藍永洪，楊 智，黃明媚，齊亞靈，牛海艷△

（海南醫(yī)學院：1.形態(tài)學實驗室；2.附屬醫(yī)院婦產科；3.組織學與胚胎學教研室，?？?71199）

娠高血壓綜合征（pregnancy induced hypertension，PIH），簡稱妊高征，是妊娠期特有的疾病。發(fā)生率中國為9.4%～10.4%，國外為7.0%～12.0%［1］。該病嚴重影響母嬰健康，是孕產婦和圍生兒死亡的主要原因［2-3］，其中，子宮胎盤血流灌注下降是影響胎兒生長發(fā)育的重要因素［4-5］。多普勒超聲顯示，妊高征患者胎兒臍帶血管血流動力學發(fā)生明顯的變化［6-7］，而血流動力學指標與血管的管徑大小和管壁的順應性有密切的關系，管徑的減小和管壁彈性的下降均會導致血流阻力增加，從而影響血流量的供給。國外學者Koech 等［8］研究表明，妊高征與臍帶血管的形態(tài)結構變化有密切的關系。國內有研究［9-10］也證實妊高征患者臍靜脈的中膜厚度、細胞核的數(shù)密度和面密度均增大，平滑肌的含量增多，彈性纖維、膠原纖維數(shù)目增多。但是臍帶有胎盤端和胎兒端，其血管的管徑、管壁、中膜、管壁／管徑比值等形態(tài)結構各不相同［11］。因此，本研究通過收集妊高征患者胎兒臍帶標本，分別取胎兒端、中間段和胎盤端的臍帶標本制成石蠟切片，并進行HE染色，然后在數(shù)碼顯微鏡下攝取圖像，在圖像分析軟件中分別檢測靜脈和動脈的管徑大小、管壁和管壁／管徑比值，并與健康孕婦胎兒臍帶進行對照分析，探討妊高征患者臍帶血管形態(tài)結構的變化，為研究妊高征對血管形態(tài)結構的影響機制及其對胎兒發(fā)育的影響提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 材料 收集海南醫(yī)學院附屬醫(yī)院婦產科2012年1～12月的36例胎兒臍帶標本，排除臍帶繞頸、臍帶真結、臍帶假結及臍帶血管扭曲等標本。健康孕婦胎兒17例，妊高征患者胎兒19例，其中，輕度子癇前期患者9例，重度子癇前期患者6例，子癇患者4例，妊高征的診斷和分類標準參考樂杰主編的《婦產科學》［12］。

1.2 實驗方法

1.2.1 實驗儀器及軟件 生物組織自動脫水機（ZT-12P2，孝感亞光醫(yī)用電子技術有限公司）；冷凍包埋機（YB-6LF，孝感亞光醫(yī)用電子技術有限公司）；手動輪轉切片機（RM2235，Leica，德國）；光學顯微鏡（CX31，Olympus，日本）；專業(yè)數(shù)字攝像頭（DPIXEL200，廣州市泰柯計算機有限公司）；Image-Pro Plus 6.0 圖像分析軟件（Media Cybernetics，美國）。

1.2.2 切片制備、圖像采集及測試 分別取胎盤端、胎兒端和中間段的臍帶組織進行固定、脫水、包埋，制成4μm的石蠟切片，常規(guī)HE 染色，中性樹膠封片。在安裝外置式攝像頭的光學顯微鏡物鏡下拍攝臍帶靜脈和動脈的圖像，并保存于計算機待測。采用Image-Pro Plus 圖像分析軟件分別測試不同段臍帶靜脈和動脈的血管管徑和管壁厚度，并計算管壁／管徑的比值。

1.3 統(tǒng)計學處理 應用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析，計量資料用±s表示。采用單因素方差分析（ONE-WAY ANOVA）及基于此的組間多重比較方法（SNK法）比較不同組間的形態(tài)結構參數(shù)，上述分析均采用雙側檢驗，檢驗水平α＝0.05，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 一般情況比較 健康孕婦17例，年齡23～37歲，孕周37～41 周；妊高征患者19例，年齡22～44 歲，孕周32～39 周。與健康孕婦相比，妊高征患者的血壓升高，孕周下降，胎兒體質量減輕（P＜0.05），而年齡、臍帶長度和胎盤質量差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

2.2 各組孕婦不同節(jié)段臍帶血管形態(tài)結構比較 從胎盤端到胎兒端，臍帶靜脈和動脈管徑、管壁／管徑比值逐漸減小、而管壁厚度逐漸增大（P＜0.05）。與健康孕婦相比，妊高征患者胎兒的臍帶靜脈和動脈管徑、管壁／管徑比值明顯減小，管壁厚度明顯增大，并隨病情嚴重程度逐步加劇（P＜0.05）。

表1 健康孕婦和妊高征患者的一般情況比較（±s）

表1 健康孕婦和妊高征患者的一般情況比較（±s）

組別 n年齡（歲） 孕周（周） 收縮壓（mm Hg）舒張壓（mm Hg）臍帶長度（cm）胎兒體質量（g）胎盤質量（g）±8.53089.1±560.7524.1±101.1輕度子癇前期患者 932.3±5.636.6±2.3151.9±17.587.8±11.853.7±11.32351.7±605.5507.9±108.0重度子癇前期患者 634.5±7.936.3±2.4165.2±4.2100.0±7.050.5±9.12250.0±867.8411.7±145.1子癇患者 436.5±1.335.3±1.7192.0±9.8112.0±25.851.0±14.02185.0±390.6408.8±64.3 P健康孕婦 1732.0±4.338.7±1.0113.9±8.672.5±3.950.40.3910.0020.0010.0010.8720.0050.082

表2 不同段臍帶靜脈形態(tài)結構比較（±s）

表2 不同段臍帶靜脈形態(tài)結構比較（±s）

＊：P＜0.05，與健康孕婦比較；＃：P＜0.05，與輕度子癇前期患者比較；▲：P＜0.05，與胎兒端比較；▼：P＜0.05，與中間段比較。

組別 n 胎兒端 中間段 胎盤段P管徑（μm）健康孕婦 17611.84±169.76748.10±124.10▲ 837.98±103.63▲▼ 0.001輕度子癇前期患者 9505.66±100.83＊ 622.28±100.04＊▲ 654.13±121.18＊▲▼ 0.019重度子癇前期患者 6405.05±120.65＊＃ 528.70±162.92＊?！?637.23±109.53＊?！?0.028子癇患者 4367.67±57.36＊＃ 493.88±98.56＊?！?561.36±105.70＊?！?0.038 P 0.0040.0010.001管壁（μm）健康孕婦 17633.26±79.49555.51±105.01▲ 518.62±113.25▲▼ 0.001輕度子癇前期患者 9803.45±54.80＊ 693.66±91.31＊▲ 652.89±69.53＊▲▼ 0.001重度子癇前期患者 6706.62±107.58＊＃ 558.23±122.89＊?！?499.47±113.14＊＃▲▼ 0.019子癇患者 4703.88±99.11＊＃ 611.69±83.90＊?！?511.01±87.17＊＃▲▼ 0.043 P 0.0010.0180.012管壁／管徑健康孕婦 171.12±0.380.76±0.15▲ 0.63±0.17▲▼ 0.001輕度子癇前期患者 91.64±0.29＊ 1.14±0.24＊▲ 1.02±0.16＊▲▼ 0.001重度子癇前期患者 61.92±0.80＊＃ 1.16±0.47＊?！?0.79±0.14＊?！?0.008子癇患者 41.98±0.52＊＃ 1.29±0.36＊＃▲ 0.94±0.25＊?！?0.014 P 0.0010.0010.001

表3 不同節(jié)段臍帶動脈形態(tài)結構比較

3 討 論

3.1 臨床資料顯示，與健康孕婦相比，妊高征患者的年齡增大，孕周縮短，血壓升高，胎兒體質量和胎盤質量減輕，說明妊高征對妊娠會產生不良的影響，需要進行相應的臨床處理。但是統(tǒng)計分析顯示，2 組孕婦血壓、胎兒體質量和孕周差異有統(tǒng)計學意義，而年齡、臍帶長度和胎盤質量差異無統(tǒng)計學意義，其原因可能是病例數(shù)較少，需擴大病例數(shù)，作進一步的研究分析。

3.2 臍帶是連接胚胎和胎盤間的索狀結構，臍帶血管是胎兒的營養(yǎng)物質和代謝產物的傳輸通道，其形態(tài)結構的變化會改變其生理功能。本研究結果顯示，從胎盤端到胎兒端，無論是臍帶靜脈還是臍動脈，其管徑和管壁／管徑比值逐漸減小、而管壁厚度逐漸增大，說明臍帶胎兒端是控制血流量主要部位，其血流量可影響胎兒的生長發(fā)育。

3.3 張彤等［13］采用不同的壓力下體外培養(yǎng)的人臍靜脈內皮細胞，并借助掃描電鏡和光鏡觀察臍靜脈內皮細胞的形態(tài)和結構變化，結果顯示：隨著壓力的增高，內皮細胞排列紊亂，輪廓不清，細胞內的吞噬溶酶體明顯增多，同時壓力刺激可導致血管平滑肌細胞增生、肥大，細胞外基質增生，以至于血管重構［14］，而血管壁細胞外基質的增多和血管壁中膜平滑肌層的增厚是妊高征的一個特征。妊高征患者臍靜脈壁膠原纖維等細胞外基質的增多一方面使臍靜脈壁明顯增厚、變硬，導致彈性下降，順應性差，血流阻力加大；另一方面管壁增厚又可增加其抗高壓和耐牽拉的強度，管徑也隨之擴大，故可承受增高的壓力負荷。所以，為了克服血管阻力的增加和將胎盤內臍靜脈血輸送給胎兒，勢必要增加臍靜脈壁的收縮力，而導致臍靜脈壁中膜平滑肌呈代償性肥大、增生。本研究結果顯示，與健康孕婦相比，妊高征患者胎兒的臍帶靜脈和動脈管徑和管壁／管徑比值明顯減小，而管壁厚度明顯增大，并隨病情的嚴重程度逐步加劇。其中臍動脈的管徑、管壁厚度和管壁／管徑比值變化幅度約為20%，而臍靜脈的變化幅度約為30%；胎盤端臍帶血管的變化幅度約為20%，而胎兒端的變化幅度約為30%；說明妊高征和臍帶血管形態(tài)結構變化關系密切，其中臍靜脈的形態(tài)變化大于臍動脈，以胎兒端更為顯著。

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