王華

【摘要】目的：研究褚頭紅的化學(xué)成分。方法：用經(jīng)典的中草藥化學(xué)成分提取分離方法，借助系統(tǒng)預(yù)試驗(yàn)初步判斷楮頭紅所舍的化學(xué)成分，用苯酚-硫酸法測(cè)定其多糖總量，用原子吸收法測(cè)定部分營(yíng)養(yǎng)元素含量。結(jié)果：楮頭紅含還原多糖平均為75g/kg，含Mg、Zn、Mn、Cu分刺為205.446+6.00 mg/kg、50.279+2.25 mg/kg、319.294+12.00 mg/kg、10.867 +0.36mg/kg，含Ca、Fe、K分別為13.501+0.24 g/kg、1.268+0.56 g/kg和17.467 +0.36g/kg，此外還含有游離苷類物質(zhì)、黃酮類物質(zhì)、酚類、鞣質(zhì)等物質(zhì)。結(jié)論：楮頭紅所含的生物活性成分與臨床藥效基本一致。

【關(guān)鍵詞】楮頭紅；化學(xué)成分；多糖；營(yíng)養(yǎng)元素

【中圖分類號(hào)】R4 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1671-8801（2014）10-0009-02

治療乙型肝炎目前尚無(wú)特效藥，這是世界性問(wèn)題。臨床上主要以保肝護(hù)肝、涼血解毒或提高自身免疫力來(lái)提高對(duì)疾病的抵抗力，減少疾病造成的侵害。中草藥及其制劑對(duì)該病有獨(dú)特的療效，這可能與藥用植物多成分的協(xié)調(diào)和增效作用有關(guān)――如已有藥理研究表明植物多糖可調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，并在抗肝炎等方面有獨(dú)特的生物活性，還有誘生干擾素和抗病毒的功能 [1，2]；鞣質(zhì)有抗菌抗炎抗過(guò)敏、抗脂質(zhì)過(guò)氧化、抗腫瘤、抗人體免疫缺陷病毒（ HIV）等作用 [3]；黃酮類化合物生物活性廣泛而溫和，有保護(hù)肝臟和其他組織、器官和抗病毒、抗菌的作用，并有抑制癌細(xì)胞和細(xì)胞毒素等多種作用 [4]；皂苷有影響代謝、免疫和酶系統(tǒng)以及抗炎、抗菌、抗病毒、抗腫瘤等作用，大多數(shù)中藥的皂苷具有明顯的抗氧化作用[5，6.]；植物中多種有機(jī)態(tài)營(yíng)養(yǎng)微量元素 [7] 易于吸收，與人體免疫密切相關(guān)，對(duì)疾病恢復(fù)有輔助作用。楮頭紅（S.nepalensis），別名風(fēng)柜斗草 [8]?！吨兴幋筠o典》記載：其性涼，味酸，無(wú)毒；功用：清肺熱、去肝炎 [9]；《實(shí)用中草藥》記載：其性平，味甘。功用：涼熱解毒、涼血利水，主治急性肝炎，肺熱咳嗽 [10]。據(jù)有關(guān)臨床使用報(bào)道：楮頭紅對(duì)急性肝炎（甲肝、乙肝急性期）療效最佳，對(duì)慢性肝炎及乙肝病毒攜帶者有效。在福建省民間廣為使用，是一種極有價(jià)值的天然藥用植物和中草藥資源。對(duì)該植物的化學(xué)成分、藥理活性、藥效關(guān)系等的研究目前尚未見(jiàn)報(bào)道。為尋找活性物質(zhì)，了解楮頭紅臨床用藥機(jī)制的指導(dǎo)科學(xué)用藥，開展對(duì)楮頭紅化學(xué)成分的研究，對(duì)探討楮頭紅臨床用藥機(jī)制，指導(dǎo)科學(xué)地合理用藥具有重要意義，對(duì)進(jìn)一步深入開發(fā)應(yīng)用該天然藥用植物也具有指導(dǎo)意義。

1、儀器與材料

1.1 儀器 電子天平、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、恒溫水浴箱、恒溫磁力攪拌機(jī)、電熱套、DHC電熱恒溫干燥箱、電熱板、原子吸收分光光度計(jì)（TAS-990型）。

1.2 材料 楮頭紅、無(wú)水乙醇、95%乙醇、丙酮、正丁醇、三氯化鐵、α-萘酚、3，5-二硝基苯甲酸、硝酸銀、冰乙酸、活性炭、苯酚、葡萄糖等均為分析純。

2、方法

2.1 楮頭紅化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試

2.1.1 化學(xué)成分提取取50g楮頭紅干藥末，加石油醚回流提取（1.5h）3次，過(guò)濾，合并濾液濃縮后（下同）得石油醚提取部位105ml；濾渣加乙醚回流提取（1.5h）3次，過(guò)濾，合并濾液得乙醚提取部位110ml；所得濾渣繼續(xù)加乙酸乙酯提?。?.5h）3次，過(guò)濾，合并濾液乙酸乙酯提取部位116ml；所得濾渣再加乙醇回流提?。?1.5h）3次，過(guò)濾，合并濾液所得乙醇提取部位llOml；最后在濾渣中加蒸餾水回流提?。?.5h）3次，過(guò)濾，合并濾液得蒸餾水提取部位168ml。臨用時(shí)根據(jù)需要將各部位提取液稀釋或濃縮。

2.1.2 化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試各提取部位的化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試驗(yàn)采用化學(xué)特征反應(yīng)定性和紙層析定性試驗(yàn)[11-13]。

2.2 多糖提取與含量測(cè)定

2.2.1 多糖提取與初步精制 取2.1.1蒸餾水提取部位上清液用酶法去除淀粉，按18ug/g加液化酶到上清液中，在pH為6，85℃水浴條件下處理1.5 h，用I2/KI溶液檢驗(yàn)者到碘滾不變色，接著按200ug/g加糖化酶，pH調(diào)至6，水浴溫度60℃處理1h。去淀粉后，接著用sevag法除去蛋白質(zhì)，然后加3倍體積95%乙醇溶液，靜置1h后，沉淀抽濾，干燥即得精制多糖。

2.2.2 多糖含量測(cè)定[14] 用葡萄糖為對(duì)照品，用2.2.1所得精制多糖為供試樣品，含量測(cè)定采用硫酸-苯酚法。

2.3 元素測(cè)定

2.3.1 楮頭紅中鈣、鎂、鐵、錳、鋅、銅測(cè)定 [15]稱取烘干磨碎的楮頭紅樣品2.Og于瓷坩堝中，在電熱板上緩緩加熱炭化至不再冒煙，移入高溫電爐，逐漸升溫到500℃灰化2h。待冷卻后滴加硝酸（1：1）溶解灰分，蒸發(fā)至干后，置于高溫電爐中繼續(xù)灰化完全，用2ml HCL（l：l）溶解灰分，移入25 ml容量瓶中，加水定容。在火焰原子吸收分光光度計(jì)上采用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線法，分別于285.2nm、422.7 nm、248.3 nm、279.5 nm、213.8 nm、324.7 nm波長(zhǎng)處測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)液和樣液中Mg、Ca、Fe、Mn、Zn和Cu的吸收值，計(jì)算即得。

2.3.2 楮頭紅中鉀的含量測(cè)定取干燥的楮頭紅粉末l.Og于1mol/L鹽酸溶液中浸提，吸取浸提的待測(cè)液5.OOml于25ml容量瓶中，用水定容。在火焰原子吸收介光光度計(jì)上采用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線法[16]，于766.80 nm處相同條件測(cè)定，計(jì)算即得。

3、結(jié)果與分析

3.1 楮頭紅化學(xué)成分 化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試和紙層析法試驗(yàn)結(jié)果如表1，2。楮頭紅中主要活性化學(xué)成分有多糖、游離苷類物質(zhì)，黃酮類物質(zhì)，皂苷、有機(jī)酸、酚類、鞣質(zhì)等物質(zhì)。

3.2 多糖含量 經(jīng)多次提取測(cè)定，楮頭紅中多糖的平均含量為75.Og/kg。

3.3 元素測(cè)定各元素測(cè)定結(jié)果如表3所示。

4、討論

試驗(yàn)表明，楮頭紅中含有游離苷類物質(zhì)、黃酮類物質(zhì)、酚類、鞣質(zhì)類等物質(zhì)，含量較高的多糖和較豐富的人體所必需的營(yíng)養(yǎng)元素，這些成分有的可調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能；有的可誘生干擾素和抗病毒作用；有的可抗菌抗炎；有的可抗脂質(zhì)過(guò)氧化、抗腫瘤、抗人體免疫缺陷病毒（HIV）；而有的可抑制癌細(xì)胞和細(xì)胞毒素、保護(hù)肝臟等多種作用，這與楮頭紅的臨床藥效基本一致。但是要掌握楮頭紅的臨床用藥機(jī)制以及藥效與各類物質(zhì)結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系，有待于進(jìn)一步對(duì)楮頭紅的各化學(xué)成分進(jìn)行分離、分子結(jié)構(gòu)鑒定和臨床藥理試驗(yàn)等研究。

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