鐘茂團等

【摘要】目的建立散痰寧糖漿中鹽酸麻黃堿含量的高效液相色譜測定方法。方法樣品用超聲提取，過濾，取續(xù)濾液，采用高效液相色譜法直接測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈：0.1%磷酸溶液=9：87為流動相，流速為1.0ml/min，進樣量10μl，檢測波長為207nm。結果鹽酸麻黃堿的線性范圍為2.396-21.564μg/ml，平均加樣回收率為99.41%，RSD=0.59%（n=6）。結論此方法準確度較高，可用于測定散痰寧糖漿中鹽酸麻黃堿的含量，為散痰寧糖漿中鹽酸麻黃堿含量測定提供了一種切實可行的方法。

【關鍵詞】散痰寧糖漿；高效液相色譜法；鹽酸麻黃堿

散痰寧糖漿是《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第七冊收載的品種，處方為桔梗、遠志（制）、桑白皮、氯化銨、鹽酸麻黃堿、薄荷腦。[1]是臨床用于支氣管炎，咳嗽痰多等呼吸道疾病治療的常用藥品。但是標準中沒有對處方中的鹽酸麻黃堿進行含量測定，《中國藥典》2010年版一部對麻黃藥材用高效液相色譜法測定鹽酸麻黃堿的含量[2]，筆者參考該法測定散痰寧糖漿中鹽酸麻黃堿的含量，結果專屬性強、耐用性好、精密度高，認為此法可以測定散痰寧糖漿中鹽酸麻黃堿的含量。具體實驗方法如下：1儀器與試藥

SHIMADZU SPD-10AVP型高效液相色譜儀，UV762型雙光束紫外分光光度計，F(xiàn)A2004電子分析天平。乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑為分析純。2檢測波長

取鹽酸麻黃堿對照品的甲醇溶液，在200-600nm波長處進行掃描測定，最大吸收波長為207nm，所以選擇檢測波長為207nm。3測定條件

以乙腈–0.1%磷酸溶液（9：87）為流動相，色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流速為1.0ml/min，柱溫為23℃。4專屬性考察

取缺鹽酸麻黃堿的全處方量的陰性樣品，按上述的含量測定方法進行測定，陰性無干擾。5供試溶液的制備

5.1對照品溶液的制備精密稱取置五氧化二磷干燥器中減壓干燥12小時的鹽酸麻黃堿對照品9.9mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，再精密量取2ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml中含鹽酸麻黃堿7.92μg）。

5.2提取溶劑的考察精密量取樣品（批號100901）10ml（共三份），分置50ml量瓶中，加50%甲醇、甲醇、乙醇各40ml，超聲處理20分鐘，分別加50%甲醇、甲醇、乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液2ml，置25ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。按上述色譜條件進行測定，計算，結果以甲醇為提取溶劑，提取效率優(yōu)于50%甲醇、乙醇，因此選用甲醇為提取溶劑。

5.3提取方法的考察精密量取樣品（批號100901）10ml，置50ml量瓶中，加甲醇40ml，一份超聲處理（功率120W，頻率59KHZ）20分鐘；另一份置水浴中加熱回流20分鐘，放冷，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，精密量取續(xù)濾液2ml，置25ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。按上述色譜條件進行測定，計算，結果兩種方法提取含量測定結果幾無差異，因此以上選用方便簡單的超聲處理進行提取。

5.4提取時間的考察精密量取樣品（批號100901）10ml（共三份），分置50ml量瓶中，加入甲醇各40ml，分別超聲處理（功率120W，頻率59KHZ）20分鐘、30分鐘、40分鐘，放冷，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，再精密量取續(xù)濾液2ml，置25ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。按上述色譜條件進行測定，計算，結果幾種提取時間均能較完全提取，含量測定的結果幾無差異，因此提取時間選擇為20分鐘。

綜上所述，供試品溶液的制備方法為：精密量取樣品10ml，置50ml量瓶中，加入甲醇40ml，超聲處理（功率120W，頻率59KHZ）20分鐘，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，精密量取續(xù)濾液2ml，置25ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。6耐用性試驗

6.1穩(wěn)定性試驗精密量取樣品（批號100901）10ml，按以上擬定的供試液的制備方法制備，室溫下保存，取對照品溶液及供試品溶液分別于0小時、2小時、4小時、6小時、8小時、10小時，按以上擬定的含量測定方法，分別進樣10μl，并以含量計算其RSD值，結果為0.22，可見對照品溶液與供試品溶液在配制后10小時內測定，結果穩(wěn)定。

6.2不同比例的流動相實驗曾以乙腈-0.1%磷酸溶液（9：87）、乙腈-0.1%磷酸溶液（10∶90）、乙腈-0.1%磷酸溶液（15∶85）為流動相，流速：1.0ml/min，以SHIMADZUC18柱（5μm，4.6×250mm）為分析柱，柱溫22℃，進行試驗研究，均能達到滿意的分離，測定結果分別為0.504、0.508、0.509，RSD為0.39%。

6.3不同的色譜分析柱實驗曾用ZIVCHROMI柱（5μm，4.6×150mm）、SHIMADZU C18柱（5μm，4.6×250mm）與Kromsil C18柱（5μm，4.6×150mm）為分析柱，以乙腈-0.1%磷酸溶液（9：87）為流動相，測定結果分別為0.505、0.509、0.510，RSD為0.39%。

綜合以上試驗，該方法的耐用性較好。

流動相的比例略作變化，鹽酸麻黃堿與其他組分均能達到基線分離，系統(tǒng)適應性較好。分別用ZIVCHROMI、SHIMADZU和Kromsil三種品牌的十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，鹽酸麻黃堿與其他組分均能達到基線分離，系統(tǒng)適應性好。7含量測定方法學研究

7.1標準曲線與線性范圍精密稱取鹽酸麻黃堿對照品11.98mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取該溶液1ml、3ml、5ml、7ml、9ml，置50ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。每1ml含鹽酸麻黃堿分別為2.396ug、7.188ug、11.980ug、16.772ug、21.564ug，作為供試品溶液。分別精密吸取上述供試品溶液各10μl，按以上色譜條件進行分析，測定峰面積，結果鹽酸麻黃堿濃度在2.396-21.564μg/ml范圍內與峰面積呈很好的線性關系，回歸方程及相關系數：A=5075872C-7919，γ=0.9997（C為鹽酸麻黃堿濃度，單位μg/ml，A為峰面積）。

7.2重復性試驗按以上擬定的含量測定方法，取樣品（批號為100901）共6份，精密量取10ml，分別制備供試品溶液，按上述色譜條件測定，結果RSD=0.59%，表明重復性良好。

7.3精密度從同一瓶散痰寧糖漿樣品（批號100901）中，同時取樣5份，按以上擬定的方法，分別制備樣品供試液測定。結果各樣含量的RSD為0.75%，表明精密度較好。

7.4加樣回收率試驗分別精密量取批號為100901（已知含量為0.5102mg/ml）的樣品5ml，置6個100ml的量瓶中，再分別精密加入鹽酸麻黃堿對照品溶液（濃度為3.7568mg/ml）各1.0ml，按以上擬定的供試品溶液制備方法和色譜條件，制備加樣回收供試品溶液，并精密量取10μl，注入高效液相色譜儀中，測定含量，計算回收率，結果回收率在96.88%-101.89%之間，加樣回收良好。

注：限于版面，數據及圖表略。

參考文獻

[1]國家藥典委員會.散痰寧[Z].衛(wèi)生部藥品標準.中藥成方制劑[S].第7冊.第1版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2011.04.

[2]中藥質量標準.麻黃[Z].中國藥典[M].一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.