申蕓萍
(互助縣農(nóng)業(yè)示范園區(qū)管委會(huì),青海互助 810500)お
摘要
[目的]探討不同物質(zhì)對唐菖蒲繼代培養(yǎng)試管苗芽增殖的影響。[方法]在唐菖蒲試管苗芽增殖過程中,添加不同植物生長調(diào)節(jié)劑、碳源、活性炭,考察不同物質(zhì)對芽增殖影響。[結(jié)果]濃度0.5 mg/L奈乙酸與濃度1.0 mg/L的6-芐基腺嘌呤植物生長調(diào)節(jié)劑組合下,苗增殖效果好而且苗較壯,增殖倍數(shù)為5。0.2%的活性炭,在30 d內(nèi)有利于試管苗株高的增加,但對芽的誘導(dǎo)無明顯作用。[結(jié)論]用50 g/L市售白糖代替40 g/L純蔗糖作為培養(yǎng)基的碳源是可行的,這樣降低了配制培養(yǎng)基的成本,而且對試管苗的增殖和質(zhì)量無┯跋臁*
關(guān)鍵詞唐菖蒲(獹ladiolus gandavensis 玍an Houtte);繼代培養(yǎng);芽增殖
中圖分類號(hào) SB188文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A文章編號(hào) 0517-6611(2014)19-06172-02
お
Effects of Different Materials on Subculture Plantlet Bud Proliferation of 獹ladiolus gandavensis
SHEN Yun瞤ing
(Huzhu County Agricultural Demonstration Zone Administrative Committee, Huzhu, Qinghai 810500)
Abstract [Objective] To discuss effects of different materials on subculture plantlet bud proliferation of 獹ladiolus gandavensis. [Method] Adding different plant growth regulator, carbon source, active carbon in proliferation process of G. gandavensis tube seedlings, effects on bud proliferation were investigated. [Result] The proliferation effect is good andseedlings are strong under the plant growth regulators of 0.5 ﹎g/L NAA and 1.0 mg/L 6瞓enzyladenine, the proliferation times is 5. 0.2% active carbon is conductive for plant growth of tube seedlings, but it has no obvious effect on induction of bud. [Conclusion] 50 g/L sugar takes place of 40 g/L pure sucrose as carbon source of culture medium is feasible, which can reduce cost and have no effects on proliferation and quality of tube seedlings.
Key words獹ladiolus gandavensis; Subculture; Shoot proliferation
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作者簡介
申蕓萍(1976-),女,土族,青海海東人,農(nóng)藝師,從事農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣研究。
收稿日期 20140605
唐菖蒲(獹ladiolus gandavensis 玍an Houtte)原種產(chǎn)于南非?;ㄓ袉紊蛷?fù)色共5種,花冠呈漏斗形,是“世界四大切花”之一。試驗(yàn)通過對唐菖蒲繼代培養(yǎng)的研究,以利于唐菖蒲的進(jìn)一步擴(kuò)繁,獲得更多的種源。
1材料與方法
1.1 材料
供試材料為市售唐菖蒲“奧斯卡(Oscar)”的健壯植株莖尖。試驗(yàn)地點(diǎn)設(shè)在青海大學(xué)組培實(shí)驗(yàn)室。
1.2 方法
在無菌條件下,從健壯的唐菖蒲植株上,用鑷子取下莖尖進(jìn)行第一代試管苗的培養(yǎng)。然后將新長出的苗剪成1.5 cm長的切段,要求每個(gè)切段都已分化出一個(gè)芽。 然后將供試材料分別接種于基礎(chǔ)MS培養(yǎng)基和生長調(diào)節(jié)劑6睟A、KT、NAA培養(yǎng)基中,每10 d記錄試管苗增殖生長情況,培養(yǎng)室溫度為24 ℃,濕度為78%,光照(1400~1600)lx,10~12 h/s,碳源和水質(zhì)試驗(yàn)以市售白糖代替化學(xué)純蔗糖作為培養(yǎng)基的碳源。
2 結(jié)果與分析
2.1不同生長調(diào)節(jié)劑對試管苗增殖的影響
2.1.1
不加生長調(diào)節(jié)劑對試管苗增殖的影響。由表1可知,試管苗在添加生長素的培養(yǎng)基上芽分化倍數(shù)均高于不添加任何物質(zhì)的MS培養(yǎng)基,芽的長勢,個(gè)數(shù)和株高也高于不添加任何物質(zhì)的MS培養(yǎng)基上的。在基礎(chǔ)培養(yǎng)基上,芽的增殖倍數(shù)僅為1.5,芽數(shù)為45個(gè),苗高為5.3 cm。各項(xiàng)指標(biāo)都遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于添加了調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上所增加的值。
2.1.2
6-芐基腺嘌呤對試管苗增殖的影響。對添加生長調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上,不同生長調(diào)節(jié)劑的組合使用對芽增殖效果好于單一調(diào)節(jié)劑的使用。在添加一種生成素的情況下,添加6-芐基腺嘌呤的芽增殖數(shù)為2.4,苗高為6.4 cm,芽數(shù)為72個(gè),而添加激動(dòng)素的培養(yǎng)基芽增殖數(shù)為2.0,苗高為5.9 cm,芽數(shù)為60個(gè);從數(shù)據(jù)可以看出,添加6-芐基腺嘌呤的芽增殖效果好于添加激動(dòng)素的培養(yǎng)基。
2.1.3
不同生長調(diào)節(jié)劑組合對試管苗增殖的影響。生長調(diào)節(jié)劑組合使用的培養(yǎng)基上,不同的組合對芽增殖效果不同,NAA與6睟A的組合其增殖分別為5.4和5.1,苗高平均為9.0 cm,芽數(shù)平均為158個(gè);而NAA與KT組合的培養(yǎng)基上芽增殖數(shù)為4.1和4.5,苗高分別為8.1和7.9 cm,芽數(shù)平均為129個(gè);由此可以,知道NAA與6睟A的組合其效果均好于NAA與KT的組合效果。
相同的培養(yǎng)基組合中不同的濃度對芽的長勢也不同,NAA和6睟A的組合中,0.5 mg/L NAA 和1.0 mg/L BA組合下,苗較粗壯,株高也明顯高于0.5 mg/L NAA和0.5 mg/L BA組合下苗的長勢;NAA和KT的組合中,MS+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L KT組合下無論是苗高,芽數(shù)還是芽增殖數(shù)均優(yōu)于MS+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L KT組合。
通過試驗(yàn)說明,最適合唐菖蒲試管苗生長的生長素組合為0.5 mg/L奈乙酸與1.0 mg/L 6睟A。
2.2 不同碳源對試管苗增殖的影響
由表2可知,40 g/L市售白糖為碳源對切段進(jìn)行培養(yǎng),芽的分化數(shù)及增殖倍數(shù)都明顯低于40 g/L的蔗糖,分化苗較長勢弱。原因在于白糖不純,碳源濃度不夠,滿足不了芽增殖生長的需要。以60 g/L的白糖作為碳源,芽增殖的個(gè)數(shù),倍數(shù)及株高同樣存在顯著差異,原因在于給芽提供的碳源過多,反而抑制了芽的生長。但和40 g/L市售白糖相比,芽增殖倍數(shù)、個(gè)數(shù)、株高均有所增加;而以50 g/L的白糖作為碳源和40 g/L的蔗糖相比,芽增殖個(gè)數(shù)和倍數(shù)及株高均無顯著差異,苗也壯,芽勢也好,苗壯,可見唐菖蒲試管苗增殖培養(yǎng)基中,以50 g/L白糖作碳源是可行的。
表1 生長素對試管苗的影響
培養(yǎng)基組成 切段數(shù)じ 發(fā)芽な∥個(gè) 40天后增殖け妒∥倍 差異性ぃ0.5%) 苗高(CM)こな
MS∥mg/L 30 45 1.5A 5.3 最弱
MS+1.0∥mg/L KT30 60 2.0B 5.9 較弱
MS+0.5∥mg/L 30 72 2.4B 6.4 弱
6睟A
MS+NAA 0.5+ 30 162 5.4C 9.6 強(qiáng)
6睟A 1.0 mg/L
MS+NAA 0.5+ 30 153 5.1C 8.3 較強(qiáng)
6睟A 0.5 mg/L
MS+NAA 0.5+ 30 123 4.1D 7.9 中
KT 1.0 mg/L
MS+NAA 0.1+ 30 135 4.5C 8.1 中
KT 0.5 mg/L
注:試管苗長勢標(biāo)準(zhǔn):長勢好的植株直徑大于2 mm,正常綠色;長勢中為植株直徑在2.0~2.5 mm,淺綠色;長勢差的植株直徑1~2 mm,顏色發(fā)黃。
表2 不同碳源對試管苗增殖的影響
糖種類g/L 切段數(shù)じ 發(fā)芽數(shù)じ 苗高cm 40 d后增殖け妒∥倍 0.5%げ鉅煨
蔗糖40 25 127 7.5 5.1 A
白糖40 25 90 5.6 3.6 B
白糖50 25 130 7.4 5.2 A
白糖60 25 99 6.5 4.0 B
表4活性炭對芽的影響
0.2%せ钚蘊(yùn) 接種數(shù)じ 芽數(shù)じ 株高cm 增殖率け妒 差異顯著性ぃ0.1%)
有 20 30 11.0 1.5 A
無 20 100 9.7 5.0 B
注:培養(yǎng)基為0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L BA。
在培養(yǎng)基中加入0.2%活性炭和未加入活性炭相比較得知,當(dāng)加入活性炭或芽增殖倍數(shù)明顯降低(表4)在20 d時(shí)才有芽的少量分化,經(jīng)40 d的培養(yǎng),芽增殖倍數(shù)僅為1.5,株高在接種后30 d內(nèi)增加迅速,株高為11 cm,比未加活性炭的高出1.3 cm,主要表現(xiàn)在節(jié)間的增長上,并且長勢弱,苗細(xì)長,葉色發(fā)黃,在30 d后株高增加相對于前期下降,隨著時(shí)間的推移。加活性炭和不加活性炭的植株株高趨于相等。
從試驗(yàn)結(jié)果看活性炭對唐菖蒲試管苗芽的分化有抑制作用,是因?yàn)榛钚蕴繉ιL調(diào)節(jié)劑起來吸附作用,大量文獻(xiàn)表明活性炭可以抵消生長調(diào)節(jié)劑的作用,故苗長勢弱,分化強(qiáng)度非常小。在培養(yǎng)前唐菖蒲試管苗株高增加迅速,主要是活性炭吸附了瓊脂中的雜質(zhì)及蔗糖在高溫滅菌過程中降解產(chǎn)生的5-羥甲糠醛等的雜質(zhì),從而造成苗的徒長,后期由于上述作用減弱,徒長消除,所以株高與未加入活性炭的培養(yǎng)基上的株高趨于相等。試驗(yàn)說明0.2%的活性炭對芽增殖無作用。
3結(jié)論
唐菖蒲試管苗分化不僅時(shí)間長,而且量大,這是快繁的優(yōu)勢所在,但在繼代培養(yǎng)過程中弱勢化苗的出現(xiàn)也不容┖鍪?。?/p>
從市場效益分析,市售白糖可以替換化學(xué)蔗糖作培養(yǎng)基的碳源,替換的最佳組合為50 g白糖替換40 g蔗糖,這樣的話試管苗培育的成本降低90%以上,對唐菖蒲的快繁作用┖艽?。?/p>
試驗(yàn)中,對活性炭的作用只作初步的研究,其濃度為0.2%是從大量資料查得,至于濃度是否得當(dāng)有待于以后的試驗(yàn)研究。
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