摘 要:堿法是一種提取木聚糖較為適用的方法,文章探討了氫氧化鈉濃度、提取溫度、提取時間、固液比、原料顆粒度等因素對甘蔗渣中木聚糖提取率的影響,實驗結果表明:當堿液濃度15~20%、提取時間90min、提取溫度80~90℃、顆粒度40~60目、固液比為3g/70mL時,木聚糖得率較高。
關鍵詞:木聚糖;堿法;提取
木聚糖是植物細胞中主要的半纖維素成分,占植物細胞干重的35%,是自然界中除纖維素之外含量最豐富的多糖。木聚糖能高選擇性地促進腸道內(nèi)雙歧桿菌的增殖,不易被人體消化酶系統(tǒng)所分解,強力吸附大腸桿菌、腸炎門氏菌等病原菌,減少機體內(nèi)的有毒發(fā)酵、代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生等獨特的生理作用,具備治療便秘、腹瀉等胃腸疾病,保護肝臟等療效[1~2]。
1 實驗部分
1.1 原料及儀器
原料為甘蔗渣(市售甘蔗榨汁后所得);氫氧化鈉,3,5-二硝基水楊酸(DNS),苯酚,濃鹽酸,95%乙醇,冰乙酸、濃硫酸,D-木糖,均為分析純。
儀器為電子恒溫水浴鍋,電熱鼓風干燥箱,高性能粉碎機,電子天平,紫外可見光分光光度儀及其他玻璃儀器。
1.2 實驗方法
1.2.1 紫外分光光度法測定木糖含量
(1) 標準D-木糖溶液的配置。準確稱取干燥后的分析純D-木糖0.2500g,加蒸餾水溶解,轉入250mL容量瓶稀釋并定容即得lg/L的D-木糖標準溶液。
(2) D-木糖檢測波長的確定。準確移取D-木糖標準溶液1.0mL至50mL容量瓶中,按基本試驗法,配成含量為0.020g/L的D-木糖溶液,在400~700nm范圍內(nèi)進行全波長掃描測其吸光度,實驗表明D-木糖的最佳波長為554nm。
(3) D-木糖標準曲線的繪制。用標準溶液、DNS溶液和蒸餾水準確配制得D-木糖濃度分別為1.0μg/mL、2.0μg/mL、3.0μg/mL、4.0μg/mL、5.0μg/mL和6.0μg/mL的系列溶液。按基本實驗法,在554 nm處測定上述各系列溶液的吸光度。結果表明:隨著D-木糖溶液質量濃度的增大,吸光度呈線性增大,做一元線性回歸分析,得D-木糖濃度一吸光度標準曲線方程為:A=0.0073C+0.0368,R2=0.9986。
(4) 甘蔗渣提取物中D-木糖含量的測定。準確吸取一定量的樣品溶液于50ml 容量瓶,加入1.5ml DNS 溶液和2ml 蒸餾水,于沸水浴中加熱5min,顯色后迅速冷卻,用蒸餾水稀釋定容。另取一50ml 容量瓶,加入1.5ml DNS 溶液,用蒸餾水稀釋定容作為空白溶液,用1cm比色皿,在554nm處,測定其吸光度并計算D-木糖的含量。
1.2.2 堿法提取甘蔗渣中木聚糖
稱取甘蔗渣5g(精確至0.001g)于三口燒瓶中,按規(guī)定的固液比加入NaOH溶液,加熱提取。提取完畢后,真空過濾,所得濾液用25%(體積比)鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5.0,再加入2倍體積的95%乙醇,靜置30min以使沉淀完全析出。真空過濾,將所得固體物干燥,準確稱取質量,依下式計算甘蔗渣木聚糖的得率。
木聚糖得率(%)=■×100%
其中:X-測得的待測樣品溶液中的D-木糖濃度,μg/mL;M-甘蔗渣質量,g。
2 結果與討論
2.1 氫氧化鈉濃度對木聚糖得率的影響
在恒定溫度75℃,提取時間1h的條件下,考察了氫氧化鈉濃度對木聚糖得率的影響,實驗結果見表1。從表中結果可以看出,低濃度氫氧化鈉溶液的透壁作用不強使得木聚糖得率不高,當濃度達到15%以上時,木聚糖得率明顯提高。但濃度太高容易造成糖類成分分解,木聚糖得率降低且提取物顏色變深。較為合適的氫氧化鈉水溶液濃度應維持在15%~20%。
表1 NaOH濃度對木聚糖得率的影響
2.2 提取時間對木聚糖得率的影響
在恒定溫度75℃,氫氧化鈉濃度為15%的條件下,考察了提取時間對木聚糖得率的影響,實驗結果見表2。從表2中數(shù)據(jù)可以看出,隨著提取時間的延長,木聚糖得率逐漸增加,至90min時達到最大。隨后木聚糖得率緩慢下降可能是由于原料顆粒內(nèi)外的木聚糖濃度趨于平衡,且時間過長而引起了少量糖分分解所致。因此,從提取效果和效率兩方面考慮,提取時間應控制在90min左右,不應超過2h。
表2 提取時間對木聚糖得率的影響
2.3 提取溫度對木聚糖得率的影響
在恒定氫氧化鈉濃度為15%,提取時間1h的條件下,考察了提取溫度對木聚糖得率的影響,實驗結果見表3,從表中數(shù)據(jù)可以看出,溫度影響提取溶劑在原料顆粒內(nèi)、外部之間的擴散速度,溫度越高,目標物質的傳質速度越快,在提取時間相同的情況下,目標物得率越高。當溫度超過80℃之后,目標物得率略有降低,可能是高溫引起了部分糖分分解所致。因此,堿液提取甘蔗渣中木聚糖的適宜溫度溫度為80~90℃為宜。
表3 提取溫度對木聚糖得率的影響
2.4 原料顆粒度對木聚糖得率的影響
在氫氧化鈉濃度為15%,提取溫度為75℃,提取時間為1h的條件下,考察了原料(甘蔗渣)粒度對木聚糖得率的影響,實驗結果見表4,從表中數(shù)據(jù)可以看出,甘蔗渣粒度為40~60目是較為合適的提取粒度。
表4 原料顆粒度對木聚糖得率的影響
2.5 固液比對木聚糖得率的影響
在氫氧化鈉濃度為15%、提取溫度為75℃、提取時間為1h的條件下,考察了固液比(甘蔗渣與溶劑用量)對木聚糖得率的影響,實驗結果見表5,從表中結果可以看出,提取溶劑較少時,原料顆粒外部溶液中目標物質的濃度提高得快,導致顆粒內(nèi)部目標物質向外擴散的推動力在很短的時間內(nèi)即變得小,因而當固液比在3:60以下時得率不高。當固液比超過3:70以后,得率隨溶劑用量的增加而逐漸增大,這是由于大量溶劑體系能在較長時間內(nèi)維持較大的傳質推動力所致。因此,對于甘蔗渣中木聚糖的提取,固液比應維持在3g/70mL以上。
表5 固液比對木聚糖得率的影響
3 結束語
堿液提取法用于甘蔗渣中木聚糖的提取是可行的。用氫氧化鈉水溶液提取甘蔗渣木聚糖較為適宜工藝參數(shù)為:氫氧化鈉濃度15~20%左右、提取溫度80~90℃左右、提取時間90min、顆粒度20~40目、固液比為3g/70mL。
參考文獻
[1]黃廣民,姚伯元,劉仁成.椰殼中木聚糖含量的測定[J].食品科學,2007,28(6):271~274.
[2]王文嶺,黃雪松.DNS法測定木糖含量時最佳測定波長的選擇[J].食品科學,2006,27(4):196~198.
作者簡介:周浩(1990.0-),男,湖北孝感人,大學本科四年級學生,專業(yè)方向為化學工程與工藝。