韓小娟(綜述)，沈山梅(審校)

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬鼓樓臨床醫(yī)學(xué)院，南京 210008； 2.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬鹽城市中醫(yī)院內(nèi)分泌科，江蘇 鹽城 224001；3.南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院內(nèi)分泌科,南京 210008)

蟲(chóng)草屬菌物是一類(lèi)復(fù)型蟲(chóng)生菌物，隸屬麥角菌科、蟲(chóng)草屬[Cordyceps(Fr.) Link][1]。作為傳統(tǒng)名貴中藥，蟲(chóng)草有悠久的藥用史[2]。蟲(chóng)草多糖為其主要效用成分，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、降血糖等活性[3]。糖生物學(xué)進(jìn)展促使蟲(chóng)草多糖成為蟲(chóng)草二次化學(xué)成分研究的重點(diǎn)，顯示出了廣闊的研發(fā)前景。該文就其藥理活性及機(jī)制進(jìn)展綜述如下。

1 免疫調(diào)節(jié)作用

1.1對(duì)免疫器官的影響 蟲(chóng)草多糖能增加免疫器官的重量或者延緩由藥物引起的重量減輕。龔曉健等[4]研究發(fā)現(xiàn)，蟲(chóng)草胞內(nèi)、胞外多糖可明顯增加小鼠脾臟和胸腺重量。蟲(chóng)草菌體多個(gè)層析多糖組分均可拮抗地塞米松引起的免疫抑制，顯著提高脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)[5]。

1.2對(duì)特異性免疫的影響 蟲(chóng)草多糖能使胸腺中不成熟CD4+、CD8+雙陽(yáng)性T細(xì)胞發(fā)育為成熟的單陽(yáng)性細(xì)胞[6]。蟲(chóng)草水煮醇提取液能顯著提高外周血及脾T淋巴細(xì)胞亞群中輔助性T細(xì)胞數(shù)和輔助性/抑制性T細(xì)胞比例[7]。Kim等[8]觀察到，蛹蟲(chóng)草多糖能使鼠骨髓髓系樹(shù)突狀細(xì)胞表面分子CD40、CD54、 CD80、CD86以及主要組織相容性抗原復(fù)合體Ⅱ的表達(dá)峰度提高，促進(jìn)骨髓髓系樹(shù)突狀細(xì)胞成熟，增強(qiáng)抗原呈遞能力。

1.3對(duì)非特異性免疫的影響 蟲(chóng)草多糖對(duì)單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)有廣泛激活作用。形態(tài)上，灌胃蟲(chóng)草制劑后小鼠腹腔及脾巨噬細(xì)胞系統(tǒng)體積增大、胞質(zhì)增多、胞內(nèi)磷酸酶活性增強(qiáng)，呈激發(fā)狀態(tài)[4]。功能上，蟲(chóng)草多糖不同組分均可提高小鼠腹腔巨細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的吞噬百分率和吞噬指數(shù)[5]。體外研究顯示，蟲(chóng)草藥液處理J774巨噬細(xì)胞株后，細(xì)胞免疫活性較無(wú)藥組增強(qiáng)2.58倍[9]。

1.4對(duì)細(xì)胞因子的影響 蟲(chóng)草多糖可介導(dǎo)細(xì)胞因子分泌，調(diào)節(jié)機(jī)體抗體含量[10]。裘軍等[11]發(fā)現(xiàn)，冬蟲(chóng)夏草菌體糖蛋白及其純多糖組分均能顯著增強(qiáng)卵清蛋白刺激的小鼠體內(nèi)血清卵清蛋白特異性IgG、IgG1、IgG2b等免疫球蛋白抗體的水平。相反的研究結(jié)果顯示，蟲(chóng)草多糖具有免疫抑制作用，古尼蟲(chóng)草多個(gè)多糖組分對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能、細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞殺傷功能等細(xì)胞免疫均呈不同程度的抑制效應(yīng)，同時(shí)顯著降低溶血素水平[12]。

2 抗腫瘤作用

2.1直接殺傷腫瘤細(xì)胞 Yoshida等[13]發(fā)現(xiàn)，大團(tuán)囊蟲(chóng)草胞外半乳氨基聚糖蛋白CO-N可與腫瘤細(xì)胞膜結(jié)合抑制葡萄糖跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，發(fā)揮直接細(xì)胞毒作用，抑制荷S180小鼠腫瘤生長(zhǎng)。近期研究顯示，蟲(chóng)草多糖可體外抑制小鼠淋巴瘤細(xì)胞株(YAC-1)增殖，體內(nèi)部分阻止S180細(xì)胞進(jìn)入分裂期抑制S180實(shí)體瘤生長(zhǎng)，提示其抑瘤作用可能與直接抑制腫瘤細(xì)胞分裂有關(guān)[14]。

2.2誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡 Nakamura等[15]發(fā)現(xiàn)，冬蟲(chóng)夏草水提物可誘導(dǎo)B16細(xì)胞凋亡，延長(zhǎng)B16荷瘤小鼠生存期。Lee等[16]報(bào)道，蛹蟲(chóng)草子實(shí)體水萃物能抑制人早幼粒白血病細(xì)胞(HL-60)增殖，激活胱天蛋白酶3、多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶蛋白誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，呈現(xiàn)典型凋亡征。

2.3抑制腫瘤轉(zhuǎn)移 腫瘤血管生成提供腫瘤生長(zhǎng)必需的養(yǎng)料及轉(zhuǎn)移途徑，細(xì)胞外基質(zhì)支架被基質(zhì)金屬蛋白酶降解才能使血管入侵瘤體，抑制基質(zhì)金屬蛋白酶是防止實(shí)體瘤中新生血管生成的有效途徑。Yoo等[17]用蛹蟲(chóng)草子實(shí)體多糖作用于人惡性纖維瘤細(xì)胞株HT1080以及人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞，證實(shí)其有體內(nèi)、外抑制血管形成作用，使HT1080細(xì)胞中基質(zhì)金屬蛋白酶及人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞中與新生血管有關(guān)的β成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因表達(dá)豐度下調(diào)。Zhang等[18]以蟲(chóng)草胞外多糖作用荷B16黑色素瘤小鼠，發(fā)現(xiàn)給藥組鼠肝、肺組織中與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)的Bcl-2、c-Myc、c-Fos等原癌蛋白及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子等血管生成關(guān)鍵因子表達(dá)豐度顯著下降而減少組織中轉(zhuǎn)移灶數(shù)量。

3 調(diào)節(jié)腎臟功能

3.1對(duì)急、慢性腎衰竭的影響 尹鴻萍等[19]報(bào)道，蟲(chóng)草多糖可延緩腺嘌呤及腎部分切除誘發(fā)的慢性腎衰竭，顯示其能降低大鼠血清丙二醛水平，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化，促進(jìn)腎單位修復(fù)再生，預(yù)防慢性腎衰竭的發(fā)生和發(fā)展。另一項(xiàng)研究觀察到，蟲(chóng)草多糖可保護(hù)缺血誘發(fā)的急性腎衰竭大鼠的腎功能，其機(jī)制可能與增加腎血流量、促進(jìn)腎小管修復(fù)再生有關(guān)[20]。

3.2對(duì)腎纖維化的影響 吳冀寧等[21]觀察了蟲(chóng)草多糖對(duì)單側(cè)輸尿管梗阻小鼠腎小管上皮-轉(zhuǎn)化間充質(zhì)的影響，發(fā)現(xiàn)蟲(chóng)草多糖能增加腎小管上皮表型標(biāo)志物表達(dá)、減少腎小管α平滑肌肌動(dòng)蛋白和整合素連接激酶的表達(dá)，提示其可能通過(guò)下調(diào)整合素連接激酶抑制腎小管上皮-轉(zhuǎn)化間充質(zhì)，進(jìn)而減輕腎間質(zhì)纖維化。

4 調(diào)節(jié)肝臟功能

4.1對(duì)肝細(xì)胞的保護(hù)效應(yīng) 鄭賢林等[22]報(bào)道，蠶蛹蟲(chóng)草菌絲體多糖可降低氫化可的松誘導(dǎo)肝損傷小鼠的血清天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶水平，降低丙二醛水平，改善肝竇淤血、肝索排列紊亂等病理征，減輕因脂質(zhì)過(guò)氧化加劇造成的肝細(xì)胞損傷。體外研究發(fā)現(xiàn)，蟲(chóng)草多糖可劑量依賴(lài)性抑制四氯化碳致肝細(xì)胞損傷后轉(zhuǎn)氨酶的異常釋放，提高細(xì)胞存活率[23]。

4.2對(duì)肝纖維化的影響 李風(fēng)華等[24]在二甲基亞硝胺誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型研究中發(fā)現(xiàn)，人工蟲(chóng)草多糖組分C12可明顯減少肝組織羥脯氨酸含量，改善膠原增生和纖維間隔形成發(fā)揮抗肝纖維化作用。顏吉麗等[25]報(bào)道，蟲(chóng)草多糖在0.5～40 mg/L范圍內(nèi)可顯著地抑制大鼠肝星狀細(xì)胞增殖，濃度和時(shí)間依賴(lài)性抑制與肝纖維化密切相關(guān)的核因子κB的活性，下調(diào)腫瘤壞死因子α蛋白及其mRNA的表達(dá)。提示蟲(chóng)草多糖可通過(guò)阻斷核因子κB與腫瘤壞死因子α惡性循環(huán)，抑制肝星狀細(xì)胞激活而抗肝纖維化。

5 血糖調(diào)節(jié)作用

黃志江等[26]首次觀察到,人工蟲(chóng)草菌絲多糖(腹腔注射 50 mg/kg)對(duì)正常小鼠、四氧嘧啶糖尿病小鼠均有顯著的降血糖效應(yīng)，且對(duì)高血糖鼠的降糖作用強(qiáng)于正常鼠。然而，人工蟲(chóng)草多糖(口服 600 mg/kg)對(duì)正常動(dòng)物血糖沒(méi)有明顯影響，但能顯著降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖水平。還發(fā)現(xiàn)該多糖對(duì)高糖誘導(dǎo)胰島素抵抗脂肪細(xì)胞的胰島素刺激葡萄糖攝取的能力有明顯促進(jìn)作用，提示人工蟲(chóng)草多糖降血糖作用可能與促進(jìn)外周組織的葡萄糖代謝有關(guān)[26]。

6 抗氧化與清除自由基作用

蟲(chóng)草屬菌物是抗氧化和清除自由基的天然藥源。Li等[27]利用黃嘌呤氧化酶測(cè)定法、溶血誘導(dǎo)法和脂質(zhì)過(guò)氧化法測(cè)定并證實(shí)天然蟲(chóng)草水提物具有很強(qiáng)的抗氧化能力，分離純化水提物獲得的精制多糖可使抗氧化活性提高10～30倍，進(jìn)一步證實(shí)蟲(chóng)草多糖是抗氧化的主要成分。另一個(gè)研究組從冬蟲(chóng)夏草分離得到相對(duì)分子質(zhì)量為210×103的雜多糖能顯著抑制H2O2誘導(dǎo)腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤源神經(jīng)細(xì)胞株(PC-12)生成丙二醛、降低抗氧化酶(谷胱甘肽過(guò)氧化物酶、丙二醛)活性變化，保護(hù)細(xì)胞免受H2O2損傷[28]。孟兆麗等[29]考察了蛹蟲(chóng)草多糖乙醇沉淀所得三種多糖CMP(cordyceps multi-polysaccharide)40、CMP-60、CMP-80清除自由基的能力，顯示不同組分的抗氧化能力與平均相對(duì)分子質(zhì)量成正比，推斷可能是相對(duì)分子質(zhì)量較大的多糖空間結(jié)構(gòu)更為復(fù)雜，形成更多分支和空腔，有助于對(duì)自由基的清除。

7 延緩衰老作用

李連德等[30]研究了蟲(chóng)草發(fā)酵產(chǎn)物中提取的14種不同多糖對(duì)果蠅平均壽命的影響，發(fā)現(xiàn)不同來(lái)源的多糖對(duì)果蠅壽命均有延長(zhǎng)作用，其中地頂孢霉AT01來(lái)源的多糖效果十分顯著。這一發(fā)現(xiàn)得到王菊鳳等[31]研究的支持，該研究組還發(fā)現(xiàn)低劑量蟲(chóng)草多糖對(duì)高齡段果蠅生命期望值延長(zhǎng)效應(yīng)尤為明顯，提示小劑量蛹蟲(chóng)草多糖對(duì)老齡果蠅的生命力有顯著的促進(jìn)作用。安康等[32]在D-半乳糖誘導(dǎo)衰老模型上測(cè)定小鼠抗氧化能力，發(fā)現(xiàn)喂予蟲(chóng)草的小鼠體質(zhì)量和肝脾指數(shù)均得以恢復(fù)，血漿抗氧化酶活性明顯提高、丙二醛水平明顯降低，提示蟲(chóng)草多糖可通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體免疫功能和清除自由基雙重途徑實(shí)現(xiàn)延緩衰老功效。

8 小 結(jié)

隨著中藥產(chǎn)業(yè)的國(guó)際化，冬蟲(chóng)夏草及其制劑作為藥品或保健品銷(xiāo)售與使用,得到了廣泛認(rèn)同，蟲(chóng)草多糖更以成分確切、活性廣泛而顯示出良好的研發(fā)及應(yīng)用前景，但是暫未明確的分子結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)象限制了其效用機(jī)制的闡釋。相信隨著多糖高級(jí)結(jié)構(gòu)分析和高效提純技術(shù)的發(fā)展，蟲(chóng)草多糖的研究將得以深化，其藥用價(jià)值將得以廣泛、深入地發(fā)掘，進(jìn)而促進(jìn)這一傳統(tǒng)藥物的應(yīng)用。

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