于靜淼，孫勁旅，尹　佳，李　摯，刁　穎

(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)院變態(tài)反應(yīng)科，北京 100730)

ChinJAllergyClinImmunol，2014，8(3)：188- 194

隨著居住條件的改善，全球范圍內(nèi)過敏性疾病的發(fā)病率均有所增加。一項(xiàng)基于自我報(bào)告的兒童過敏性疾病流行性調(diào)查表明，北京、重慶和廣州三市兒童哮喘發(fā)病率分別為3.15%、7.45%和2.09%，兒童過敏性鼻炎發(fā)病率分別為14.46%、20.42%和7.83%，濕疹發(fā)病率分別為20.64%、10.02%和7.22%[1]。2000至2007年，臺(tái)灣地區(qū)8歲兒童特應(yīng)性皮炎、過敏性鼻炎、哮喘的發(fā)病率分別為6.7%、26.3%和11.9%[2]。2009年，美國(guó)哮喘現(xiàn)患病率達(dá)8.2%[3]。2010年報(bào)道顯示，過敏性鼻炎以5%～22%的患病率成為美國(guó)最常見慢性疾病名單中的第5位[4]，濕疹在兒童中的患病率在2010年達(dá)10.7%[5]。

機(jī)體對(duì)室內(nèi)塵螨的免疫反應(yīng)可引起哮喘、過敏性鼻炎、特應(yīng)性皮炎和蕁麻疹。隨著越來越多患者對(duì)室內(nèi)塵螨過敏，監(jiān)測(cè)室內(nèi)過敏原的作用愈發(fā)突出，它可以促進(jìn)住戶改善室內(nèi)衛(wèi)生條件，從而改善患病狀況[6]。我國(guó)遼闊的幅員體現(xiàn)在各地區(qū)不同的氣候特點(diǎn)，從大陸性氣候到海洋性氣候差異性極大，室內(nèi)螨種類和過敏原含量也因此存在很大差異。我國(guó)對(duì)于室內(nèi)優(yōu)勢(shì)螨種類研究大多集中于南方，尤其是長(zhǎng)江流域的少數(shù)區(qū)域[7-10]，北方鮮有報(bào)道。然而，這些研究往往年代早，也缺乏對(duì)螨種的系統(tǒng)性分析。本研究對(duì)北京地區(qū)塵螨過敏患者家庭螨類的種類和比例進(jìn)行調(diào)查，以期為當(dāng)?shù)貕m螨防治提供理論依據(jù)。

材料和方法

研究對(duì)象

就診于北京協(xié)和醫(yī)院變態(tài)反應(yīng)科的塵螨過敏患者38例。塵螨過敏診斷：戶塵螨過敏原皮膚點(diǎn)刺試驗(yàn)(丹麥ALK公司)陽性，且血清特異性IgE抗體(瑞典Phadia公司)(d1和d2)≥2級(jí)。研究獲得北京協(xié)和醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，調(diào)查前獲得患者知情同意。

材料收集

收集場(chǎng)所：枕頭、被子、床單、床墊、床褥、沙發(fā)及地毯等螨存活及孳生處。收集范圍為1 m2，收集時(shí)間為3 min。若表面積不足1 m2，如枕頭、沙發(fā)和地毯，收集范圍為物品整個(gè)表面，收集時(shí)間相應(yīng)縮短至2 min。

收集時(shí)間：2008年12月至2010年1月。

收集裝置：最高輸出功率為200W的真空吸塵器1臺(tái)、塵土收集裝置(丹麥ALK公司)1個(gè)。

收集方法：記錄收集裝置編號(hào)和濾板各項(xiàng)數(shù)據(jù)，測(cè)量并記錄材料收集時(shí)的室內(nèi)溫度和相對(duì)濕度，記錄研究對(duì)象家庭居住狀況、近期住屋吸塵器清潔史、床具使用年份等信息。完成收集后，樣本轉(zhuǎn)運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室，部分立即分離制備，其他樣本存儲(chǔ)于-20℃擇期處理。

螨樣本分離制備與存儲(chǔ)

裝置和試劑：立體顯微鏡(Nikon SMZ 1500，東京，日本)，光學(xué)顯微鏡(Leica DM 2500)，70%酒精溶液，飽和鹽水，定量濾紙，墨汁，針，霍氏液，鉗，載玻片干燥箱。

方法：采用浮選法從塵土樣本中純化收集出螨體，并貯存于70%濃度酒精中。臨時(shí)涂片觀察的螨體選用霍氏液制備。

螨標(biāo)本鑒定

制備好的螨體涂片直接置于顯微鏡下觀察，依照2009年Krantz和Walter分類法對(duì)鏡下形態(tài)進(jìn)行種屬分類。絲泊塵螨鏡下判定由美國(guó)萊特州立大學(xué)生物系A(chǔ)rlian教授、古巴國(guó)家生物預(yù)防中心Labrada教授和西班牙馬德里自治大學(xué)的Fernndez-Caldas博士復(fù)核。

數(shù)據(jù)分析

每份樣本浮選法收集螨并進(jìn)行全部涂片鏡下鑒定，判斷所有涂片絕對(duì)數(shù)，計(jì)算所有含螨樣本數(shù)量，計(jì)算陽性率。陽性率=陽性樣本數(shù)量總樣本數(shù)量×100%?？偨Y(jié)各種螨數(shù)量并計(jì)算各種螨占總螨數(shù)的百分比，判斷優(yōu)勢(shì)螨種類。統(tǒng)計(jì)每份樣本中總螨數(shù)量(包括活螨、死螨、螨殘?bào)w)，計(jì)算螨密度。螨密度(數(shù)量克塵土)=每份樣本螨總數(shù)量該樣本重量(克塵土)。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

結(jié)　　果

材料收集情況

納入調(diào)查的北京地區(qū)38戶家庭共收集樣本345份，其中130份來自10戶家庭2次不同時(shí)間點(diǎn)收集，215份來自28戶家庭單次收集。所有345份樣本中，平房采集樣本56份，樓房采集樣本289份；其中223份(64.6%)可檢出螨，平房陽性樣本51份，陽性率為91.1%；樓房陽性樣本172份，陽性率為59.5%。

共發(fā)現(xiàn)螨4757只，制備玻片1144張。其中分析3992只螨，剩余螨僅有殘?bào)w難以識(shí)別分類。所得到的4757只螨中，僅65份樣本(18.8%)中發(fā)現(xiàn)326只活螨，螨形態(tài)完整1034只(21.7%)。

家庭螨構(gòu)成

所有納入分析的3992只螨中，屬于蜱螨亞綱3目12科15屬22種；另外57個(gè)個(gè)體屬于昆蟲綱嚙蟲目1科1屬2種。3992只螨中，蜱螨科(92.7%)比例最高，其次為粉螨科(2.53%)；其他無氣門股3.56%，甲螨亞目0.52%，前氣門亞目0.40%，中氣門目0.29%。其中，包括9種致敏螨，分別為粉塵螨(Dermatophagoidesfarinae)、屋塵螨(Dermatophagoidespteronyssinus)、絲泊塵螨(Dermatophagoidessiboney)、微角塵螨(Dermatophagoidesmicroceras)、腐食酪螨(Tyrophagusputrescentiae)、橢圓食粉螨(Aleuroglyphusovatus)、納氏皺皮螨(SuidasianesbittiHughes)、拱殖嗜渣螨(Chortoglyphidaearcuatus)和害嗜鱗螨(Lepidoglyphusdestructor)(表1)。

分析3857只螨發(fā)育階段組成，若螨1854只(48%)，成螨1613只(42%)，幼螨390只(10%)。所有調(diào)查家庭中，30戶中含有≥2種螨，8戶發(fā)現(xiàn)1種螨。優(yōu)勢(shì)螨種因家庭不同而有所差異，27戶家庭為粉塵螨(71%)，5戶家庭為屋塵螨(13%)。多數(shù)家庭優(yōu)勢(shì)螨種數(shù)量達(dá)總螨數(shù)量70%以上。

螨檢出率

最高檢出率場(chǎng)所為地毯(78%)，其次為床墊(69%)和床周圍地板(44%)。枕頭、床墊、床褥三者螨檢出陽性率無顯著性差異(P>0.05)。含有最豐富螨種程度的是床墊(16種)，其次是床褥(11種)，被子、床周地板發(fā)現(xiàn)螨種均為4種。

螨密度

所有調(diào)查樣本中，螨密度>100只螨/g塵土71份(21%)，其中27份樣本螨密度>500只螨/g塵土(8%)。最高螨密度場(chǎng)所為枕頭(平均282只螨/g塵土)，其次為床褥(平均120只螨/g塵土)和沙發(fā)(平均115只螨/g塵土)。

最高螨密度樣本采自于枕頭，達(dá)到近8000只螨/g塵土。床褥、沙發(fā)、被子、床墊、床單的樣本中，均螨密度>500只螨/g塵土的樣本。地板塵土螨密度高于地毯，但是螨蟲在居室內(nèi)更傾向孳生于床上和沙發(fā)中(表2)。

家庭螨季節(jié)流行特點(diǎn)

一年之中北京地區(qū)平均螨密度有3個(gè)高峰，分別為5至7月、9至10月、12月至次年1月。其中，9至10月平均螨密度最高，1月和5月其次，3月和和11月最低(圖1)。1年中活螨密度以9至10月為高峰(10月為巔峰)，隨后逐漸減少，于次年3月達(dá)到低谷，低谷時(shí)采集樣本甚至找不到活螨(圖2)。1年中室內(nèi)螨蟲種類數(shù)量高峰期為春、秋季，巔峰期為10月，10采集樣本可出現(xiàn)12種螨；其次為5、9月，此時(shí)樣本有10種螨；螨種數(shù)量最少在11月，只有3種螨。

表1　屋塵中螨類及昆蟲組成(成體)

*分母為38個(gè)家庭；#分母為342份樣本；Δ分母為1798個(gè)標(biāo)本個(gè)體；1蛛形綱蜱螨亞綱疥螨目羽螨總科；2蛛形綱蜱螨亞綱疥螨目粉螨總科；3蛛形綱蜱螨亞綱疥螨目食甜螨總科；4蛛形綱蜱螨亞綱疥螨目薄口螨總科；5蛛形綱蜱螨亞綱疥螨目原卷甲螨總科；6蛛形綱蜱螨亞綱絨螨目肉食螨總科肉食螨總科；7蛛形綱蜱螨亞綱絨螨目葉螨總科；8蛛形綱蜱螨亞綱絨螨目跗線螨總科；9蛛形綱蜱螨亞綱中氣門目植綏螨總科；10蛛形綱蜱螨亞綱中氣門目皮刺螨總科；11中氣門目未鑒定的標(biāo)本；12昆蟲綱嚙蟲目，昆蟲綱標(biāo)本個(gè)體數(shù)(%)為57(3.2)；13昆蟲綱嚙蟲目未鑒定的標(biāo)本；—：未計(jì)算

討　　論

絲泊塵螨

本次調(diào)查中，于國(guó)內(nèi)首次報(bào)道了絲泊塵螨這一致敏螨種，該致敏螨種已被廣泛報(bào)道于熱帶雨林地區(qū)的熱帶螨種，出現(xiàn)于包括古巴、波多黎哥在內(nèi)的加勒比地區(qū)[11-12]。本次報(bào)道亦為亞洲溫帶地區(qū)對(duì)絲泊塵螨的首次報(bào)道。最主要原因可能是絲泊塵螨在塵螨中命名較晚，被在此之前國(guó)家和地區(qū)已進(jìn)行的系統(tǒng)性螨調(diào)查忽視。另外，由于絲泊塵螨在形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)上與粉塵螨、屋塵螨相似，使其鑒別難度較大[13]，這也可能造成其被之前研究者忽視。同時(shí)，在全球化發(fā)展趨勢(shì)下，北京與各國(guó)之間的密切交流也可能促進(jìn)了絲泊塵螨的遷徙、傳播。

表2　不同生活環(huán)境螨密度

Table 2　Mite density in different habitat　(只螨g塵土)

表2　不同生活環(huán)境螨密度

標(biāo)本來源最高值平均值蕎麥枕頭90001293棉∕化纖枕頭800003179混合枕頭377006797被子12941712床單5600325第一層褥子7650423下層褥子125001747海綿墊5222640床墊333001197沙發(fā)147141147地毯1160398床周圍地面1000128

圖1家庭螨類的季節(jié)消長(zhǎng)與氣溫、相對(duì)濕度和降水量的關(guān)系

Fig1Seasonal prevalence of domestic mites in relation with temperature， relative humidity and precipitation

圖2活螨與若螨季節(jié)消長(zhǎng)

Fig2Seasonal prevalence of live mites and nymph mite

1996年Ferrándiz等[14]在古巴進(jìn)行的螨過敏研究報(bào)道了許多含有絲泊塵螨的樣本，而這些樣本中并未發(fā)現(xiàn)粉塵螨。而本次研究收集的多數(shù)含粉塵螨的塵土樣本都發(fā)現(xiàn)了絲泊塵螨，這可能是塵螨在不同玻片角度下鑒別比較困難。因此，建議今后對(duì)塵螨屬的棲息狀況和共生性開展進(jìn)一步研究。

螨構(gòu)成

本研究發(fā)現(xiàn)，螨密度因居住環(huán)境條件不同而異，這些環(huán)境因素包括房屋結(jié)構(gòu)、通風(fēng)狀況、濕度及衛(wèi)生情況。通常在一間居室內(nèi)，床上的螨密度最高，多數(shù)螨生活在枕頭、床褥、沙發(fā)中。這是由于人們?cè)谒X時(shí)皮膚與枕頭和床上用品密切接觸，脫落皮屑和散發(fā)濕氣為螨蟲提供了良好的生活環(huán)境。而又因?yàn)樯嘲l(fā)和床褥不常打理，為螨蟲繁殖提供了一個(gè)較為恒定的環(huán)境。此外，我國(guó)家庭臥室通風(fēng)狀況常常不佳，人們晨起后臥室內(nèi)的潮濕狀況往往會(huì)維持一段時(shí)間，這也為螨蟲定居和繁殖提供了有利條件。

在發(fā)達(dá)國(guó)家，地毯是塵螨的主要定居場(chǎng)所，因此醫(yī)生常建議過敏患者撤換掉地毯以改善過敏癥狀[15]。而在本調(diào)查中，盡管地毯地面螨密度高于非地毯地面，但仍低于床和沙發(fā)。本次納入的38個(gè)家庭中，僅5個(gè)家庭有地毯且面積均較小，說明不同地區(qū)、不同生活條件下，螨的主要定居場(chǎng)所也不盡相同。然而，地毯仍是藏螨的重要場(chǎng)所，且由于難于打理，建議過敏患者家中盡量不要使用地毯。

北京地區(qū)塵螨季節(jié)流行性

既往研究顯示，世界不同地區(qū)具有不同的螨季節(jié)流行性，英國(guó)倫敦、日本東京、澳大利亞布里斯班春季螨密度最高，美國(guó)弗吉尼亞州、我國(guó)上海市夏季螨密度最高，瑞士巴塞爾在秋季螨密度最高，夏威夷地區(qū)火奴魯魯則是冬季螨密度最高[2，7-10，13，15-16]。我國(guó)各地的螨季節(jié)流行性也不盡相同，上海市夏季(5至7月)螨密度最高，南昌春季(4至6月)螨密度最高，臺(tái)灣地區(qū)秋季(10至11月)螨密度最高；與之相對(duì)，上海和南昌冬季(1至2月)螨密度最低，臺(tái)灣地區(qū)夏季(7月)螨密度最低。不僅如此，Arlian等[17]曾報(bào)道，同一區(qū)域、不同年份螨密度的季節(jié)流行性也不盡相同。因此，不同的螨密度季節(jié)流行性并不能被簡(jiǎn)單地解釋為地區(qū)溫度、相對(duì)濕度和降水量的不同，而是可能在很大程度上受到室內(nèi)微環(huán)境的影響。另外，由于既往調(diào)查并未采用統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行研究，這可能造成地區(qū)間差異比較的難度增加。

本調(diào)查顯示，2008年12月至2010年1月期間，北京地區(qū)秋季螨密度最高(9至10月)，其次為冬季(12月至次年1月)和夏季(5至7月)，春季(3月)和秋冬之交(11月)螨密度最低。這種季節(jié)模式特點(diǎn)與一年中北京室外溫度變化趨勢(shì)并不一致，而是更多的受到北京地區(qū)生活習(xí)慣的影響。生物研究表明，螨的理想生存溫度為20 ℃～25 ℃，濕度為70%～75%；其最低耐受溫度為12 ℃，最高耐受溫度為27 ℃[18]。雖然北京冬季室外溫度很低，但是11月15日至次年3月15日集中供暖，家庭溫度常在16 ℃以上，且通風(fēng)減少，因此室內(nèi)溫度和濕度都有利于螨蟲孳生。這也許能夠解釋為何冬季(12月至次年1月)是螨密度的高峰期。另外，人們?cè)诙緯r(shí)掉落皮屑增多，也為螨提供了更加豐富的食物源。夏季天氣潮熱、濕度較大，并不適合螨生長(zhǎng)，而十分適宜霉菌繁殖，霉菌污染食物易結(jié)塊，亦不能成為螨的最佳食物，因此螨生長(zhǎng)受到限制，直至秋季才有所改善，這就解釋了為何秋季而非夏季成為螨密度和螨種數(shù)量的雙高峰。另外，本研究還發(fā)現(xiàn)，北京地區(qū)螨密度、活螨密度和螨種類數(shù)量均在9～10月較高，提示它們之間存在相互關(guān)聯(lián)。

葉世泰教授總結(jié)出的塵螨過敏患者病情轉(zhuǎn)歸特點(diǎn)為：(1)癥狀在夏季加重；(2)癥狀在冬季加重；(3)癥狀在分別在夏季、冬季兩度加重；(4)癥狀呈無季節(jié)波動(dòng)的持續(xù)狀況[19]。本研究表明，北京地區(qū)家庭中螨密度存在夏季、冬季兩個(gè)高峰，且1年中所有月份都能從室內(nèi)找出螨，這為塵螨過敏患者病情轉(zhuǎn)歸特點(diǎn)提供了依據(jù)。至于為何秋季居室內(nèi)螨密度最高但卻不是患者癥狀最重的季節(jié)，筆者認(rèn)為可能與通風(fēng)情況有關(guān)，夏、冬季由于空調(diào)和采暖設(shè)備的使用限制了室內(nèi)通風(fēng)，使室內(nèi)空氣中螨濃度增加；而秋季時(shí)經(jīng)常開窗、開門通風(fēng)，減少了空氣中的螨濃度，避免了螨過敏癥狀的加重。

綜上所述，本研究首次發(fā)現(xiàn)并報(bào)道了北京地區(qū)存在的絲泊塵螨，亦屬于亞洲首次報(bào)道。北京地區(qū)室內(nèi)優(yōu)勢(shì)螨種為粉塵螨，其次為屋塵螨和絲泊塵螨。

致謝：美國(guó)萊特州立大學(xué)生物系Larry G Arlian，古巴國(guó)家生物預(yù)防中心Alexis Labrada，美國(guó)北德克薩斯大學(xué)健康科學(xué)中心Bobby Quentin Lanier，西班牙馬德里自治大學(xué)的Enrique Fernndez-Caldas，丹麥國(guó)立大學(xué)醫(yī)院過敏科Holger Fausb?ll Mosbech，丹麥ALK公司北京辦事處

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