魏 昕 楊舉倫 (遵義醫(yī)藥高等專科學(xué)校病理教研室，遵義 563000)

乳腺癌是最常見的困擾中老年女性的惡性腫瘤之一，臨床流行病學(xué)研究表明乳腺癌已成為歐美國家發(fā)病率最高的惡性腫瘤。乳腺癌的治療與預(yù)防在于乳腺癌的早期診斷，但是由于其發(fā)病隱匿，早期臨床癥狀不明顯，易被患者和醫(yī)生忽視，確診時(shí)多已為晚期甚至伴有遠(yuǎn)處淋巴轉(zhuǎn)移灶的形成，造成乳腺癌最后保乳手術(shù)率低，低治愈率的結(jié)局［1］。由于乳腺癌部位的特殊性，臨床上乳腺癌治療的主要方式仍為化療或是手術(shù)結(jié)合化療的綜合治療。乳腺癌化療方式目前以蒽環(huán)類化療藥物為主，但是不同患者對化療敏感性不同［2］，為此，本研究利用我院病例資源，探討分析乳腺癌組織中核增殖相關(guān)抗原(Ki-67)及增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá)變化與乳腺癌的關(guān)系及其對乳腺癌化療敏感性的關(guān)系，為臨床乳腺癌的有效化療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對象為我院近年來就診的已經(jīng)病理確診的84 例原發(fā)性乳腺癌患者。年齡為21～63 歲，平均年齡為(41.2 ±1.4)歲;所有患者均經(jīng)過臨床確診，且無其他心血管或神經(jīng)系統(tǒng)等嚴(yán)重疾患，病理診斷及臨床分期參考2010 年中國版乳腺癌NCCN 指南［3］。

1.2 化療方案 所有患者均為首次確診，且無惡性腫瘤病史。所選患者化療CEF 方案共48 例:第1、8 天環(huán)磷酰胺800 mg/m2，第2、3 天吡柔比星60 mg/m2，第4～7 天5-FU 500 mg/m2;CTF 方案36例:第2、3 天吡柔比星30 mg/m2，或第2 天吡柔比星60 mg/m2，其余時(shí)間與CEF 方案一致，所有藥物均為靜脈注射，化療時(shí)間為2～7 個(gè)周期。

1.3 Ki-67 及PCNA 檢測方法［4］采用免疫組化SP 法，實(shí)驗(yàn)步驟按說明書進(jìn)行。經(jīng)抗原修復(fù)，DAB顯色。Ki-67、PCNA 陽性均為核呈棕黃色，計(jì)算陽性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞的百分比，陽性細(xì)胞數(shù)＞25%判為陽性。表達(dá)陽性以下簡稱陽性，記為“+”，表達(dá)陰性以下簡稱陰性，記為“-”。整個(gè)切片未見陽性細(xì)胞為“-”，陽性細(xì)胞數(shù)1%～25%定為“+”，25%～50%為“++”，50%～75%為“+++”，陽性細(xì)胞在75%以上定位“++++”。

1.4 化療敏感性評(píng)定方法 化療敏感性評(píng)定以化療效果決定，而化療效果以原發(fā)灶的變化來衡量，化療前后分別測量腫瘤最大直徑。根據(jù)“實(shí)體瘤治療療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(RECIST)”［5］進(jìn)行評(píng)估，乳腺癌原發(fā)灶臨床緩解分為:臨床檢測手段未發(fā)現(xiàn)腫瘤為完全緩解(CR);腫瘤最長徑之和縮小30%或以上為部分緩解(PR);腫瘤非PR 且非進(jìn)展(PD)則定義為穩(wěn)定(SD)，PD 為腫瘤最長徑之和增加20%，病灶增加前非CR、非PR 且非SD。本研究中以CR+PR 計(jì)算腫瘤化療總有效率。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 研究中所有數(shù)據(jù)均使用SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用±s 表示，進(jìn)行t 檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究患者一般情況 84 例研究患者中浸潤性導(dǎo)管癌58 例，浸潤性小葉癌8 例，單純癌8 例，其他類型10 例;TNM 分期:Ⅰ期33 例，Ⅱ期38 例，Ⅲ、Ⅳ期13 例。所有患者均于手術(shù)治療后行化療治療。

2.2 Ki-67 及PCNA 表達(dá)及其與乳腺癌關(guān)系 通過免疫組化方法檢測到的Ki-67 及PCNA 表達(dá)陽性并結(jié)合患者一般臨床資料，Ki-67 陽性率與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤分型分期呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。而PCNA 陽性率與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移成正相關(guān)，P＜0.05，與腫瘤臨床分型分期無關(guān)，P ＞0.05。具體數(shù)值情況見表1。

表1 Ki-67 及PCNA 表達(dá)及其與乳腺癌的關(guān)系Tab.1 Ki-67 and PCNA and its relationship with breast cancer

表2 Ki-67 及PCNA 單項(xiàng)及聯(lián)合檢測與乳腺癌化療敏感性關(guān)系Tab.2 Ki-67 and PCNA individual and joint detection and breast cancer chemosensitivity relations

2.3 Ki-67 及PCNA 單項(xiàng)及聯(lián)合檢測與乳腺癌化療敏感性關(guān)系 單項(xiàng)檢測時(shí)，Ki-67+總有效率為80.8%明顯高于Ki-67-的56.2%，P＜0.05。PCNA-有效率為72.7%明顯高于PCNA+45.2%，P＜0.05。提示，Ki-67+、PCNA-可為乳腺癌化療敏感性的判定指標(biāo)。聯(lián)合檢測時(shí)，與Ki-67+/PCNA-組相比，Ki-67+/PCNA+有效率無差異，P ＞0.05，而Ki-67-/PCNA+和Ki-67-/PCNA-有效率明顯降低，P＜0.05。見表2。

3 討論

乳腺癌是女性惡性疾病中最常見的一種惡性腫瘤，其好發(fā)年齡為40～60 歲，但隨著流行病學(xué)的深入，目前其發(fā)病年齡越來越年輕化，發(fā)病率也呈增長趨勢，其原因仍未完全明了，可能與某些基因的缺失或過表達(dá)有關(guān)［6］。乳腺癌由于其發(fā)病部位的特殊性，成為很多女性十分擔(dān)憂的原因。一旦發(fā)病，最根本的解決辦法是進(jìn)行乳房切除及淋巴結(jié)清掃這種根治性手術(shù)，很多患者為追求形體的完美，選擇化療治療。因此，尋找一種有效的化療方式，找到能預(yù)測化療敏感性的指標(biāo)成為臨床工作的重難點(diǎn)。

Ki-67 是在細(xì)胞增殖過程中表達(dá)產(chǎn)生的一種核抗原，其產(chǎn)生量與細(xì)胞有絲分裂有關(guān)。Ki-67 在多種腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)，與多種腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移、預(yù)后有關(guān)［7］。本研究中共調(diào)查84 例乳腺癌患者，其Ki-67 檢出陽性例數(shù)為52 例，陽性率為61.9%，并且提示其表達(dá)與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤臨床分期有密切正相關(guān)關(guān)系，在腫瘤分期越嚴(yán)重的患者中，其陽性表達(dá)可能性越大。在腫瘤化療敏感性的實(shí)驗(yàn)中，Ki-67+患者的化療總有效率為80.8%，明顯高于Ki-67-患者的56.2%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。

增殖細(xì)胞核抗原PCNA 是細(xì)胞核內(nèi)的一種酸性蛋白，是真核細(xì)胞DNA 合成所必需的輔酶。PCNA代表著細(xì)胞的增殖活性，活性越高其細(xì)胞間的張力越大，黏附性越低，越容易脫離原發(fā)灶，使腫瘤細(xì)胞向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及擴(kuò)散，被很多專家及學(xué)者認(rèn)為是細(xì)胞增殖狀態(tài)的理想預(yù)后標(biāo)志物［8］。本研究中顯示，乳腺癌中PCNA 表達(dá)陽性例數(shù)為62 例，陽性率為73.8%，研究中還提示PCNA 的表達(dá)與腫瘤臨床分型分期無明顯相關(guān)性，P ＞0.05。但是PCNA 表達(dá)與淋巴轉(zhuǎn)移情況呈正相關(guān)，即淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性的患者中PCNA 表達(dá)多為陽性，這與PCNA 促進(jìn)腫瘤細(xì)胞向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及擴(kuò)散的特性是一致的。近年來國內(nèi)外一些研究表明，PCNA 與多種腫瘤的預(yù)后關(guān)系密切，有關(guān)PCNA 與乳腺癌預(yù)后的關(guān)系研究也有大量的報(bào)道［9］，認(rèn)為PCNA 的表達(dá)與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)及預(yù)后有關(guān)。

在乳腺癌化療敏感性研究中，Ki-67+總有效率為80.8% 明顯高于Ki-67-的56.2%，P＜0.05。PCNA-有效率為72.7%明顯高于PCNA+45.2%，P＜0.05。提示，Ki-67+、PCNA-可為乳腺癌化療敏感性的判定指標(biāo)。聯(lián)合檢測時(shí)，與Ki-67+/PCNA-組相比，Ki-67+/PCNA+有效率無差異，P ＞0.05，而Ki-67-/PCNA+和Ki-67-/PCNA-有效率明顯降低，P＜0.05。這表明Ki-67+及PCNA-可以作為預(yù)測乳腺癌患者化療敏感性的指標(biāo)。

［1］Farooq A，Naveed AK，Azeem Z，et al.Breast and ovarian cancer risk due to prevalence of BRCA1 and BRCA2 variants in Pakistani population:a Pakistani database report［J］.J Oncol，201l，2011:632870.

［2］Liu M，Lawson G，Delos M，et al.Predictive value of the fraction of cancer cells immunolabeled for proliferating cell nuclear antigen or Ki67 in biopsies of head and neck carcinomas to identify lymph node metastasis:comparison with clinical and radiologic examinations［J］.Head Neck，2003，25(4):280-288.

［3］Perkins GL，Slater ED，Sanders GK，et al.Serum tumor markers［J］.Am Fam Physician，2003，68(6):1075-1082.

［4］Sun Z，F(xiàn)u X，Zhang L，et al.A protein chip system for parallel analysis of muti-tumor markers and its application in cancer detection［J］.Anticancer Res，2004，24(2C):1159-1165.

［5］楊學(xué)寧，吳一龍.實(shí)體瘤治療評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)——RECIST［J］.循證醫(yī)學(xué)，2004，4(2):85-90.

［6］唐 平，魏 兵，David G，等.乳腺癌的分子分類及其臨床應(yīng)用［J］.中華病理學(xué)雜志，2009，38(1):13-17.

［7］邱獻(xiàn)華.青年乳腺癌42 例臨床分析［J］.實(shí)用臨床醫(yī)學(xué)，2011，12 (1):64-65.

［8］Zhou B，Yaog DF，Xie F.Biological markers as predictive factors of response to neo-adjuvant taxanes and anthracy cline chemotherapy in breast carcinoma［J］.Chin Mcd J(Engi)，2008，121(5):387-391.

［9］李 明，全細(xì)云.乳腺癌組織分類與ER、PR、CerbB-2、Ki67 表達(dá)的關(guān)系［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志，2009，11(5):15-17.