摘要[目的] 考察微粉化技術(shù)對中藥材金銀花的顯微特征以及溶出度的影響。[方法]顯微鏡下觀察金銀花普通細(xì)粉與超微細(xì)粉的顯微特征區(qū)別，并以綠原酸含量為指標(biāo)，采用紫外分光光度法測定金銀花超微細(xì)粉與普通細(xì)粉的溶出度。[結(jié)果]2種金銀花粉末顯微鏡下觀察有明顯差異；綠原酸含量超微細(xì)粉（10 μm）>普通細(xì)粉（80目篩）。[結(jié)論]微粉化技術(shù)對金銀花粉末顯微特征和溶出度影響明顯。

關(guān)鍵詞微粉化技術(shù)；金銀花；超微細(xì)粉；普通粉；顯微特征；含量測定

中圖分類號S567文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號0517-6611（2014）23-07736-02

基金項(xiàng)目山西省科技廳資助項(xiàng)目（20110321081-02）。

作者簡介張璐（1978- ），男，山西陽泉人，工程師，碩士，從事中藥提取、中藥制劑研究。

收稿日期20140709金銀花（Flos lonicerae）為忍冬科植物忍冬、紅腺忍冬、山銀花或毛花柱忍冬的干燥花蕾或帶初開的花。金銀花具有抗菌和增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的作用，味甘、性寒、清熱解毒、涼散風(fēng)熱[1]，其醫(yī)療作用十分廣泛?，F(xiàn)代研究表明，綠原酸和異綠原酸作為金銀花的主要成分有多種藥理活性，具有顯著的清熱解毒、抗菌消炎和延緩衰老作用，對消化道的癌癥有明顯的抑制作用，還具有生育作用及對免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用[2]。因此綠原酸含量的高低是目前金銀花品質(zhì)優(yōu)劣的主要指標(biāo)。

微粉化技術(shù)是近年興起并應(yīng)用于中藥領(lǐng)域的一項(xiàng)新技術(shù)。中藥材經(jīng)過超微粉碎后，粒度均勻細(xì)密，并可使細(xì)胞壁破碎，增加了藥材的比表面積，理論上有利于藥物有效成分的溶出，增加藥材有效成分的提取率[3]。但每味中藥微粉化后是否都能達(dá)到上述效果，有待進(jìn)一步研究。該試驗(yàn)以金銀花綠原酸含量為指標(biāo)，探求超微粉碎是否有利于中藥材金銀花有效成分的溶出。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)藥材與試劑金銀花藥材購于山西省雙鶴藥業(yè)有限公司，經(jīng)普通粉碎過80目篩為普通粉，超微粉碎于江蘇華強(qiáng)納米科技有限公司；綠原酸對照品：中國藥品生物制品檢定所，批號110753200413；甲醇（分析純）：北京市化工試劑廠，批號20060233；無水乙醇（分析純）：北京市化工試劑廠，批號20030520；水合氯醛（分析純）；稀甘油（化學(xué)純）。

1.2試驗(yàn)儀器離心機(jī)：802（上海分析儀器器械廠）；超聲波提取器：KQ250B（江蘇省昆山市超聲儀器廠）；電熱恒溫水浴鍋：HH4（常州市國華電器有限公司）；電子天平：JA1203（上海天平儀器廠）；高速萬能粉碎機(jī)（北京市科華永興儀器有限公司）；紫外可見分光光度計(jì)：UV757CRT（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；生物光學(xué)顯微鏡：CHD212E（日本奧林巴斯株式會社）；OLMYPUS倒置熒光顯微鏡：IX7型（日本奧林巴斯株式會社）。

1.3試驗(yàn)方法

1.3.12種不同粉末顯微比較觀察。

1.3.1.1超微細(xì)粉與普通細(xì)粉顯微裝片。分別取超微細(xì)粉與普通細(xì)粉少量置于載玻片上，加適量水合氯醛，于酒精燈上微熱進(jìn)行透化，稀甘油固定后，蓋上蓋玻片，得到顯微裝片。

1.3.1.2顯微裝片的顯微鏡觀察[4]。 將制得的金銀花超微細(xì)粉與普通細(xì)粉裝片于顯微鏡下觀察，普通細(xì)粉觀察目鏡10X、物鏡40X， 超微細(xì)粉觀察目鏡10X、物鏡40X，比較2種粉末顯微特征的區(qū)別，并進(jìn)行照相。

1.3.2含量測定[5]。

1.3.2.1對照品的制備。精密稱取五氧化二磷真空干燥24 h的綠原酸對照品2.0 mg溶于2 ml甲醇，用移液管吸取0.5 ml，置于10 ml棕色容量瓶中，加50%甲醇至刻度，制成50 μg/ml的對照品溶液。

1.3.2.2樣品溶液的制備。取金銀花細(xì)粉及超微粉粉末樣品各0.5 g，精密稱定，置具塞三角瓶中，加入50%甲醇50 ml，稱定重量，超聲30 min，擦干外壁水分，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5 ml于25 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，制成樣品溶液。

1.3.2.3測定波長的選擇。吸取對照品溶液1.0 ml置于10 ml容量瓶中，加甲醇稀釋值刻度，紫外掃描顯示327 nm處有最大吸收，每隔1 h復(fù)測，結(jié)果10 h內(nèi)無變化。

1.3.2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。分別吸取對照品0.5、0.8、1.0、1.5、1.8、2.0 ml置于10 ml容量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，制成濃度分別為2.5、4.0、5.0、7.5、9.0、10.0 μg/ml的溶液，在327 nm波長處測其吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.3.2.5樣品含量測定。將超微細(xì)粉樣品與普通細(xì)粉樣品溶液分別稀釋10倍，超微細(xì)粉標(biāo)為1號樣品，普通細(xì)粉標(biāo)為2號樣品，分別在327 nm波長處測定其吸光度。

2結(jié)果與分析

2.1超微細(xì)粉與普通細(xì)粉顯微觀察結(jié)果與分析從 OLMYPUS IX7型倒置熒光顯微鏡拍攝的圖片（a）可以看出，金銀花細(xì)粉中的花粉粒多見完整細(xì)胞，而超細(xì)粉中的花粉粒多見破壁細(xì)胞；從金銀花細(xì)粉和超細(xì)微粉非腺毛（b）可以看出，金銀花細(xì)粉中非腺毛多見細(xì)長完整細(xì)胞，而超細(xì)粉中的非腺毛多為破碎細(xì)胞。

2.2樣品含量測定通過“1.3.2.4”方法，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，注：a1、b1為細(xì)粉；a2、b2為超細(xì)微粉。

金銀花細(xì)粉超細(xì)微粉花粉粒（a）、非腺毛（b）發(fā)現(xiàn)金銀花超微細(xì)粉與普通細(xì)粉在2.5～10.0 μg/ml內(nèi)呈線性，其線性回歸方程為：A=0.086 4C+0.005 3（R=0.994）。利用紫外分光光度法分別測定了金銀花普通細(xì)粉（80目）、超微細(xì)粉粉末綠原酸的含量，結(jié)果表明，經(jīng)過超聲提取后，金銀花的有效成分綠原酸含量超微細(xì)粉比普通細(xì)粉（80目）提高14.4%（）。

金銀花超微細(xì)粉與普通細(xì)粉在327 nm波長處的吸光度

測定次數(shù)1號樣品（超微細(xì)粉）2號樣品（普通細(xì)粉）A（第一次）0.3890.358A（第二次）0.3880.362A（第三次）0.3890.363A（平均值）0.3890.361

3結(jié)論與討論

顯微特征比較和含量測定表明，金銀花連翹經(jīng)過超微粉碎后，細(xì)胞破壁明顯，大部分細(xì)胞已沒有完整結(jié)構(gòu)，藥物的有效成分不需要經(jīng)過細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的交換過程而被溶提出來，中藥有效成分的釋放量大幅度提高，超微粉碎非常有利于中藥材金銀花有效成分的溶出，且可大大簡化提取工藝過程，有利于降低生產(chǎn)成本。

參考文獻(xiàn)

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[2] 任兵，陸蘊(yùn)如.我國藥用金銀花資源，化學(xué)成分及藥理研究進(jìn)展[J].中國藥學(xué)雜志，1999，34（11）：724-727.

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