鐘宇富等

摘要：目的：建立月乃湯中肉桂的鑒別和桂皮醛含量測定方法。方法：進行月乃湯的定性鑒別；采用HPLC法對月乃湯中桂皮醛進行含量測定，色譜條件：Welch Ultimate C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）分離；乙腈-水（35：75）為流動相；流速為1.0 mL/min；檢測波長為290 nm。結(jié)果：月乃湯樣品溶液的薄層色譜中，在與肉桂對照藥材溶液色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色斑點。桂皮醛質(zhì)量濃度在3.52～35.2μg/mL范圍內(nèi)，線形關(guān)系良好，r=0.9998，平均回收率為100.7%，RSD為2.81%。結(jié)論：薄層鑒別試驗發(fā)現(xiàn)月乃湯中有肉桂和桂皮醛；通過HPLC法測定月乃湯中桂皮醛含量為11.68±2.92μg/mL；本法操作簡便，準確度高，重現(xiàn)性好，適用于月乃湯中桂皮醛的含量測定。

關(guān)鍵詞：月乃湯 定性鑒別 桂皮醛 含量測定 HPLC

中圖分類號：R151 文獻標識碼：A 文章編號：1672-5336（2014）06-0029-02

月乃湯是廣禾堂經(jīng)多年從事女性產(chǎn)后調(diào)理實踐開發(fā)出的產(chǎn)品，是用來烹煮月子飲食的湯頭。該湯由米之精華液（米酒水提取物）、香櫞、肉桂、干姜、小薊、白芷、甘草組成，能充分結(jié)合食材中的營養(yǎng)成分對產(chǎn)后女性進行滋補調(diào)養(yǎng)。

肉桂具有補火助陽，引火歸元，散寒止痛，溫通經(jīng)脈之功[1]。肉桂的主要成分為桂皮醛、肉桂酸、醋酸苯丙酯、肉桂醇等，桂皮醛具有抗菌、消炎、鎮(zhèn)靜、止痛的功效[2]。本文采用薄層色譜法，進行月乃湯中肉桂的鑒別；以乙腈-水為溶劑，建立桂皮醛含量測定的高效液相色譜法，操作簡便，準確，穩(wěn)定。

1 儀器與試藥

ZF-20D暗箱式紫外分析儀（上海寶山顧村電光儀器廠）；Dionex Ultimate 3000型高效液相色譜儀（泵ISO-3100SD，助溫箱TCC-3000SD，檢測器VWD-3100，自動進樣器WPS-3000SL，色譜工作站Chromeleon Chromatography Data System），Welch Ultimate C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5μm），Sartorius BS110S萬分之一天平（北京賽多利斯天平有限公司）。

肉桂對照藥材（中國食品藥品檢定研究院，批號120983-201203）；桂皮醛標準品（中國食品藥品檢定研究院，批號110710-201217）；乙腈（重慶迪馬，色譜純）；水為娃哈哈純凈水；月乃湯（批號：20121012、20121114、20121220，廣禾堂草本生物科技（上海）有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 薄層色譜法鑒別[1]

2.1.1 肉桂對照藥材溶液

取肉桂對照藥材粉末0.5g，加乙醇10mL，冷浸20分鐘，時時振搖，濾過，即為對照藥材溶液。

2.1.2 桂皮醛標準品溶液

取桂皮醛標準品，加乙醇制成每1mL含1μl的溶液，作為標準品溶液。

2.1.3 樣品溶液

取月乃湯批號20121012、20121114、20121220各20mL，70℃減壓濃縮，稠浸膏加乙醇溶解，微孔濾膜濾過，乙醇定容成10mL。

照薄層色譜法（附錄Ⅵ B）試驗，吸取對照藥材及樣品溶液2～5μl、標準品溶液2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）- 乙酸乙酯（17：3）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%二硝基苯肼乙醇試液。在樣品溶液色譜中，與對照藥材溶液相應(yīng)的位置上，顯相同的淡紅色斑點；與標準品溶液相應(yīng)的位置上，顯相同的淡紅色斑點。

2.2 含量測定

2.2.1 標準品溶液的制備

取桂皮醛標準品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含35.2μg的溶液，即得。

2.2.2 樣品溶液的制備

取月乃湯100mL，70℃減壓濃縮，稠浸膏加甲醇定容成50mL，0.45μm微孔濾膜濾過，即得。

2.2.3 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗

色譜柱：Welch UltimateC18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈-水（35：75）；流速：1.0mL/min；檢測波長：290nm。分別精密吸取標準品、樣品溶液各10μL注入液相色譜儀，理論塔板數(shù)以桂皮醛計不低于3000；桂皮醛的拖尾因子為0.97，保留時間約為16min，與其他組分峰的分離度大于1.5。見圖1。

2.2.4 線性關(guān)系的考察

精密吸取桂皮醛標準品溶液1、2、3、4、5、7.5 mL，分別置于10mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，得系列標準品溶液。精密吸取上述各標準品溶液20μL，分別進樣2次，測定峰面積。以桂皮醛標準品濃度（μg/mL）為橫坐標，峰面積（Y）為縱坐標進行回歸分析，得回歸方程Y=1.6136X+0.1746，r=0.9998。結(jié)果表明桂皮醛質(zhì)量濃度在3.52～35.2μg/mL范圍內(nèi)，濃度與峰面積線性關(guān)系良好。

2.2.5 精密度試驗

精密吸取質(zhì)量濃度為17.6μg/mL的桂皮醛標準品溶液20μL，按“2.2.3”項下色譜條件連續(xù)進樣8次，記錄峰面積并計算。結(jié)果桂皮醛峰面積RSD為0.86%，表明儀器精密度良好。

2.2.6 重復(fù)性試驗

取同一批號（批號20121114）月乃湯5份，按“2.2.2”項下方法制備樣品溶液，按“2.2.3”項下色譜條件進樣測定。結(jié)果桂皮醛平均質(zhì)量含量為11.37μg/mL，RSD值為4.92%。

2.2.7 穩(wěn)定性試驗

精密吸取標準品溶液20μL，分別于0、1、2、4、8 h進樣，測定峰面積。結(jié)果桂皮醛峰面積RSD為1.21%，表明樣品溶液在8h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.2.8 加樣回收率試驗

取20121114批次月乃湯100mL，加入一定量的桂皮醛標準品，70℃減壓濃縮，稠浸膏加甲醇定容成50 mL，0.45μm微孔濾膜濾過，按“2.3”項下色譜條件進行測定，計算回收率（%）。結(jié)果見表1。

3 討論與結(jié)論

肉桂作為傳統(tǒng)的中藥材，含有豐富的活性成分，對消化系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)疾病具有良好的療效，具有鎮(zhèn)痛、抗菌和抗腫瘤等作用，為《中華人民共和國藥典》收載品種。同時，肉桂在食品和日用化工產(chǎn)品方面用途較為廣泛[3]。

本文通過高效液相色譜方法測定月乃湯中桂皮醛的含量，對流動相的組成，流速等條件進行了比較，確定以乙腈-水（35：75）為流動相，流速1.0mL/min為色譜條件時，桂皮醛的分離效果好，分離度大于1.5。桂皮醛檢測波長選擇有不同的文獻報道[4-6]，本文用乙腈-水（35：75）作為溶劑，采用分光光度法進行全波長掃描，測得在290nm處有最大吸收。

該方法操作簡單，線性關(guān)系好、精密度高、重復(fù)性好，可以作為月乃湯的質(zhì)量控制。

參考文獻

[1]國家藥典委員會.中國藥典[S].一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：127.

[2]冼寒梅，黃海濱，陳燕軍.肉桂泡汁和煎液中桂皮醛含量的氣相色譜分析[J].廣西植物，1996，16（2）：188～190.

[3]陳家源，牙啟康，盧文杰，譚曉，黃云峰，賴茂祥.中藥肉桂的研究概況[J].廣西醫(yī)學(xué)，2009.31（6）：872～874.

[4]宋利輝，張蓉，萬紅菊，熊世平..HPLC法測定桂枝茯苓片中桂皮醛的含量[J].湖北中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2010，12（2）：39～41.

[5]鐘鏡金，楊仙芳.HPLC法測定桂附地黃丸中桂皮醛的含量[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2008，26（2）：415～416.

[6]劉彩霞，陳婧，朱曉薇，趙靜，高媛媛.不同形態(tài)桂枝飲片中桂皮醛和桂皮酸含量的考察[J].中藥材，2006.29（10）：1031～1032.