劉宗東　史玲杰　胡彬

【摘 要】目的：了解萊州市感染性腹瀉病原譜的構(gòu)成及在不同時(shí)間、人群中的分布狀況，為制定綜合防治措施提供依據(jù)。方法：采集2013年萊州市腹瀉患者標(biāo)本，檢測病原菌。結(jié)果：檢測295份腹瀉患者標(biāo)本，檢出病原菌90株，檢出率為30.51%，病原譜包括沙門氏菌30株（30.33%）、副溶血性弧菌19株（21.11%）、銅綠假單胞菌12株（13.33%）、致瀉大腸桿菌11株（12.22%）、河弧菌6株（6.67%）、氣單胞菌5株（5.56%）、志賀氏菌4株（4.44%）、擬態(tài)弧菌、類志賀鄰單胞、創(chuàng)傷弧菌各1株（1.11%），未檢出霍亂弧菌和耶氏菌。不同人群中男性為31.71%（52/164），女性為29.01%（38/131），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2 =0.25，P>0.05）；年齡組31～40歲為44.86%（13/29），41～50歲為42.42%（14/33），不同年齡組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（（χ2 =10.32，P<0.05）），10.8、9月檢出率依次為50.00%（16/32）、39.39%（26/66）、35.85%（19/53），不同月份差異顯著（χ2=18.39，P<0.05），結(jié)論：萊州市感染性腹瀉病原菌種類繁多。但主要以沙門氏菌和副溶血性弧菌為主，腹瀉多發(fā)生在夏秋季節(jié)，應(yīng)繼續(xù)加強(qiáng)檢測工作。

【關(guān)鍵詞】感染性腹瀉；病原菌；病原譜

【中圖分類號(hào)】R472 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1004-7484（2014）02-0906-02

萊州市疾病預(yù)防控制中心自2010年起承擔(dān)山東省腹瀉癥候群檢測工作，每年5～10月份對(duì)哨點(diǎn)醫(yī)院腸道門診腹瀉病例采集糞便樣本，進(jìn)行病原菌分離鑒定。為了解萊州市感染性腹瀉病原譜的構(gòu)成，今后防控病原菌引起腹瀉病提供依據(jù)，我們對(duì) 2013年萊州市腹瀉患者病原菌檢測結(jié)果進(jìn)行分析。

1 材料與方法

1.1 材料 標(biāo)本來自2003年萊州市16個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)醫(yī)院腸道門診，選擇每日排便3次或以上、且大便性狀有改變（呈稀便、水樣便、粘膿便或膿血便等）的門診病例。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集與處理 用5支無菌棉拭多點(diǎn)采集糞便標(biāo)本，插入50ml旋蓋密封離心管的C-B運(yùn)輸培養(yǎng)基中（購自杭州天和微生物試劑有限公司），12h內(nèi)送萊州市疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行沙門氏菌、志賀氏菌、致瀉大腸桿菌、銅綠假單胞菌、耶氏菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌、河弧菌、氣單胞菌、擬態(tài)弧菌、類志賀鄰單胞、創(chuàng)傷弧菌等病原菌檢測。在裝有標(biāo)本的培養(yǎng)基中，將棉簽分別放入堿性蛋白胨水（APW）、mEC、SBG、改良PBS增菌液，同時(shí)直接接種麥康凱（Mac）和XLD平板。

1.2.2 分離培養(yǎng) 于增菌液中，選擇生長最茂盛的培養(yǎng)基表面或菌膜下表層，取2～3滴加入霍亂01、0139膠體金試紙中，同時(shí)取一接種環(huán)APW增菌液分別劃線接種硫代硫酸鹽檸檬酸鈉膽鹽蔗糖瓊脂（TCBS）、慶大瓊脂、科瑪嘉弧菌顯色培養(yǎng)基和康凱瓊脂（Mac）（北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公司產(chǎn)品），自mEC增菌液接種0157顯色培養(yǎng)基，SBG增菌液接種沙門氏顯色培養(yǎng)基，改良PBS4℃增菌后接種耶氏菌選擇培養(yǎng)基和MAC平板。自從慶大瓊脂上選擇5～10個(gè)可疑菌落做霍亂弧菌血清凝集實(shí)驗(yàn)；從TCBS瓊脂、科瑪嘉弧菌顯色培養(yǎng)基上選擇5～10個(gè)單菌落，做其他弧菌鑒定實(shí)驗(yàn)；從Mac、XLD平板上選擇單菌落做氣單胞菌和類志賀鄰單胞菌、大腸桿菌的鑒定實(shí)驗(yàn)。

1.2.3 生化檢測 自培養(yǎng)基平板上挑取可疑菌落接種（KIA/MIU）進(jìn)行生化初篩、粘絲實(shí)驗(yàn)和氧化酶實(shí)驗(yàn)陽性者初步鑒定為弧菌，保存于半固體中進(jìn)一步集中篩選【1】，菌株經(jīng)VITEK 2 COMPACT（法國BioMérieux公司）生化系統(tǒng)鑒定。

1.2.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)采用E xcel2003軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 病原譜特點(diǎn) 2013年5～10月共檢測295份腹瀉患者標(biāo)本，檢出病原菌90株，檢出率為30.51%，其中沙門氏菌30株（30.33%）、副溶血性弧菌19株（21.11%）、銅綠假單胞菌12株（13.33%）致瀉大腸桿菌11株（12.22%）、河弧菌6株（6.67%）、氣單胞菌5株（5.56%）、志賀氏菌4株（4.44%）、擬態(tài)弧菌、類志賀鄰單胞、創(chuàng)傷弧菌各1株（1.11%），未檢出霍亂弧菌和耶氏菌。

2.2 不同月份病原菌檢出情況 病原菌檢出率， 5月為13.04%（3/23），6月為20.37%（11/54），7月為22.39%（15/67），8月為39.39%（26/66），9月為35.85%（19/53），10月為50.00%（16/32），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=18.39，P<0.05），見表1。

2.3 不同人群病原菌檢出情況 病原菌檢出率，男性為31.71%（52/164），女性為29.01%（38/131），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2 =0.25，P>0.05）；2天～10歲為28.33%（17/60），11～20歲為18.75%（6/32），21～30歲為18.60%（8/43），31～40歲為44.86%（13/29），41～50歲為42.42%（14/33），51～86歲為32.65%（32/98），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2 =10.32，P<0.05），見表2。

3 討論

萊州市感染性腹瀉患者以中青年為主，病原譜的種類繁多，及時(shí)準(zhǔn)確檢測引起腹瀉的病原菌，減少患者病痛和制定防治措施有著十分重要意義[2]，本次檢測總陽性率為30.51%，不同于青銅峽市[3]（15.22%），表明感染性腹瀉病原譜有著本地地域特點(diǎn)。檢出的90株細(xì)菌，以沙門氏菌檢出率最高位30.33%，沙門氏菌引腹瀉或食物中毒的來源是動(dòng)物性食品，特別是肉類，也可以是家禽、蛋類、奶類食品，以6月和10月檢出較高，12.96%、43.75%，這與夏秋季氣溫高、濕度大，細(xì)菌繁殖能力強(qiáng)，食物容易受到細(xì)菌污染有關(guān)，溫度濕潤的環(huán)境有利于沙門氏菌生長和傳播[4]，另外夏秋季節(jié)蚊蠅孳生繁多，導(dǎo)致食物受污染的機(jī)會(huì)增多，增加了人群感染沙門氏菌的機(jī)會(huì)。因此，沙門氏菌感染患者的增加，提示在日常生活中應(yīng)加強(qiáng)鹽腌漬制品和熟食冷葷類管理，注意蔬菜水果蛋類食品衛(wèi)生，做好對(duì)食品的加工、儲(chǔ)存、運(yùn)輸?shù)雀鱾€(gè)環(huán)節(jié)監(jiān)督。在年齡分布上，31-40歲、51-85歲年齡組檢出率較高，與何戰(zhàn)英[5]等人研究大致相同。

副溶血弧菌為革蘭氏陰性嗜鹽性海洋細(xì)菌，于1950年從日本一次暴發(fā)性食物中毒中分離發(fā)現(xiàn)[6]。該菌常存在于近海岸的海水、海底沉積物、海產(chǎn)品及鹽漬食品中，主要引起食物中毒和急性腹瀉，是我國沿海地區(qū)食物中毒中最常見的致病菌[7] ，萊州市西鄰渤海萊州灣，人群中不同性別檢出率無差異，主要原因是該市市民歷來有喜食水產(chǎn)品的習(xí)慣，副溶血弧菌感染的機(jī)會(huì)大致均等。帶菌水產(chǎn)品是誘發(fā)副溶血弧菌的原因食品[8]，因此，市民在食用時(shí)應(yīng)煮熟、煮透，如果水產(chǎn)品生食或加工不當(dāng)，易造成疾病的發(fā)生，故除加強(qiáng)監(jiān)測外，對(duì)市民依據(jù)據(jù)病原菌特點(diǎn)采取有針對(duì)性的健康教育和相關(guān)知識(shí)宣傳培訓(xùn)，增加市民食品安全意識(shí)，徹底煮熟以動(dòng)物和水產(chǎn)品為源的食物，特別是禽類、肉類、蛋類和海產(chǎn)品類食物，以減少病原菌引起的食源性疾病的發(fā)生，保障居民的身體健康具有重要意義。

參考文獻(xiàn)：

[1] 周偉艷，徐景野，章丹陽，等.應(yīng)用篩檢方法快速檢測小海產(chǎn)品中副溶血性弧菌[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2011，21（3）：639-641.

[2] 楊元娟，楊元梅，劉紹英. 128例小兒急性腹瀉糞便病原菌的培養(yǎng)分析 [J]. 重慶醫(yī)學(xué)， 2000，29（4）：342-343.

[3] 李廣琴，夏艷榮，劉錦平等。青銅峽市2011年腹瀉癥候群病原菌監(jiān)測結(jié)果分析[J]。寧夏醫(yī)學(xué)雜志，2012，34（7）：672-673

[4] 朱錦德，張曉航，田楨干，等。上海口岸飲食和公共場所從業(yè)人員沙門氏菌調(diào)查分析[J]。中國病原生物學(xué)雜志，2008，3（001）：80

[5] 何戰(zhàn)英，劉桂榮，曲梅，等。2008年夏季北京市沙門氏菌腹瀉監(jiān)測結(jié)果分析[J]。疾病監(jiān)測，2009（005）：352-353

[6] 周正任. 醫(yī)學(xué)微生物學(xué) [M]. 第6版. 北京：人民衛(wèi)生出版社， 2006.

[7] 方偉，楊杏芬，柯昌文. 副溶血性弧菌分型研究進(jìn)展 [J]. 中華疾病控制雜志， 2008，12（5）：468-472.

[8] 李映霞，吳琪，黃芳，等.廣州市海珠區(qū)水產(chǎn)品副溶血性弧菌污染狀況調(diào)查分析[J]。中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2012，21（5）：1175-1176.

基金項(xiàng)目：課題編號(hào)：2012ZX10004-201-002.國家科技重大專項(xiàng)課題，

子課題：癥候群細(xì)菌學(xué)研究