陳 曦，李曉強，曹鳳宏，康紹叁，張金存，高海洋

(1河北聯(lián)合大學，河北唐山063000;2河北聯(lián)合大學附屬醫(yī)院)

膀胱癌在惡性腫瘤中居第9位，平均發(fā)病年齡為70歲，男性患者占70%～85%，非干預患者生存期為16～20個月［1］。70%～80%新發(fā)膀胱癌均表現(xiàn)為淺表型膀胱癌，隨著組織低分化，將演化為極易復發(fā)和轉移的浸潤型膀胱癌［2］，故及時診斷和治療尤為關鍵。癌組織nm23、ki-67及PTEN的表達在膀胱癌診斷中有重要的參考價值，為膀胱癌的早期診斷和術后觀察提供重要臨床依據(jù)。本文就nm23、ki-67及PTEN在膀胱癌組織中的表達作一綜述。

1 nm23與膀胱癌

1.1 nm23的生物學特性 nm23基因有多種生物學功能，具體機制還不清楚;其表達產(chǎn)物與果蠅awd蛋白和核苷酸激酶高度同源。核苷酸激酶為微管的聚合和解聚提供GTP，故nm23基因的異常直接影響細胞的減數(shù)分裂和染色體數(shù)目，從而促進細胞低分化趨勢，導致腫瘤形成。此外，核苷酸激酶介導G蛋白的激活，通過在信號傳導過程中把GDP還原為GTP，而G蛋白介導的信號傳導參與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展［3］。研究表明，存在于線粒體中的表達產(chǎn)物利用cre-loxp基因激活體系來誘導骨肉瘤細胞中nm23基因表達增加，結果導致這些細胞生長受到抑制，并形成多核細胞［4］。由此可見，nm23基因表達產(chǎn)物有抑制癌細胞增殖的作用。

1.2 nm23在膀胱癌組織中的表達及意義 nm23在正常膀胱黏膜組織中呈強陽性表達，主要位于細胞質(zhì)和核周。而在膀胱癌組織中其表達則有不同程度的缺失，且與膀胱組織分化程度有關，即分化越低缺失越嚴重。此外，腫瘤原發(fā)部位nm23呈陽性表達，在轉移癌部位不表達，進一步說明nm23表達缺失與膀胱癌分化程度呈正相關。研究表明，nm23在移行細胞癌中呈強陽性表達，而在鱗癌和腺癌中表達較弱，說明nm23表達與膀胱癌病理類型也有關。同時研究還顯示，nm23基因表達的高低與膀胱癌患者術后生存率呈正相關。據(jù)報道，在低分化、晚期、復發(fā)及多發(fā)膀胱癌組織中 nm23呈低表達［5，6］。在膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展過程中，nm23的表達是一個由強到弱的生物學過程，對癌細胞的浸潤和轉移有抑制作用［7］。高放等［8］研究表明，nm23在膀胱癌中的表達與癌細胞浸潤深度及是否有淋巴結轉移呈負相關，nm23不表達的膀胱癌提示預后不佳。于冬梅等［9］研究表明，有血管侵襲的膀胱移行細胞癌(BTCC)患者nm23表達低于無血管侵襲者。因此，nm23表達對膀胱癌的病理類型、臨床分期、病理學分級、BTCC患者的預后及生存率均有影響。

2 ki-67 與膀胱癌

2.1 ki-67的生物學特性 ki-67是增殖細胞核中非組蛋白類核蛋白，是目前較為穩(wěn)定的核增殖標志物，存在于除G0期的任意細胞周期中。ki-67半衰期較短，其功能在細胞增殖結束后即消失;這對腫瘤患者而言，比其他細胞增殖標志物更能體現(xiàn)腫瘤的惡性程度和預后。有研究表明，在病理級別較高的膠質(zhì)瘤中，ki-67表達也相對較高，而且其預后較差。Filippella等［10］研究發(fā)現(xiàn)，ki-67可預測腫瘤轉移及復發(fā)，并把ki-67標記指數(shù)＞2.9%作為臨界值。人肺癌細胞分裂間期，在核仁的周圍及原纖維上可以看到ki-67蛋白呈點狀和彌散狀分布;細胞分裂中期，在染色體周圍可以看到該蛋白呈網(wǎng)狀分布。因此，ki-67蛋白是檢測癌細胞增殖的可靠指標。

2.2 ki-67在膀胱癌組織中的表達及意義 Bozlu等［11］研究表明，膀胱癌患者ki-67表達與BTCC的分級和分期有密切聯(lián)系。研究顯示，膀胱癌組織中ki-67抗原表達明顯高于正常膀胱組織，而且與BTCC 臨床分期和分級呈正相關［12，13］，說明 ki-67 對膀胱癌的診斷有重要意義。王麗娟等［14］研究表明，BTCC有淋巴結轉移者ki-67表達高于無淋巴結轉移者，術后平均生存期＜3 a者ki-67表達高于平均生存期＞3 a者，且ki-67表達與癌細胞增殖活性呈正相關;這些均提示，ki-67可以作為判斷BTCC惡性程度和預后的重要指標。邢發(fā)樞等［15］研究顯示，膀胱癌組織中與基因合成和復制相關的酶活性高于正常膀胱組織，細胞增殖旺盛，且ki-67表達較高;說明ki-67高表達促使膀胱癌細胞增殖、分裂和轉移，導致向晚期發(fā)展。楊國良等［16］研究表明，復發(fā)與進展膀胱癌患者ki-67表達顯著高于無復發(fā)和無進展者，而且ki-67陽性表達的無復發(fā)和無進展患者的生存率較低，表明ki-67是術后判斷預后的重要指標。研究發(fā)現(xiàn)，ki-67高表達時，膀胱癌的惡性程度和浸潤程度均增加，同時反映腫瘤的預后也差［17，18］。因此，ki-67 是反映膀胱癌患者惡性程度和預后的重要指標。

3 PTEN與膀胱癌

3.1 PTEN的生物學特性 PTEN是具有雙重特異性磷酸酶活性的抑癌基因，而PTEN蛋白呈網(wǎng)狀結構分布于細胞質(zhì)，功能區(qū)位于N端［19］。該蛋白功能區(qū)與細胞骨架張力蛋白和輔助蛋白高度相似，故與細胞黏附和細胞物質(zhì)運輸功能密切相關［20］。PTEN蛋白具有脂質(zhì)磷酸酶和蛋白磷酸酶雙重活性［21］，可經(jīng)三磷酸脂酞肌醇和局部黏附激酶去磷酸化誘導細胞凋亡。PTEN蛋白通過抑制MAPK信號途徑中ERK和RAS的活化以及Shc的磷酸化方式對ERK/MAPK信號傳導進行負調(diào)節(jié)，而MAPK蛋白激酶可活化促細胞分裂素，故可阻斷有絲分裂信號向胞核傳導，使細胞生長周期停滯于G1期，抑制細胞生長。PTEN蛋白通過對核心黏附激酶去磷酸化的方式來抑制細胞黏附和遷移，因此PTEN在腫瘤細胞生長過程中可以抑制腫瘤細胞的擴散，具有抑制癌細胞生長和擴散的特性。

3.2 PTEN在膀胱癌組織中的表達及意義Tsuruta等［22］研究發(fā)現(xiàn)，PTEN基因表達缺失與膀胱癌的分期和分級有一定關聯(lián)，此時腫瘤細胞更容易發(fā)生侵襲和轉移，說明該基因表達在腫瘤演變過程中充當重要角色。王新華等［23］研究顯示，膀胱癌組織中PTEN表達明顯低于正常組織，而且該基因表達隨著膀胱癌惡性程度的上升呈現(xiàn)下降趨勢，說明PTEN基因表達參與膀胱癌的發(fā)生和發(fā)展，同時PTEN基因表達對膀胱癌術后復發(fā)無明顯影響［24］。張建華等［25］研究顯示，在擴增的膀胱癌組織PTEN基因中發(fā)現(xiàn)存在異常DNA，而在正常的對照組中沒有發(fā)現(xiàn)該現(xiàn)象;同時還發(fā)現(xiàn)，在低分化的BTCC組織中，PTEN突變率較高分化BTCC組織顯著升高，說明PTEN的突變與膀胱癌的病理分級有關。李永飛等［26］研究表明，PTEN基因的表達與膀胱癌的臨床分期和病理分級呈負相關，與之前所得結論一致;同時再一次表明，非肌層浸潤性膀胱癌患者的預后與膀胱癌組織中PTEN的表達無相關性。周四維等［27］研究發(fā)現(xiàn)，將帶有PTEN表達的載體在體外轉染BIU-87細胞后進行培養(yǎng)，然后檢測PTEN蛋白，結果顯示BTCC組織BIU-87細胞中該基因能穩(wěn)定表達，在腫瘤凋亡細胞中該基因表達顯著增加;說明PTEN能誘導BTCC組織細胞凋亡，從而抑制腫瘤的發(fā)生和惡化。以上研究均表明，PTEN基因表達對膀胱癌病理分級和臨床分期的判斷有重要意義，目前有關預后的臨床意義尚不確定。

膀胱癌是人類惡性腫瘤之一，有關其臨床診療的各項指標隨著科技的發(fā)展而發(fā)生變化，文中所涉及的nm23、ki-67及PTEN在臨床上已經(jīng)開始應用。大量文獻表明，nm23和PTEN兩類抑癌基因以及ki-67核抗原均與膀胱癌的病理分級和臨床分期有關，前二者表達與其呈負相關，后者與其呈正相關。nm23、ki-67及PTEN的實用性較明確，對膀胱癌的輔助診斷有著重要的臨床意義，也為膀胱癌未來的基因靶向治療奠定基礎。

［1］Parkin DM，Bray F，F(xiàn)erlay J，et al.Global cancer statistics，2002［J］.CA Cancer J Clin，2005，55(2):74-108.

［2］Kaufman DS.Challenges in the treatment of bladder cancer［J］.Ann Oncol，2006，17(5):106-112.

［3］ Postal EH.Nm23-NDP Kinase［J］.Int J Biothem Cell Biol，1998，30(12):1291-1295.

［4］Tsuiki H，Nitta M，F(xiàn)uruya A，et al.A novel human nucleoside diphosphate(NDP)Kinase，nm23-H6，localzes in mitochonarid and affects cytokinesis［J］.J cell Biochem，1999，76(2):254-269.

［5］顧勇.C-erbB-2和EGFR及nm23-H1在膀胱癌中的表達及臨床意義［J］.臨床醫(yī)藥實踐，2011，20(5):333-336.

［6］楊宏梅，鄭美珍.p16與nm23在膀胱癌中的表達及臨床意義［J］.實用腫瘤學雜志，2005，19(5):344-345.

［7］李勝水，張鳳梅，許華，等.nm23與E-cad蛋白在膀胱尿路上皮癌中的表達及其意義［J］.中國當代醫(yī)藥，2011，18(34):12-14.

［8］高放，何靜華，張鳳梅，等.nm23、COX-2與MMP-9與膀胱癌中的表達及其與腫瘤浸潤和轉移的關系［J］.中外醫(yī)療，2012(13):26-28.

［9］于冬梅，閻曉初，郭德玉，等.VEGF和nm23蛋白在膀胱移行細胞癌中表達及臨床意義［N］.第三軍醫(yī)大學學報，2006，28(21):2180-2182.

［10］Filippella M，Galland F，Kujas M，et al.Pituitary tumors transforming gene(PTTG)expression correlates with the proliferative activity and recurrence status of pituitary adenomas:a clinical and immuno-histochemical study［J］.Clin Endocrinol(Oxf)，2006，65(4):536-543.

［11］Bozlu M，Orhan D，Baltacl S，et al.The prognostic value of proliferating cell nuclear antigen，Ki-67 and nuclear organizer region in transitional cell carcinoma of the bladder［J］.Int Urol Nephro，2002，33(1):59-66.

［12］王平，董德平，陳莉，等.Survivin，Ki-67在膀胱癌中的表達及其臨床意義［J］.中華實驗外科雜志，2006，23(6):765.

［13］楊立新，張海峰，白淑芬.p53、Ki-67基因表達與膀胱癌相關性的回顧性研究［J］.現(xiàn)代醫(yī)學，2010，38(1):32-35.

［14］王麗娟，孫晶，李雪燕，等.Ki-67在膀胱移行細胞癌中的表達及意義［J］.現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2009，25(17):2620-2621.

［15］邢發(fā)樞，陳湘，陳早慶，等.膀胱癌 Ki-67的表達在臨床應用的研究［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志，2009，19(19):3008-3010.

［16］楊國良，張連華，薄雋杰，等.Ki-67蛋白在104例非肌層浸潤性膀胱癌中表達及其意義［J］.腫瘤學雜志，2011，17(3):212-215.

［17］伍季，茍欣.ΔNp63、Ki-67在膀胱移行上皮癌的表達及意義［J］.華西醫(yī)學，2009，24(5):1097-1100.

［18］伍季，呂平，李云祥.膀胱上皮癌ΔNp63、p53及ki-67基因表達與預后的相關性研究［J］.現(xiàn)代泌尿外科雜志，2011，16(2):152-155.

［19］Torres J，Pulido R.The tumor suppressor PTEN is Phos Phorylated by the Protein Ki-nase CK2 at its terminus implications PTEN stability to Preteasome-mediated degradation［J］.J Biol Chem，2001，276(2):993-998.

［20］Zhan R，Zhang JJ，He ZG，et al.Research advances on bladder caner associated genes［J］.Ai Zheng，2003，22(1):104-107.

［21］Dahia PL.PTEN，A Unique Tumor Suppressor Gene［J］.Endocr Relate Cancer，2000，7(1):115-129.

［22］Tsuruta H，Kishimoto H，Sasaki T，et al.Hyperplasia and carcinomas in Pten-deficient mice and reduced PTEN protein in human bladder cancer patients［J］. Cancer Res，2006，66(17):8389-8396.

［23］王新華，崔涌，孟憲杰.PTEN、p16、突變型p53在膀胱癌組織中的表達及意義［J］.山東醫(yī)藥，2013，53(9):37-39.

［24］Koksal T，Yasar D，Dirice E，et al.Differential PTEN protein expression profiles in superficial versus invasme bladder cancers［J］.Urol Int，2005，75(2):102-106.

［25］張建華，楊為民，周四維.PTEN基因在膀胱癌組織中的表達和突變［N］.華中科技大學學報(醫(yī)學版)，2006，35(1):119-123.

［26］李永飛，唐敏，王尚乾，等.PTEN和P53在非肌層浸潤性膀胱腫瘤中的表達及臨床意義［N］.南京醫(yī)科大學學報(自然科學版)，2013，33(5):636-640.

［27］周四維，張建華，楊為民，等.PTEN基因轉染對人膀胱癌細胞BIU-87 凋亡的影響［N］.醫(yī)學研究生學報，2005，18(11):969-971.