鐘永忠　綜述　曾彩虹　審校

腎臟的基本功能是將體內(nèi)的代謝廢物排出體外，而腎小球濾過屏障的完整是發(fā)揮腎功能的基本保證。濾過屏障由內(nèi)向外分別由三個部分組成：有孔內(nèi)皮細(xì)胞、腎小球基膜(GBM)及足細(xì)胞。足細(xì)胞是終末分化細(xì)胞，由胞體、初級突起、足突構(gòu)成，通過足突黏附在GBM上，胞體則漂浮在包囊腔的濾液中，這使足細(xì)胞存在以活性細(xì)胞從GBM脫離的危險。為了抵抗毛細(xì)血管跨膜壓，阻止足細(xì)胞的脫落，足細(xì)胞不但擁有細(xì)胞間黏附分子——裂孔隔膜，還存在細(xì)胞-基質(zhì)黏附分子——足突-基膜連接。正常生理狀況下，尿液中存在少量足細(xì)胞，但在腎小球疾病中，這種脫落的足細(xì)胞數(shù)量明顯增加。足細(xì)胞在長期的進(jìn)化中可能演變出某種機(jī)制來抵抗足細(xì)胞脫落。在損傷應(yīng)激過程中，足細(xì)胞的形狀發(fā)生改變，足突融合則是最顯著的變化，足突融合是否為足細(xì)胞抵抗脫落的機(jī)制之一尚存疑問。本文就足細(xì)胞-基膜黏附的分子基礎(chǔ)及足細(xì)胞對損傷所作出的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化作一簡述，著重探討足突融合的機(jī)制及意義。

足細(xì)胞-基膜黏附及其信號傳導(dǎo)通路

足細(xì)胞足突面表達(dá)一系列的細(xì)胞-基質(zhì)黏附受體，最重要是整合素α3β1。整合素α3β1是非共價結(jié)合的異二聚體，亞基的氨基末端形成胞外配體結(jié)合域，與GBM內(nèi)的層黏連蛋白、Ⅳ型膠原和纖維連接蛋白等結(jié)合。整合素胞質(zhì)側(cè)的尾部較短，它通過相關(guān)的銜接分子(如talin、vinculin、paxillin等)將整合素亞基連接到肌動蛋白骨架上。配體與整合素結(jié)合后，通過胞質(zhì)內(nèi)的激酶[如整合素連接激酶(ILK)、黏附斑激酶(FAK)]將外界的刺激信號傳導(dǎo)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，誘導(dǎo)足細(xì)胞骨架形態(tài)及功能改變以應(yīng)對外界環(huán)境的變化。

ILK是一個高度保守的絲氨酸/蘇氨酸激酶，主要有三個結(jié)構(gòu)域：氨基端的錨蛋白重復(fù)序列(ANK)，是ILK與黏著斑蛋白PINCH結(jié)合位點。PINCH通過與Nck-2相結(jié)合募集肌動蛋白調(diào)節(jié)蛋白(如WASP、Dock180、PAK)，并進(jìn)一步通過核化蛋白(Arp2/3、MLC Kinase、confilin等)調(diào)節(jié)肌動蛋白聚集排列[2]。中間為磷脂酰肌醇結(jié)合結(jié)構(gòu)域(PH結(jié)構(gòu)域)，PI3K的產(chǎn)物PIP3與此結(jié)構(gòu)域結(jié)合后激活I(lǐng)LK。羧基端為激酶催化結(jié)構(gòu)域，也是整合素及許多actin銜接蛋白的結(jié)合區(qū)域，包括parvin家族、paxillin等。ILK是 ILK-PINCH-parvin復(fù)合物中的核心部分，參與黏著斑復(fù)合體及細(xì)胞骨架形成，影響細(xì)胞運動及遷移。ILK還是整合素與裂孔隔膜上濾過膜分子耦合的橋梁[3]，因此足細(xì)胞黏附或者ILK信號的變化都將影響腎小球濾過屏障。

FAK是非受體酪氨酸激酶。FAK肽鏈的N端是FREM結(jié)構(gòu)域，為細(xì)胞因子等受體的結(jié)合位點，此區(qū)域也能結(jié)合和促進(jìn)整合素介導(dǎo)的非酪氨酸激酶(如Erk)的激活。中段的激酶結(jié)構(gòu)域(PTK)在結(jié)合整合素后，Y397位點的酪氨酸自磷酸化，為Scr提供結(jié)合位點，Src的結(jié)合使FAK得到充分活化。FAK的C端含有黏著斑靶向定位結(jié)構(gòu)域(FAT)，當(dāng)與整合素結(jié)合后，此區(qū)域發(fā)生聚集，通過與paxinlin及talin結(jié)合后招募FAK到黏附處，此區(qū)域活化后為多種蛋白的活化提供場所，其中包含P130Cas和GRAF/ASAP1等，這些蛋白可調(diào)控Rac和Rho的活性等，并影響α-actinin-4的磷酸化水平與肌動蛋白的解離與聚合[4]。

為了應(yīng)對外界的機(jī)械力，防止足細(xì)胞的丟失，細(xì)胞基質(zhì)黏附受體必須與細(xì)胞骨架相偶聯(lián)。足細(xì)胞胞體含有三種細(xì)胞骨架組分(F-actin、中間絲和微管蛋白)，而肌動蛋白束只在足突表達(dá)，并且延伸到細(xì)胞細(xì)胞連接面和細(xì)胞基質(zhì)連接面[5]，且與整合素黏附相關(guān)蛋白復(fù)合物介導(dǎo)的黏附功能相偶聯(lián)[6]。外界機(jī)械力可通過細(xì)胞表面的整合素引起Rho移位，通過Rho的下游效應(yīng)器Rho激酶引起細(xì)胞骨架的重排。因此，正常生理機(jī)制下，Rho的活性受到嚴(yán)格的調(diào)控，且抑制Rho激酶可改善許多實驗性腎病。

足細(xì)胞對損傷的反應(yīng)

在損傷應(yīng)激狀態(tài)下，足細(xì)胞形態(tài)會發(fā)生巨大變化，這些形態(tài)變化包括：(1)細(xì)胞體的過度肥大(胞質(zhì)變稀薄和足細(xì)胞下間隙擴(kuò)大形成假性囊腫)；(2)自噬的增加，溶酶體內(nèi)物質(zhì)聚集，引起胞質(zhì)的脫落；(3)足突融合，是最主要的變化；(4)胞質(zhì) “微絨毛化”。這些微絨毛既可延伸到GBM，也可延伸到壁層上皮細(xì)胞之間的壁層基膜(PBM)。這種現(xiàn)象可解釋為足細(xì)胞在尋找可以黏附的地方(如GBM或PBM)[7]，之后引起整個足細(xì)胞向這個新黏附點遷移。雖然以上這些變化可逆，但也可進(jìn)展為更加嚴(yán)重的損傷，如細(xì)胞凋亡(溶酶體酶釋放使細(xì)胞溶解)或以活性的細(xì)胞從GBM上剝離。

足突融合

病理變化足突融合是指相鄰的正常足細(xì)胞的趾狀結(jié)構(gòu)消失，導(dǎo)致覆蓋在GBM上的足細(xì)胞足突融合成片，廣泛擴(kuò)張，從而引起腎小球?qū)Υ蠓肿游镔|(zhì)的通透性增加。足突融合的形成包括兩個階段：第一階段，規(guī)律的梳齒狀結(jié)構(gòu)消失，足突回縮成短而不規(guī)則的細(xì)胞突起狀結(jié)構(gòu)[8]，同時裂孔隔膜消失或移位，足突之間形成緊密型連接。第二階段，次級足突向初級足突回縮，導(dǎo)致覆蓋在GBM上的足突廣泛形成類似于碟狀的結(jié)構(gòu)，且最終與胞體融合。此時，正常的足細(xì)胞下間隙也大部分消失，足細(xì)胞胞體廣泛直接黏附于GBM，從而防止足細(xì)胞的脫落。

足突融合形成過程中同時伴精密、有序的足細(xì)胞骨架的重排。在足突的GBM側(cè)形成細(xì)胞骨架叢，這是微絲通過α-actinin連接形成的高度密集有序的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)[9]。在各類腎小球疾病都能觀察到這種結(jié)構(gòu)，包括微小病變性腎病(MCD)、膜性腎病(MN)和IgA腎病[10]。在大鼠Masugi 腎炎模型中，細(xì)胞骨架的重排伴隨著actin、α-actinin-4 和synaptopodin表達(dá)的增加，同時α-actinin-4主要定位于靠近GBM側(cè)的高密度區(qū)域[9]。在氨基核苷嘌呤霉素腎病中，α-actinin-4的表達(dá)增加發(fā)生在足突融合和蛋白尿之前[11]。足突GBM側(cè)致密微絲的聚集表明足細(xì)胞-GBM之間的連接發(fā)生了變化，可能增強(qiáng)足細(xì)胞與GBM的連接，防止足細(xì)胞的脫落。

體外培養(yǎng)的足細(xì)胞無足突，予機(jī)械應(yīng)力后，足細(xì)胞轉(zhuǎn)換成“運動表型”，類似于體內(nèi)的足突融合。體內(nèi)足突融合的早期階段其實也伴隨著遷徙能力的增加，但是足突融合的晚期階段，足突融合成片，融合的足突區(qū)域與GBM緊密結(jié)合。體外培養(yǎng)足細(xì)胞轉(zhuǎn)換成“運動表型”后，常伴整合素亞型表達(dá)的變化，下調(diào)整合素α3β1，上調(diào)整合素αvβ3，增加足細(xì)胞對機(jī)械應(yīng)力的抵抗[12]。糖尿病患者及動物模型中，也同樣發(fā)現(xiàn)了足細(xì)胞中整合素α3β1表達(dá)的下調(diào)[13]。

功能聯(lián)系迄今為止，僅少數(shù)文獻(xiàn)報道足突融合是足細(xì)胞的一種適應(yīng)性反應(yīng)，而非單一認(rèn)為是細(xì)胞損傷的結(jié)果。足突融合時，足突GBM側(cè)細(xì)胞骨架內(nèi)肌動蛋白束成分的增加增強(qiáng)了足細(xì)胞收縮能力，以抵抗跨膜壓的增加。雖然跨膜壓的增加在某種程度上促發(fā)了足突融合，但足突融合形成的根本目的并不是為了抵抗跨膜壓。

首先，增加的跨膜壓影響了整個絲球體，但是足突融合卻是局灶分布的。其次，在高血壓導(dǎo)致的腎損害模型中[14]，早期缺乏足突融合。相反，高度擴(kuò)張的毛細(xì)血管壁外側(cè)足突非常規(guī)律地呈梳齒狀分布。因此足突融合的形成必有其他功能上的優(yōu)點。

足細(xì)胞丟失

機(jī)體在生理情況下及疾病狀態(tài)下足細(xì)胞丟失的原因和機(jī)制一直存在爭議。目前認(rèn)為兩種機(jī)制參與了足細(xì)胞的丟失，即足細(xì)胞凋亡和活性足細(xì)胞的脫落。

足細(xì)胞原位凋亡造成的足細(xì)胞丟失在進(jìn)展性腎小球疾病中，凋亡被廣泛認(rèn)為是足細(xì)胞丟失的主要機(jī)制。由于體外足細(xì)胞并未完全分化，有的明顯處于細(xì)胞分裂期，并不能完全具備原位足細(xì)胞的特點。而體內(nèi)實驗中檢測細(xì)胞凋亡的方法主要是TUNEL染色法，此方法雖然非常敏感，但也易出現(xiàn)假陽性。即使尿液中發(fā)現(xiàn)凋亡的足細(xì)胞并不一定意味足細(xì)胞在原位發(fā)生凋亡，因為足細(xì)胞在腎單位內(nèi)移動過程中失去了與基膜的連接也可導(dǎo)致足細(xì)胞凋亡，即失巢凋亡。且尿液在到達(dá)缺氧及酸性的膀胱之前可檢出活性的足細(xì)胞。

腎小球疾病晚期，在包囊腔中偶見少量孤立性的死亡足細(xì)胞及細(xì)胞碎片，表明足細(xì)胞在剝離之前或剝離同時發(fā)生了細(xì)胞死亡。但這些原位死亡的足細(xì)胞是由于胞質(zhì)內(nèi)溶酶體酶釋放導(dǎo)致細(xì)胞溶解而引起的，且相鄰的足細(xì)胞內(nèi)也出現(xiàn)溶酶體成分的增加。死亡的足細(xì)胞中也未觀察到凋亡的典型特點，如凋亡小體的形成[15]。即使足細(xì)胞細(xì)胞結(jié)構(gòu)發(fā)生很大變化，電鏡下其細(xì)胞核染色質(zhì)仍保存完好。綜上所述，凋亡并不是造成足細(xì)胞丟失的主要原因。

活性足細(xì)胞剝脫造成的足細(xì)胞丟失足細(xì)胞的位置與結(jié)構(gòu)使其容易受濾出液剪切力的影響，造成脫落。越來越多的證據(jù)表明足細(xì)胞可沿GBM遷移，這對足細(xì)胞黏附在GBM上提出了巨大的挑戰(zhàn)。

尿液中的足細(xì)胞腎小球疾病中足細(xì)胞的脫落是一個比較常見的病理現(xiàn)象，進(jìn)一步研究證實這些足細(xì)胞大部分仍具有活性[16]，提示凋亡或壞死并非是足細(xì)胞脫落的主要原因。足細(xì)胞剝離速率和在尿液中出現(xiàn)的多少與疾病的病理進(jìn)展相關(guān)[17]，持續(xù)的足細(xì)胞數(shù)量減少將進(jìn)展成腎小球硬化。

原位證據(jù)研究表明局灶性的足細(xì)胞剝離，是部分腎小球疾病足細(xì)胞丟失的機(jī)制之一[18]。足細(xì)胞的完全剝離需經(jīng)多個步驟才能完成，足細(xì)胞部分足突已與GBM剝離時，部分依然固定在GBM上。此時，足細(xì)胞形態(tài)雖然已存在明顯的改變(如足突融合)，但絕大多數(shù)足細(xì)胞的核膜依然完整，胞質(zhì)內(nèi)的細(xì)胞器保存完好，提示足細(xì)胞依然具有活性。局灶的足突剝離并不意味著整個足細(xì)胞將不可逆的從GBM上脫落。因為在某種程度上，足突的局灶剝離是可逆的，如MCD緩解時，足突融合消失，恢復(fù)正常的足突結(jié)構(gòu)。

在炎癥性動物模型如抗GBM腎炎模型[7]及抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體相關(guān)性血管炎腎炎模型[19]中，病變明顯處的足細(xì)胞出現(xiàn)足突融合，但只有節(jié)段的足突從GBM上剝離，大部分依然與GBM保持黏連，因此足突融合形成于完全剝離之前。在Thy-1介導(dǎo)的腎小球腎炎模型中[20]，由于系膜基質(zhì)破壞和系膜細(xì)胞損傷，失去對毛細(xì)血管袢的支撐，使得尿極處的血管袢突入近端腎小管中。由于此處超濾液流速最快，使足細(xì)胞暴露在增強(qiáng)的剪切力中，細(xì)胞外形拉長，易發(fā)生足細(xì)胞脫落。為了應(yīng)對增強(qiáng)的剪切力，防止細(xì)胞脫落，此處的足細(xì)胞出現(xiàn)了足突融合。因此，在上述情況下足突融合是足細(xì)胞應(yīng)對機(jī)械應(yīng)力的一種反應(yīng)，且發(fā)于剝離之前。

因此，足突融合似乎代表著一種特殊的、反應(yīng)性的足細(xì)胞表型，它可以增加與GBM的黏合力，至少在一定時間內(nèi)可降低足細(xì)胞剝離的風(fēng)險。當(dāng)局部的條件改善后，為重建濾過膜提供基礎(chǔ)。

足突融合是對損傷的反應(yīng)還是原發(fā)性損害

要驗證足突融合是足細(xì)胞防止脫落丟失的一種保護(hù)性措施這個假說，必須在不同的腎小球疾病中得到驗證。分為兩類腎小球疾?。阂活愂莻€別腎小球局灶性損傷(至少病變的嚴(yán)重程度不一樣)，足突融合被認(rèn)為是對局灶損傷的一種保護(hù)性機(jī)制；另一類是所有的腎小球同時受累，此類主要是因為維持正常足細(xì)胞結(jié)構(gòu)的相關(guān)蛋白網(wǎng)絡(luò)機(jī)制存在原發(fā)性缺陷，或因網(wǎng)絡(luò)中的成分受到異常刺激。

腎小球局灶損傷中的足突融合此類腎小球疾病是累及個別腎小球的節(jié)段區(qū)域，如炎癥性腎小球腎炎，足突融合的出現(xiàn)被認(rèn)為是足細(xì)胞防止脫落的一種保護(hù)性機(jī)制。足細(xì)胞中整合素與肌動蛋白骨架的連接易被補體激活產(chǎn)物及其他有害的炎癥介質(zhì)破壞[21]。在上皮側(cè)免疫復(fù)合物沉積的疾病中(如MN、膜增生性腎小球腎炎和狼瘡性腎炎等)，免疫復(fù)合物的沉積減弱了足細(xì)胞與GBM的連接。在糖尿病腎病、Alport 和 Pierson 綜合征等疾病時,GBM中基質(zhì)成分的變化將減弱足細(xì)胞與GBM的黏附。在高灌注腎小球疾病中，增加的毛細(xì)血管靜水壓引起GBM張力增加，導(dǎo)致足細(xì)胞和GBM之間相互作用的負(fù)荷過重,從而使足細(xì)胞內(nèi)肌動蛋白骨架發(fā)生反應(yīng)性變化[22]。在高濾過的疾病中，如糖尿病、妊娠、繼發(fā)性局灶節(jié)段性腎小球硬化(FSGS)等,增加的剪切力在發(fā)病機(jī)制中起著重要作用[23]，尤其對尿極處的足細(xì)胞影響更加明顯，形成“頂部病變”或者頂部型FSGS。促進(jìn)足細(xì)胞生長的刺激也會引起足細(xì)胞分裂[24]，引起細(xì)胞骨架重排，從而影響足細(xì)胞與GBM的黏附，但足細(xì)胞不能完成胞質(zhì)分裂，最終導(dǎo)致有絲分裂的“流產(chǎn)”或者雙核的出現(xiàn)。

足突融合的形成是這類疾病的共同特征，損傷應(yīng)激又是如何引起足突融合的呢？可能涉及以下兩種機(jī)制:(1)機(jī)械力的增加影響了足細(xì)胞-GBM相互作用，引起整合素介導(dǎo)的由外到里的信號傳導(dǎo)。如前所述，此過程涉及整合素、TPV復(fù)合物、ILK、和FAK。小鼠ILK過表達(dá)會引起足突融合，繼而形成FSGS，抑制FAK可減少蛋白尿和足突融合的形成[25]。(2)足細(xì)胞剝離早期為節(jié)段足突的部分剝脫，這種微小的變化有時在透射電鏡中難以辨認(rèn)，但會影響到裂孔隔膜，改變它的分子結(jié)構(gòu)，同時促發(fā)了危險信號導(dǎo)致局部足突融合的形成。而且TRPC通道和小GTPase的Rho家族的信號傳導(dǎo)通路在足細(xì)胞肌動蛋白骨架調(diào)節(jié)中的作用也成為研究熱點[26]。

足突融合是維持正常結(jié)構(gòu)機(jī)制缺陷的結(jié)果在許多的遺傳性疾病，將足突融合解釋為足細(xì)胞應(yīng)對應(yīng)激的一種保護(hù)性反應(yīng)并不恰當(dāng)。在這類疾病中，維持足突結(jié)構(gòu)的基因表達(dá)發(fā)生變化，這些變化或影響了足細(xì)胞內(nèi)的信號傳導(dǎo)通路，降低了足細(xì)胞對損傷的適應(yīng)性反應(yīng)能力，或影響了細(xì)胞骨架蛋白的編碼從而導(dǎo)致足突融合[27]。因此，在以上情況下，足突融合并不代表對損傷的一種反應(yīng)，而是直接誘發(fā)了足突融合。

MCD在電鏡下表現(xiàn)為足細(xì)胞足突廣泛融合，足突融合的出現(xiàn)是由于循環(huán)因子引起細(xì)胞骨架蛋白調(diào)節(jié)異常的結(jié)果，而不是對損傷的反應(yīng)，雖然出現(xiàn)了大范圍的足突融合，但無足細(xì)胞的丟失及疾病的進(jìn)展。近年來，suPAR被認(rèn)為是與FSGS發(fā)病相關(guān)的一種循環(huán)因子，循環(huán)中的suPAR與足細(xì)胞上的β3類整合素結(jié)合后，可激活Rac1和Cdc42信號通路引起足突融合和蛋白尿[28]。

足突融合和蛋白漏出

除了裂孔隔膜，GBM或內(nèi)皮細(xì)胞的損傷也可導(dǎo)致蛋白尿。但蛋白尿的發(fā)生與足細(xì)胞的結(jié)構(gòu)變化最相關(guān)。現(xiàn)有假說一般認(rèn)為足突融合與蛋白尿之間存在因果關(guān)系，且足突融合的寬度與蛋白尿程度相關(guān)，但也有文獻(xiàn)證實不相關(guān)[29]。有學(xué)者認(rèn)為白蛋白以胞吞作用的方式通過融合成片的足突區(qū)域形成蛋白尿[35]。但以下解釋更具有說服力：如前所述，足突融合是一個多步驟的過程，早期階段足突在GBM上的移動能力的增強(qiáng)，造成局部短暫的從GBM剝離，可能短暫的引起大分子通過此區(qū)域，且在活動性腎小球疾病中，這種短暫的剝離在不同的部位時有發(fā)生，因此會出現(xiàn)持續(xù)的蛋白尿。

總之，足突融合是足細(xì)胞應(yīng)對損傷的一種保護(hù)性機(jī)制，阻止足細(xì)胞剝離，最終目的是為了限制蛋白的漏出，阻止疾病的進(jìn)展。在嚴(yán)重疾病狀態(tài)下，足突融合似乎能夠阻止濾過屏障廣泛的泄漏，但這也導(dǎo)致濾過率的短暫下降。同時，足突融合并不能完全阻止血漿蛋白的漏出，因為在足突融合形成過程中，裸露的基膜不斷增加，導(dǎo)致蛋白的漏出；其次在完全融合區(qū)域的邊緣，相鄰足細(xì)胞的異常連接會影響裂孔隔膜的正常功能。

小結(jié)：足細(xì)胞是終末分化細(xì)胞，胞體通過足突黏附在GBM上，周圍浸泡在包囊腔的濾過液中。任何破壞足突與GBM連接的損傷都有導(dǎo)致足細(xì)胞以活性形式從GBM脫落的危險。在應(yīng)激狀態(tài)下足細(xì)胞的結(jié)構(gòu)表型發(fā)生變化，最顯著的變化就是足突融合。足突融合并不是損傷后的病理紊亂，而是細(xì)胞為了生存而進(jìn)化的一種適應(yīng)性反應(yīng)。本文認(rèn)為足突融合是足細(xì)胞表型的一種調(diào)節(jié)性改變，防止足細(xì)胞其從GBM上脫落至尿液，甚至以暫時性犧牲濾過率和選擇性通透性的方式防止足細(xì)胞丟失。

1Sachs N，Claessen N，Aten J，et al.Blood pressure influences end-stage renal disease of Cd151 knockout mice.J Clin Invest，2012，122(1):348-358.

2Millard TH，Sharp SJ，Machesky LM.Signalling to actin assembly via the WASP (Wiskott-Aldrich syndrome protein)-family proteins and the Arp2/3 complex.Biochem J，2004，380(Pt 1):1-17.

3Dai C，Stolz DB，Bastacky SI，et al.Essential role of integrin-linked kinase in podocyte biology:Bridging the integrin and slit diaphragm signaling.J Am Soc Nephrol，2006，17(8):2164-2175.

4Schaller MD.Cellular functions of FAK kinases:insight into molecular mechanisms and novel functions.J Cell Sci，2010，123(Pt 7):1007-1013.

5Welsh GI，Saleem MA.The podocyte cytoskeleton--key to a functioning glomerulus in health and disease.Nat Rev Nephrol，2011，8(1):14-21.

6Wehrle-Haller B.Structure and function of focal adhesions.Curr Opin Cell Biol，2012，24(1):116-124.

7Le Hir M，Keller C，Eschmann V，et al.Podocyte bridges between the tuft and Bowman’s capsule:an early event in experimental crescentic glomerulonephritis.J Am Soc Nephrol，2001，12(10):2060-2071.

8George B，Verma R，Soofi AA，et al.Crk1/2-dependent signaling is necessary for podocyte foot process spreading in mouse models of glomerular disease.J Clin Invest，2012，122(2):674-692.

9Shirato I，Sakai T，Kimura K，et al.Cytoskeletal changes in podocytes associated with foot process effacement in Masugi nephritis.Am J Pathol，1996，148(4):1283-1296.

10 Shirato I.Podocyte process effacement in vivo.Microsc Res Tech，2002，57(4):241-246.

11 Smoyer WE，Mundel P，Gupta A，et al.Podocyte alpha-actinin induction precedes foot process effacement in experimental nephrotic syndrome.Am J Physiol，1997，273(1 Pt 2):F150-F157.

12 Dessapt C，Baradez MO，Hayward A，et al.Mechanical forces and TGFbeta1 reduce podocyte adhesion through alpha3beta1 integrin downregulation.Nephrol Dial Transplant，2009，24(9):2645-2655.

13 Chen HC，Chen CA，Guh JY，et al.Altering expression of alpha3beta1 integrin on podocytes of human and rats with diabetes.Life Sci，2000，67(19):2345-2353.

14 Kirchhoff F，Krebs C，Abdulhag UN，et al.Rapid development of severe end-organ damage in C57BL/6 mice by combining DOCA salt and angiotensin II.Kidney Int，2008，73(5):643-650.

15 Peti-Peterdi J，Sipos A.A high-powered view of the filtration barrier.J Am Soc Nephrol，2010，21(11):1835-1841.

16 Vogelmann SU，Nelson WJ，Myers BD，et al.Urinary excretion of viable podocytes in health and renal disease.Am J Physiol Renal Physiol，2003，285(1):F40-F48.

17 Fukuda A，Wickman LT，Venkatareddy MP，et al.Angiotensin II-dependent persistent podocyte loss from destabilized glomeruli causes progression of end stage kidney disease.Kidney Int，2012，81(1):40-55.

18 Kemeny E，Mihatsch MJ，Dürmüller U，et al.Podocytes loose their adhesive phenotype in focal segmental glomerulosclerosis.Clin Nephrol.1995 Feb;43(2):71-83.

19 Neumann I，Birck R，Newman M，et al.SCG/Kinjoh mice:a model of ANCA-associated crescentic glomerulonephritis with immune deposits.Kidney Int，2003，64(1):140-148.

20 Friedrich C，Endlich N，Kriz W，et al.Podocytes are sensitive to fluid shear stress in vitro.Am J Physiol Renal Physiol，2006，291(4):F856-F865.

21 Topham PS，Haydar SA，Kuphal R，et al.Complement-mediated injury reversibly disrupts glomerular epithelial cell actin microfilaments and focal adhesions.Kidney Int，1999，55(5):1763-1775.

22 Endlich N，Kress KR，Reiser J，et al.Podocytes respond to mechanical stress in vitro.J Am Soc Nephrol，2001，12(3):413-422.

23 Helal I，F(xiàn)ick-Brosnahan GM，Reed-Gitomer B，et al.Glomerular hyperfiltration:definitions，mechanisms and clinical implications.Nat Rev Nephrol，2012，8(5):293-300.

24 Kriz W，H?hnel B，R?sener S， et al.Long-term treatment of rats with FGF-2 results in focal segmental glomerulosclerosis.Kidney Int，1995，48(5):1435-1450.

25 Ma H，Togawa A，Soda K，et al.Inhibition of podocyte FAK protects against proteinuria and foot process effacement.J Am Soc Nephrol，2010，21(7):1145-1156.

26 Greka A，Mundel P.Cell biology and pathology of podocytes.Annu Rev Physiol，2012，74:299-323.

27 Yaddanapudi S，Altintas MM，Kistler AD，et al.CD2AP in mouse and human podocytes controls a proteolytic program that regulates cytoskeletal structure and cellular survival.J Clin Invest，2011，121(10):3965-3980.

28 Wei C，M?ller CC，Altintas MM，et al.Modification of kidney barrier function by the urokinase receptor.Nat Med，2008，14(1):55-63.

29 van den Berg JG，van den Bergh Weerman MA，Assmann KJ，et al.Podocyte foot process effacement is not correlated with the level of proteinuria in human glomerulopathies.Kidney Int，2004，66(5):1901-1906.

30 Kinugasa S，Tojo A，Sakai T，et al.Selective albuminuria via podocyte albumin transport in puromycin nephrotic rats is attenuated by an inhibitor of NADPH oxidase.Kidney Int，2011，80(12):1328-1338.