王爽 齊川 李滿元 趙勁松

遼寧省錦州市婦嬰醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧錦州121000

2011—2013年錦州市婦嬰醫(yī)院鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥性分析

王爽 齊川 李滿元 趙勁松

遼寧省錦州市婦嬰醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧錦州121000

目的研究2011—2013年鮑曼不動(dòng)桿菌的檢出率及耐藥率的動(dòng)態(tài)變化，為臨床治療提供依據(jù)。方法統(tǒng)計(jì)2011年1月—2013年10月遼寧省錦州市婦嬰醫(yī)院送檢標(biāo)本中鮑曼不動(dòng)桿菌檢出率、對(duì)抗生素的敏感性，細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)使用的VITEK2全自動(dòng)微生物分析儀進(jìn)行分析。結(jié)果3年來分離出鮑曼不動(dòng)桿菌共計(jì)123株。主要來源于痰標(biāo)本，占89%。連續(xù)3年監(jiān)測中，鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)不同抗生素均有不同程度的耐藥，對(duì)青霉素類和一二代頭孢全部耐藥，對(duì)其他抗生素的耐藥性也逐年增加，其中耐藥性上升最明顯的是亞胺培南，敏感率由2011年的91.5%下降到2013年的76.5%。其中敏感性最高的是阿米卡星，2013年阿米卡星敏感率是82.4%。結(jié)論鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥性逐年增加，多重耐藥菌株逐年增多，甚至出現(xiàn)全部耐藥的菌株。鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥性進(jìn)行連續(xù)監(jiān)測，注意抗生素使用的合理性。

耐藥性；鮑曼不動(dòng)桿菌；動(dòng)態(tài)監(jiān)測

鮑曼不動(dòng)桿菌是一種革蘭氏陰性桿菌，屬于非發(fā)酵菌，分布于自然界中，是人類呼吸道、消化道、皮膚等的正常菌。隨著醫(yī)院感染的增加和大量廣譜抗生素的應(yīng)用，鮑曼不動(dòng)桿菌成為主要的院內(nèi)感染的條件致病菌之一[1]。這種細(xì)菌可引起多個(gè)部位感染，包括尿道炎、菌血癥、腎炎、腦膜炎和傷口感染等[2]。近年來鮑曼不動(dòng)桿菌在臨床上的感染不斷增加，并且耐藥性逐年嚴(yán)重，引起臨床的高度重視[3]。

為了解該院鮑曼不動(dòng)桿菌的檢出率和耐藥性情況，預(yù)防并控制該院鮑曼不動(dòng)桿菌的感染，對(duì)該院2011年1月—2013年10月臨床各科室送檢標(biāo)本分離出的鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行回顧調(diào)查，其統(tǒng)計(jì)與分析結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

錦州市婦嬰醫(yī)院于2011年1月—2013年10月臨床各科室住院患者送檢標(biāo)本，包括痰、咽拭子，尿液，血液等標(biāo)本。其中痰標(biāo)本分離78株，咽拭子分離37株，尿液標(biāo)本分離6株，血液分離1株，膿液分離1株，共計(jì)分離出鮑曼不動(dòng)桿菌123株。

1.2 主要耗材

①血平板、麥康凱分離培養(yǎng)基；②無菌試管、一次性無菌平皿、一次性無菌吸頭等；③革蘭陰性菌鑒定及藥敏反應(yīng)板卡：珠海美華。

1.3 主要儀器設(shè)備

①自動(dòng)微生物分析儀：珠海美華；②全自動(dòng)血培養(yǎng)儀器：法國生物梅里埃公司,BACT/ALERT 3D；③二氧化碳培養(yǎng)箱:日本三洋公司，CO2INCUBATOR；④生物安全柜：中國海爾公司，HR40-ⅡA2。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 細(xì)菌鑒定血平板，麥康凱平板生長，革蘭氏染色陰性，雙糖鐵實(shí)驗(yàn)為非發(fā)酵型，氧化酶實(shí)驗(yàn)陰性的細(xì)菌[1]。采珠海美華醫(yī)療科技有限公司非發(fā)酵菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)測試板進(jìn)行鑒定。菌懸液制備：挑取純培養(yǎng)單個(gè)菌落于稀釋液瓶內(nèi)壁研磨，呈細(xì)菌懸液0.5麥?zhǔn)蠁挝?。連續(xù)移液器吸取該菌液加入測試板A1-A12孔，B1-B12孔，每孔100μL。在A1-A7孔分別滴加無菌石蠟油2滴。35℃孵育18～24 h后，判讀結(jié)果。先于A11孔（IND）滴加靛基質(zhì)試劑兩滴，再于A10孔（NIT）滴加硝酸鹽還原試劑A、B各一滴，美華公司MA120鑒定系統(tǒng)判讀結(jié)果，操作嚴(yán)格按照儀器使用說明書操作。

1.4.2 細(xì)菌藥敏實(shí)驗(yàn)采用美華非發(fā)酵菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)測試板取M-H肉湯培養(yǎng)基1瓶，滴加無菌藥敏顯色液一滴。吸取菌懸液50 μL，加至M-H肉湯培養(yǎng)基內(nèi)混勻，繼續(xù)加入測試板的其余各孔（所有的藥敏孔及生長對(duì)照孔C+及6.5%NaCl），每孔100 μL。撕開不干膠的紙貼于鑒定板，35℃孵育18～24 h后。美華公司MA120鑒定系統(tǒng)判讀結(jié)果，操作嚴(yán)格按照儀器使用說明書操作，判讀MIC值。

1.4.3 指控菌株大腸埃希菌ACTT25922，銅綠假單胞菌ACTT25923，金黃色葡萄球菌ACTT25923。

1.4.4 數(shù)據(jù)分析藥敏試驗(yàn)結(jié)果按照CLSI（2012）標(biāo)準(zhǔn)判定[2]，耐藥（R）、中介（I）和敏感（S），中介的結(jié)果歸入耐藥進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

所有數(shù)據(jù)均采用WHONET5.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。計(jì)數(shù)資料用百分率表示。

2 結(jié)果

2.1 鮑曼不動(dòng)桿菌分離率

2011年1月—2013年10月3年中該院住院患者各類標(biāo)本中分離的鮑曼不動(dòng)桿菌分別為25例、41例、57例。分離率分別為3.5%、4.7%、7.0%。其中痰標(biāo)本和咽拭子分離率93.4%。分離最多科室是重癥監(jiān)護(hù)室,占56%。

2.2 鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥情況

2011年1月—2013年10月該院檢出鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)常見抗菌藥物耐藥情況見表1。

表1 2011—2013年鮑曼不動(dòng)桿菌敏感率（%）

3 討論

鮑曼不動(dòng)桿菌是一種非發(fā)酵的革蘭陰性細(xì)菌，可以廣泛存在于自然界中，它是一種條件致病菌，近來院內(nèi)感染中鮑曼不動(dòng)桿菌呈上升趨勢，已經(jīng)成為醫(yī)院感染的主要致病菌之一，其檢出率在非發(fā)酵菌中僅次于銅綠假單胞菌。鮑曼不動(dòng)桿菌可引起呼吸系統(tǒng)感染、泌尿系統(tǒng)感染和傷口感染等[3]。鮑曼不動(dòng)桿菌的感染與抗生素的使用、機(jī)械通氣、介導(dǎo)性導(dǎo)管滯留天數(shù)、ICU住院天數(shù)、營養(yǎng)過度等因素有關(guān)[4]。

該院送檢標(biāo)本統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，在近3年的時(shí)間內(nèi)，該院鮑曼不動(dòng)桿菌分離例數(shù)和分離率逐年增高，這與該院治療和檢驗(yàn)設(shè)備不斷先進(jìn)、來該院就診的患者逐年增加，并且重癥搶救患者比率逐年增多有關(guān)。文獻(xiàn)報(bào)道[5]重癥監(jiān)護(hù)室鮑曼不動(dòng)桿菌痰標(biāo)本分離率45%,也跟許多患者從外地轉(zhuǎn)診過來有關(guān)。

該組藥敏數(shù)據(jù)顯示，從2011年1月—2013年10月該院檢出鮑曼不動(dòng)桿菌的絕大部分抗菌藥物耐藥性呈逐年升高趨勢，其中以亞胺培南和第三代頭孢最為明顯，亞胺培南耐藥率從2011年的8.5%升高到2013年的23.5%，頭孢曲松的耐藥率也從2011年的49.8%升高到92.8%。全國14所教學(xué)醫(yī)院藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示多重耐藥(MDR)及泛耐藥(PDR)鮑曼不動(dòng)桿菌分別達(dá)55.0%(2 720/4 949)和21.4%(1 058/4 949)。2010年鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥率與往年相比,呈上升趨勢,尤以對(duì)頭孢哌酮-舒巴坦、碳青霉烯類抗生素耐藥率升高顯著[6]。這可能與近年來碳青霉烯類藥物和第三代頭孢的廣泛應(yīng)用有關(guān)，細(xì)菌耐藥性的增加與使用抗菌藥物的劑量、頻率和療程有著密切關(guān)系，所以對(duì)碳青霉烯類抗生素的應(yīng)用應(yīng)該嚴(yán)格控制，以防耐藥性的進(jìn)一步增加造成更嚴(yán)重的后果。尤其對(duì)社區(qū)抗生素的使用應(yīng)該加強(qiáng)管理和指導(dǎo)工作,避免多重耐藥的產(chǎn)生。該院情況好于全國醫(yī)院耐藥監(jiān)測水平，主要原因還是與患者人群有關(guān)，但如果不加強(qiáng)病原學(xué)鑒定，單憑經(jīng)驗(yàn)用藥會(huì)加劇鮑曼不動(dòng)桿菌的產(chǎn)生。

鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)氨基糖苷類藥物的耐藥性在最近幾年有降低的趨勢，以阿米卡星最為明顯，2013年其對(duì)阿米卡星的敏感率達(dá)到80%以上，這可能與最近幾年該院對(duì)氨基糖苷類藥物應(yīng)用減少有關(guān)。提示臨床經(jīng)驗(yàn)治療鮑曼不動(dòng)桿菌可選擇阿米卡星，嚴(yán)格控制碳青霉烯類適應(yīng)證[7]。

鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥性不斷增加，其耐藥機(jī)制也非常復(fù)雜，并且呈多重耐藥現(xiàn)象。多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌情況比較嚴(yán)重,其對(duì)氨基糖苷類藥物耐藥與氨基糖苷類耐藥基因的存在密切相關(guān)[8]。未來對(duì)耐藥基因檢測能夠發(fā)現(xiàn)鮑曼不動(dòng)桿菌真正耐藥原因,并利用基因技術(shù)改變其生物特點(diǎn)，減少多重耐藥出現(xiàn)。多重PCR耐藥基因檢測能夠快速，準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)該地區(qū)的泛耐藥情況。及時(shí)為臨床提供可靠的數(shù)據(jù)。

綜上所述，該院鮑曼不動(dòng)桿菌的感染率以及耐藥率不斷上升，多重耐藥菌株的檢出率不斷增加，應(yīng)該引起足夠重視以盡量減少院內(nèi)感染的發(fā)生，因此應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格執(zhí)行隔離消毒制度，對(duì)感染鮑曼不動(dòng)桿菌的患者應(yīng)該進(jìn)行規(guī)范的監(jiān)控[9]。臨床醫(yī)生應(yīng)與微生物實(shí)驗(yàn)室密切合作，病情嚴(yán)重、住院時(shí)間長、濫用抗菌藥物和多種接觸性操作易導(dǎo)致PDRAb醫(yī)院感染性肺炎發(fā)生。加強(qiáng)無菌管理和合理使用抗菌藥物是預(yù)防和控制PDRAb感染發(fā)生和蔓延的關(guān)鍵[10-11]。對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)和耐藥機(jī)制分析，根據(jù)報(bào)告合理用藥，以盡量減少鮑曼不動(dòng)桿菌的傳播和流行。

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Analysis of drug resistance of acinetobacter baumanii from 2011 to 2013

WANG Shuang QI Chuan LI Manyuan ZHAO Jinsong
Laboratory of Jinzhou Maternal and Infants'Hospital of Liaoning Province，Liaoning 121000,China

ObjectiveTo investigate the detection rate,and dynamic changes of drug resistance of acinetobacter baumannii from 2011 to 2013,in order to provide evidence for clinical therapy.MethodsWe gathered samples from Women and Children's Hospital of jinzhou and analyzed the data of the detection rate and drug resistance of the acinetobacter baumannii.Identification of bacteria and drug sensitive test were analysed by VITEK2 Automatic microbial analyzer.ResultsFor 3 years we have isolated 123 strains of acinetobacter baumannii,The target bacteria were mainly from sputum specimens,accounting for 89%.We also found that there was varying degrees of tolerance for acinetobacter baumanii to different antibiotics after monitoring for three consecutive years.It has become totally tolerated to penicillins and generation I/II cephalosporin and its tolerance to other antibiotics increases year by year The tolerance to imipenem increased most obviously and its sensibility has decreased from 91.5%in 2009 to 76.5% in 2013.And amikacin is the most sensitive with a sensibility of 82.4%in 2013.ConclusionThe tolerance of acinetobacter baumanii increased year by year and multidrug resistant bacteria strains also increased as time was coming and even it appeared all drug-resistant strains.But at the same time rational use of antibiotics should be considered carefully.

Drug resistance;Acinetobacter baumanii;Dynamic monitoring

R4

A

1672-5654（2014）12（a）-0005-03

2014-09-08）

王爽(1978-)，女,遼寧錦州市人，本科，主管檢驗(yàn)師，研究方向:臨床檢驗(yàn)診斷。

趙勁松（1970-），男，滿族，遼寧錦州人，研究生，主任檢驗(yàn)師，研究方向：臨床檢驗(yàn)診斷。