楊 雙，鄧志敏，柳愛華

(深圳市寶安區(qū)人民醫(yī)院，深圳518101)

稽留流產即過期流產，屬于特殊的自然流產形式，是指胎兒或胚胎已經死亡，但仍在孕婦宮腔內滯留，未及時自然排出的現象［1］。本研究分析稽留流產患者的超聲表現與其絨毛染色體異常的關系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取深圳市寶安區(qū)人民醫(yī)院于2012年1月～2013年3月收治的早期稽留流產患者356例，年齡22～41(32.4±5.2)歲;流產時懷孕時間42～86(71.6±7.9)d;懷孕期間305例有陰道出血(85.71%)，出血時間為 1 ～26(4.6±1.7)d;114例有下腹疼痛(32.02%)。

1.2 方法

1.2.1 B超檢查 所有患者于懷孕6周時進行B超檢查。若經B超檢查未發(fā)現胎心，則在1周后進行復查;若已見胎心，且胚胎大小和停經周數相符，則2周后進行復查，直至10～12周。對超聲檢查中孕婦孕囊大小、胚芽長度、胚芽有無、卵黃囊有無及是否有胎心等進行記錄。在超聲檢查中，曾有胎心搏動者為有胎心，記為甲組，共216例;超聲檢查無胎心搏動為無胎心，記為乙組，共140例。甲組懷孕時間(65.4±7.3)d，乙組(55.7±6.7)d，P ＜0.05;甲組停經時間(41.72±0.37)d，乙組(41.72±0.37)d，P ＞0.05。兩組體外受精(IVF)者占比、35歲以上人群及有復發(fā)流產史例數、年齡等一般資料比較差異無統計學意義(P＞0.05)。

1.2.2 絨毛細胞培養(yǎng)與染色體核型分析 確定孕婦宮內胚胎停止發(fā)育后，告知患者，待患者簽署同意書后行清宮術，在手術過程中，無菌吸管吸取絨毛，利用無菌生理鹽水進行漂洗，送檢。在顯微鏡下，選取10～20 mg優(yōu)質絨毛組織，將之剪切成糊狀，放入1 mL酶解液，37℃水浴箱中靜置15 min;11 000 r/min離心5 min，清洗后以此速度再次離心5 min;棄上清液，將4 mL培養(yǎng)液加入其中并進行均勻吹打，接種在25cm2培養(yǎng)瓶中，5%CO2、37℃溫箱中培養(yǎng)5～7 d。利用倒置顯微鏡進行觀察，在發(fā)現克隆時換液并繼續(xù)培養(yǎng)，在克隆數目達到標準后繼續(xù)培養(yǎng)8～10 h。根據常規(guī)羊水細胞收獲方式對絨毛染色體加以處理，利用固定液進行固定，離心并滴片，制為G顯帶染色體。在進行染色體核型分析時，對每份標本進行計數時，分30個分裂相，對3個核型進行分析，有嵌合體出現時計分裂相100個。對染色體分析結果進行拍照保存。

1.2.3 統計學方法 采用SPSS16.0統計軟件。計數資料比較采用χ2檢驗。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

356 例稽留流產患者均順利完成絨毛染色體檢測，甲組染色體核型檢測結果正常83例、異常133例，其中結構異常11例、數目異?；颊?22例;在核型數目異?；颊咧校?8例為三體異常結構。乙組染色體核型檢測結果正常57例、異常83例，其中結構異常8例、數目異?；颊?5例;在核型數目異常患者中，46例為三體異常結構。甲組異常染色體發(fā)生率為62.41%(133/216)，乙組為59.29%(83/140)，P ＞0.05

3 討論

稽留流產發(fā)病原因較為復雜，可能與內分泌異常［2］、生殖器解剖異常、免疫［3］或遺傳等多方面因素有關。在早期自然流產中，稽留流產占比高達50%，且這一數值近年來呈不斷增高趨勢。根據文獻報道，在早期自然流產中，胚胎發(fā)育異常是最常見原因，在所有致使早期自然流產原因中占比高達50%～60%［4］。當孕婦有過大精神壓力，在遺傳基因上存在缺陷，或者母體有不良習慣，受環(huán)境因素影響時，很可能會導致稽留流產現象?；袅鳟a不僅會給患者及其家庭造成極大痛苦，同時也會給患者身體造成嚴重創(chuàng)傷。自1961年Penrose等報道自然流產胚胎具有三倍體異常以來，隨著人類細胞遺傳學技術的提高，人們不斷加深了對流產胚胎染色體異常的認識［5］。目前臨床上更傾向于對多次自然流產的患者才行絨毛染色體分析。

在受精卵發(fā)育中會形成絨毛組織這一胚胎重要附屬物。與胚胎細胞類似，絨毛細胞具有生物遺傳性。同時，絨毛滋養(yǎng)層細胞分裂能力旺盛，在體外培養(yǎng)下可為研究細胞周期功能等提供所需細胞，因此在產前診斷中應用十分廣泛［6］。在胚胎遺傳因素所致缺陷中，稽留流產胚胎染色體異常是常見病因，有50%以上稽留流產是因染色體異常引起。在本次研究中，356例稽留流產患者經體外培養(yǎng)絨毛組織并對絨毛染色體核型進行分析，異常核型檢出與文獻報道一致。同時，在絨毛染色體核型分析中，染色體異常核型主要包括結構異常與數目異常，其中結構異常數目異常及三體異常占比均與文獻一致。由此可知，三體是染色體數目異常中最常見現象，這是因為在減數分裂過程中，生殖細胞染色體不發(fā)生分離。在患者年齡不斷增大的情況下，染色體三體發(fā)生幾率會逐漸增高。臨床實踐證明，在患者胚胎停育時，有不同超聲表現，主要為小胚胎、空孕囊、大卵黃、小孕囊等，一些超聲表現和特定染色體有關。在本次研究中，分別對超聲下有胎心或無胎心患者染色體異常情況進行對比，兩組染色體異常發(fā)生率間差異無統計學意義［7］。

綜上所述，染色體異常是誘導稽留流產的主要原因，對胚胎染色體異常情況進行研究，可為分析稽留流產形成原因及下次正常懷孕提供重要指導。

［1］Bell KA，Van Deerlin PG，Feinberg RF，et al.Diagnosis of aneuploidy in archival，paraffin-embedded pregnancy-loss tissues by comparativegenomic hybridization［J］.Fetil Steril，2001，75(2):374-379.

［2］Carp H，Toder V，Aviram A.Karyotype of the abortus in reourrent mis-carriag［J］.Fertil Steril，2001，75(4):678-682.

［3］劉桂瑩.2種方法治療稽留流產的臨床觀察［J］.醫(yī)學信息，2013，26(2):229-229.

［4］馮艷萍，劉芳.IGF-Ⅱ在稽留流產患者絨毛組織中的表達［J］.河北醫(yī)藥，2013，35(5):732-733.

［5］肖青，秦爽，符芳，等.134例首次稽留流產患者的胎兒絨毛染色體分析［J］.中華臨床醫(yī)師雜志(電子版)，2012，6(3):205-206.

［6］雷瓊，王瓊，周燦權.不同分子遺傳學方法用于自然流產絨毛細胞遺傳分析的效果［J］.中華婦產科雜志，2009，44(4):253-256.

［7］田麗，王玉新，張石嶺.絨毛染色體異常在胚胎停育中的細胞遺傳學分析［J］.河北醫(yī)藥，2010，32(6):741-742.