孫宇光

【摘 要】目的：采用亞硝酸鈉滴定法對氨基苯甲酸酯類藥物的含量進(jìn)行測定，分析其藥物反應(yīng)及其含量。方法：根據(jù)測定指示其終點的方法，主要有電位法、永停滴定法，外指示劑法等。結(jié)果：芳伯氨基在酸性液中與亞硝酸鈉定量反應(yīng)，生成重氮鹽，反應(yīng)終點用永停法或外指示劑法顯示。結(jié)論：亞硝酸鈉滴定法對氨基苯甲酸酯類藥物的含量進(jìn)行測定方法中目前多采用永停滴定法顯示終點。

【關(guān)鍵詞】氨基苯甲酸酯類藥物；亞硝酸鈉滴定法；甲酸酯類藥物；亞硝酸鈉定量反應(yīng)；永停滴定法；外指示劑法；電位法

有芳伯氨基的藥物如對氨基苯甲酸脂類、磺胺類；水解以后有芳伯氨基對乙酰氨基酚；分子中有硝基可還原得芳伯氨基者比如無味氯霉素等藥物，均可用亞硝酸鈉法測定含量。

1 基本原理

芳伯氨基在酸性液中與亞硝酸鈉定量反應(yīng)，生成重氮鹽，反應(yīng)終點用永停法或外指示劑法顯示。這種方法適用范圍比較廣泛，為一些國家的藥典中所采用。

2 測定的主要條件

重氮化反應(yīng)的速度受多種因素的影響，亞硝酸鈉滴定液及反應(yīng)生成的重氮鹽也不夠穩(wěn)定，因此測定中應(yīng)當(dāng)注意以下主要條件。

2.1 反應(yīng)速度與藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的關(guān)系

在鹽酸存在的條件下，重氮化進(jìn)行反應(yīng)，第一步的反應(yīng)速度慢，后兩步反應(yīng)速度則比較快，所以整個反應(yīng)速度取決于第一步。如果能使第一步反應(yīng)速度加快，則整個反應(yīng)也就相應(yīng)地加快，而第一步的反應(yīng)快慢與含芳伯氨基化合物中芳伯氨基的游離程度有密切的關(guān)系，如果游離芳伯氨基的堿性較弱，則在一定強(qiáng)度酸性溶液中成鹽的比例較小，即游離芳伯氨基較多，重氮化反應(yīng)速度就快；反之，芳伯氨基堿性較強(qiáng)，則在一定程度上酸性液中成鹽比例較大，游離芳伯氨基較少，則重氮化反應(yīng)速度就慢。因此，在苯胺芳環(huán)上，尤其是在對位，存在有取代基如磺酸基、硝基、羥基、甲基和鹵素等，由于共軛效應(yīng)與誘導(dǎo)效應(yīng)，使芳伯氨基N上電子云密謀降低，則芳伯氨基堿性減弱，重氮化反應(yīng)就較快；反之，如果在苯胺環(huán)對位上，存在的取代基為烷氧基、羥基和甲基等，使芳伯氨基N上電子云密度增大，則堿性增強(qiáng)，重氮化反應(yīng)速度變慢。所以，一般在測定時，特別是具有能增強(qiáng)芳伯氨基堿性的取代基的藥物，于供試溶液中需加入適量溴化鉀大約2～3克，使加速重氮化反應(yīng)。溴化鉀與鹽酸作用產(chǎn)生溴化氫，由于試驗中的硝酸離子濃度過大，因此能夠加速重氮化反應(yīng)的進(jìn)行。

2.2 反應(yīng)速度與酸及酸度的關(guān)系

因胺類的鹽酸鹽較其硫酸鹽的溶解度大，反應(yīng)速度也較快，所以多采用鹽酸。鹽酸的用量按反應(yīng)為1mol的芳胺與2mol的鹽酸作用，但實際測定的鹽酸用量要大得多，尤其是某些在酸中難溶解的藥物，往往要多加一些酸。在強(qiáng)酸性介質(zhì)中，可以加速反應(yīng)的進(jìn)行，重氮化合物在酸性溶液中比較穩(wěn)定，防止生成偶氮氨基化合物，影響測定結(jié)果。酸度加大，反應(yīng)向左進(jìn)行，因此可以避免偶氮氨基化合物的生成。但酸度過大，可以阻礙氨基的游離，反而影響重氮化反應(yīng)速度。在太濃的鹽酸中也可使亞硝酸分解。所以一般加酸的量為芳胺類藥物與酸的mol比約為1：2.5～6。

2.3 反應(yīng)速度與溫度的關(guān)系

溫度高，反應(yīng)速度快；但溫度高時，可使亞硝酸逸失，并且可以使重氮鹽分解。一般溫度每升高10度，重氮化反應(yīng)速度加快2.5倍，但重氮鹽分解速度也相應(yīng)地加速2倍，所以測定時一定都要在低溫下進(jìn)行。由于低溫時反應(yīng)慢，經(jīng)過試驗，可以在室溫10～30度時進(jìn)行，為了避免亞硝酸的揮發(fā)和分解，滴定時將滴定管尖端插入液面下三分之二處，一次將大部分亞硝酸滴定液在攪拌下迅速加入，使其盡快反應(yīng)，然后將滴管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，再緩緩滴定至終點。這樣一來可以縮短滴定時間，也不影響結(jié)果。

2.4 反應(yīng)速度與滴定速度的關(guān)系

重氮化反應(yīng)分為分子反應(yīng)，速度較慢，所以滴定不宜過快，以防反應(yīng)不完全而造成亞硝酸的損失。但如上述將滴定管尖端插入液面以下，較快放出滴定液，可在室溫滴定又能防止亞硝酸的損失，而在管尖提出液面后，滴定宜慢，尤其是在近終點時，因尚未作用的芳伯氨基濃度極稀，須在最后一滴加入攪拌1～5分鐘以后再確定是否達(dá)到真正的終點。

3 指示終點的方法

根據(jù)目前測定的方法主要有電位法、永停滴定法，外指示劑法等，現(xiàn)在多采用永停滴定法進(jìn)行指示終點。

3.1 永停滴定法

主要原理為將兩根鉑電極插入固定液中，在兩個電極間外加電壓約為50毫伏，在電解池線路中串聯(lián)一靈敏的檢流計。用亞硝酸鈉溶液定時，終點前，線路上無電流通過，電流計指針指零。當(dāng)溶液中有微量亞硝酸存在時，電極即起氧化還原反應(yīng)，線路中有電流通過，此時電流計指針突然偏轉(zhuǎn)，并不再回復(fù)，即為滴定終點。

3.2 電位法

利用甘汞—鉑電極系統(tǒng)，當(dāng)重氮化反應(yīng)完成時，溶液中有多余的亞硝酸，使電位產(chǎn)生突躍。如果用直讀式電位計，則可使電位指針突然偏轉(zhuǎn)而指示終點。美國藥典多采用此法。

3.3 外指示劑法

常用碘化鉀—淀粉糊劑或者試紙，滴定終點時，稍過量的亞硝酸鈉在酸性液中氧化碘化鉀，析出的碘遇到淀粉即顯藍(lán)色。使用時，將糊劑置白磁板上鋪為薄層，當(dāng)以細(xì)玻棒蘸取少許滴定液劃過，立即顯藍(lán)色即為滴定終點。用本法指示終點適用于多種藥物及其制劑的亞硝酸鈉滴定法。但由于滴定溶液的酸堿性，未達(dá)到終點時，碘化鉀在酸性液中遇光被空氣緩緩氧化也能夠游離出碘，與淀粉顯藍(lán)色而混淆終點；亞硝酸鈉液在過量1～2滴時方可靈敏地指示終點；以及由于多次外試也可能損失供品而增加滴定誤差，所以初次采用者較難以掌握。一般可以予先計算滴定液的消耗量，在接近理論終點前，緩緩滴定和取樣液試終點，可以減少供試樣品的損失。應(yīng)用外指示劑的靈敏度和反應(yīng)液的體積有關(guān)，如果測定與標(biāo)化的體積不一致，往往會引入一定偏差，為了避免這些偏差，可使測定時溶液的體積與標(biāo)化亞硝酸鈉滴定液時體積一致或測定與標(biāo)化均進(jìn)行空白校正。

總而言之，通過上述方法對于氨基苯甲酸酯類藥物進(jìn)行含量的測定效果顯著，使用方便，有效易行，除此之外，還有高效液相色譜法和非水溶液滴定法等進(jìn)行藥物的測量。