±1.27腎陽(yáng)虛大鼠蛇菰高劑量組 3997.367±72.76*腎陽(yáng)虛大鼠蛇菰低劑量組 3724.550±136.26*腎陽(yáng)虛大鼠男寶組 3217.975±7.84*正常大鼠生理鹽水組

3 討論

3.1 本實(shí)驗(yàn)首先建立腎陽(yáng)虛模型，在這基礎(chǔ)上觀察蛇菰對(duì)雄性大鼠交配能力的影響:在大鼠交配能力中，陽(yáng)性對(duì)照組交配能力最強(qiáng);空白組與模型組相比，交配能力增加;高劑量組與對(duì)照組相比，交配能力有所提高。結(jié)果顯示，蛇菰能夠改善大鼠交配能力。

3.2 蛇菰不同劑量對(duì)大鼠陰莖、睪丸、附睪、精囊腺的質(zhì)量及胸腺、脾、腎系數(shù)無(wú)明顯影響。

3.3 腎陽(yáng)虛大鼠蛇菰高劑量組、低劑量組和腎陽(yáng)虛大鼠生理鹽水組及正常大鼠生理鹽水組比較，蛇菰對(duì)大鼠血液中NO的含量有明顯影響，使NO含量增高。

[1]楊得勝.土家族藥學(xué)[M].西寧:青海人民出版社，2009:186.

[2]侯寬昭.中國(guó)種子植物科屬詞典[M].北京:科學(xué)出版社，1984:621.

[3]米長(zhǎng)忠，吳仕筠，周衛(wèi)華，等.筒鞘蛇菰的生藥學(xué)鑒別研究[J].廣西中醫(yī)學(xué)報(bào)，2010，3:53－54.

[4]谷中村.湘西藥用植物概覽[M].青海人民出版社，2004:53.

[5]米長(zhǎng)忠，周衛(wèi)華，等.湘西產(chǎn)筒鞘蛇菰生態(tài)環(huán)境及寄生植物初探[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，11:38－39.

[6]羅延華.貴州少數(shù)民族藥物集[M].長(zhǎng)沙:貴州民族出版社，1997:246.

[7]李儀奎主編.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1991:278－283.

[8]張穎，泰麗媛，譚紹銀.筒鞘蛇菰的現(xiàn)代研究進(jìn)展[J].中國(guó)中醫(yī)藥咨訊，2010(2).243

[9]鄭輝，顏蘋蘋，蔡文秀，等.血清一氧化氮測(cè)定方法[J].福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1997，31(4)452－454

[10]周衛(wèi)華，石慧娟，楊梅松竹，等.筒鞘蛇菰對(duì)酒精性肝損傷大鼠保護(hù)作用的研究[J].中國(guó)老年學(xué)，2012，20:4438－4440