劉 玲，王 鑫，朱祖安

徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，江蘇 徐州221000

潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)是一種病因尚不完全明確的結(jié)腸和直腸慢性非特異性炎癥。UC可能的發(fā)病因素包括免疫、感染、遺傳、環(huán)境、精神心理等方面［1］。有研究提示UC 患者存在不同程度的菌群異常，如腸道細(xì)菌總數(shù)發(fā)生變化，菌群的多樣性降低，病原菌比例增高［2］。Ott 等［3］研究顯示，UC 組腸道細(xì)菌總數(shù)較正常對照組下降，而Fyderek 等［4］的研究則顯示UC 組腸道細(xì)菌總數(shù)較正常對照組高。腸道細(xì)菌在UC 的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用，本研究將UC 患者按照近1 個月內(nèi)是否應(yīng)用抗生素分為抗生素組和非抗生素組，對其糞便中的菌群進行分析，以探討抗生素應(yīng)用對UC 患者腸道菌群失調(diào)發(fā)生的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011 年8 月-2013 年8 月徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院住院的UC 患者60 例，所有患者均符合中華醫(yī)學(xué)會消化病學(xué)分會制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］，根據(jù)臨床癥狀、血清學(xué)檢測、結(jié)腸鏡及病理檢查確診為UC。男34 例，女26 例，年齡21 ～57 歲，平均年齡(41.2 ±8.6)歲。所有患者根據(jù)近1 個月內(nèi)是否使用抗生素分為非抗生素組(20 例)和抗生素組(40 例)(靜脈應(yīng)用或口服抗生素＞3 d)。

1.2 研究方法

1.2.1 糞便采集方法:于患者入院后第2 天，分別取患者自然排出的新鮮糞便1 g。密封干燥的無菌容器保存，常溫下快速送檢并在30 min 內(nèi)完成檢測。

1.2.2 菌群檢測與計數(shù)方法:采用快速直接糞便涂片染色法檢測大便菌群，取患者新鮮糞便用推玻片在清潔玻片上將大便推成薄片，自然干燥后用火焰固定后革蘭染色，在油鏡下計數(shù)細(xì)菌。合計4 個油鏡下各類細(xì)菌的數(shù)量，取其均值并換算成百分比，即代表腸道中各類細(xì)菌所占的比例。對比分析用藥前后患者腸道中的細(xì)菌總數(shù)、革蘭陽性桿菌(Gr+)、革蘭陰性桿菌(Gr-)、革蘭陽性球菌(Gc+)、革蘭陰性球菌(Gc-)的比例變化。

1.2.3 結(jié)果評價標(biāo)準(zhǔn)及方法:參照《腸道菌群糞便圖片檢查圖譜》［6］中糞便涂片診斷腸道菌群的理論和基礎(chǔ)所列出的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn):(1)正常菌群:細(xì)菌總數(shù)及各類細(xì)菌比例正常，桿菌與球菌比例3∶1 或以上。(2)I 度菌群失調(diào):細(xì)菌總數(shù)在正常范圍(500 ～5 000/油鏡視野)、正常低值或略減少(101 ～500/油鏡視野)，革蘭陽性桿菌在正常低值(≤50%)，革蘭陰性桿菌略有增加(45% ～50%)，革蘭陽性球菌在正常高值或增多(13% ～30%)，桿菌與球菌比例為1∶1 ～2∶1。(3)Ⅱ度菌群失調(diào):細(xì)菌總數(shù)明顯減少(11 ～100/油鏡視野)或無明顯改變，革蘭陽性桿菌明顯減少(35% ～40%)，革蘭陰性桿菌明顯增多(＞50%)，革蘭陽性球菌正常值或增多(＞30%)，偶見陽性球菌大量增多(＞50%)等現(xiàn)象，可表現(xiàn)為桿菌與球菌比例倒置(即球菌的總數(shù)超過桿菌，正常時桿菌居多)。(4)Ⅲ度菌群失調(diào):細(xì)菌總數(shù)顯著減少，糞便中原來的菌群大部分被抑制，只有1 種細(xì)菌或真菌占絕對優(yōu)勢。依據(jù)鏡檢結(jié)果，對患者腸道內(nèi)的菌群失調(diào)情況進行分度。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 使用統(tǒng)計分析軟件SPSS 19.0 進行統(tǒng)計分析。計量資料以x±s 表示，計數(shù)資料以“例”表示且組間行χ2檢驗，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P ＜0.01 為差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

60 例患者均完成大便腸道菌群檢測，抗生素組正常菌群5 例，Ⅰ度菌群失調(diào)8 例，Ⅱ度菌群失調(diào)17 例，Ⅲ度菌群失調(diào)10 例。非抗生素組正常菌群13 例，Ⅰ度菌群失調(diào)4 例，Ⅱ度菌群失調(diào)3 例，Ⅲ度菌群失調(diào)0例。抗生素組UC 患者腸道菌群失調(diào)發(fā)生率(87.5%)較非抗生素組(35.0%)明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=17.5，P ＜0.05)。

3 討論

人體的腸道中存在著數(shù)量和種類眾多的細(xì)菌菌落，構(gòu)成了一個復(fù)雜的微生態(tài)系統(tǒng)。由于胃內(nèi)存在胃酸且小腸蠕動較快，胃、十二指腸和空腸內(nèi)細(xì)菌的種類和數(shù)量較少，結(jié)腸內(nèi)的細(xì)菌最多，包括厭氧菌、兼性厭氧菌和需氧菌，其中乳酸桿菌和雙歧桿菌占90%以上。正常情況下，腸道菌群保持著動態(tài)平衡，與人體相互作用起著代謝、營養(yǎng)、屏障保護、免疫調(diào)節(jié)等多種作用。

UC 患者出現(xiàn)腸道菌群失調(diào)，表現(xiàn)為與正常對照組相比，菌群的多樣性降低，病原菌的比例增高。有研究發(fā)現(xiàn)UC 患者腸道的雙歧桿菌和乳桿菌明顯減少，補充這兩種益生菌后患者的癥狀得到明顯改善［7-8］。提示菌群失調(diào)可能是其發(fā)病因素之一。有學(xué)者認(rèn)為腸道細(xì)菌可能是參與UC 始動和持續(xù)的因素，腸道菌群失調(diào)可能是UC 發(fā)病的觸發(fā)點，腸道內(nèi)的致病菌增多，通過直接侵襲腸上皮細(xì)胞、影響腸上皮細(xì)胞的代謝、分泌腸毒素使腸上皮細(xì)胞通透性增強、分泌免疫抑制性蛋白使腸黏膜免疫功能失調(diào)，誘發(fā)了腸道炎癥［9］。UC患者腸道炎癥的改變通常發(fā)生于細(xì)菌含量較多的腸段［10］。UC 患者的腸腔內(nèi)有些細(xì)菌的含量增高，如副結(jié)核分支桿菌、擬桿菌、梭狀芽孢桿菌及脫硫菌等，這些都說明UC 的發(fā)病可能跟腸道細(xì)菌感染有關(guān)，但到目前為止尚未發(fā)現(xiàn)有特異性的細(xì)菌導(dǎo)致UC。

研究顯示活動期UC 患者與正常對照相比，腸道共生菌明顯減少，特別是硬壁菌門和擬桿菌門，而致病菌和條件致病菌明顯增多［11］，但正常對照組近期內(nèi)多無藥物特別是抗生素使用史，而活動期UC 患者多有藥物特別是抗生素使用史，UC 患者特別是初發(fā)型，往往被誤認(rèn)為是菌痢等一般感染性腹瀉，多有使用抗生素史，本研究采用的40 例抗生素組UC 患者中有23例在入院前靜脈或口服抗生素超過1 周。復(fù)發(fā)型的UC 患者也多存在應(yīng)用激素、免疫抑制劑或口服SASP等影響腸道菌群的因素。故UC 患者腸道菌群失調(diào)亦可能與激素使用有關(guān)。上述因素可使得UC 患者發(fā)生腸道菌群失調(diào)，促進了難辨梭狀芽孢桿菌的增殖，UC患者合并難辨梭狀芽孢桿菌感染可使病情惡化，從緩解期進入活動期，甚至合并偽膜性腸炎危及生命。有研究顯示，UC 患者合并難辨梭狀芽孢桿菌感染較單純的UC 或難辨梭狀芽孢桿菌感染的死亡率高4 倍［12］。

本研究顯示，抗生素組UC 患者腸道菌群失調(diào)發(fā)生率(87.5%)較非抗生素組UC 患者(35.0%)明顯增高。故不恰當(dāng)?shù)膽?yīng)用抗生素可加重UC 患者的腸道菌群失調(diào)，使得癥狀加重，病情由緩解期進入到活動期，臨床上發(fā)現(xiàn)患者病情急劇惡化，或治療效果差，對激素不敏感時，應(yīng)考慮到是否存在菌群失調(diào)及合并難辨梭狀芽孢桿菌感染的可能，及時行大便檢測及應(yīng)用萬古霉素或甲硝唑等經(jīng)驗性治療。

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