江秀娟梁華倫陳燕霞陳 康

（1廣州市海珠區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所，廣州，510250；2廣東省中醫(yī)院，廣州，510515；3廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣州，510006）

小駁骨紅外光譜的初步研究

江秀娟1梁華倫2陳燕霞3陳 康3

（1廣州市海珠區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所，廣州，510250；2廣東省中醫(yī)院，廣州，510515；3廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣州，510006）

目的：建立小駁骨紅外光譜，為其質(zhì)量控制提供參考。方法：采用傅里葉紅外光譜法對12批小駁骨進(jìn)行檢測，并以其共有模式為標(biāo)準(zhǔn)圖譜檢測各樣品的相似度。結(jié)果：建立了小駁骨紅外共有特征圖譜，12批樣品相似度在0.9739～0.9965范圍內(nèi)。結(jié)論：該法重復(fù)性和穩(wěn)定性良好，具有簡便、快捷、靈敏的特點(diǎn)，可以作為小駁骨定性檢測方法。

小駁骨；紅外光譜

小駁骨為雙子葉植物爵床科小駁骨屬植物小駁骨Gendarussa vulgaris Nees.的干燥地上部分，全年均可采收，又稱裹籬樵、接骨草、小駁骨（《南寧市藥物志》）、駁骨消、小接骨（《廣西藥用植物名錄》）等，廣泛分布于我國廣東、廣西、海南等省[1]，具有祛瘀止痛，續(xù)筋接骨等功效，主要用于跌打損傷、筋傷骨折、風(fēng)濕骨痛、血瘀經(jīng)閉、產(chǎn)后腹痛[2]。小駁骨中主要含有黃酮類、揮發(fā)油[3]、無機(jī)元素[4]以及其他成分[5]。小駁骨的紅外光譜尚未有相關(guān)報(bào)道，本研究對小駁骨的紅外光譜進(jìn)行研究，以期為小駁骨的內(nèi)在質(zhì)量控制提供參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器 傅立葉變換紅外光譜儀（Avatar 330，美國NICOLET），DTGS檢測器（氘代硫酸三甘肽溴化鉀檢測器），HF－2紅外壓片模具；操作系統(tǒng)OMNIC Ver7.3軟件。壓片機(jī)（FW－4A型，天津天光光學(xué)儀器有限公司）；十萬分之一電子分析天平（XS225A，瑞士Precisa）；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（DHG－9053A型，上海精宏）；高速多功能粉碎機(jī)（TPSP－200型，浙江省永康市紅太陽機(jī)電有限公司）；瑪瑙研缽。

1.2 試藥 溴化鉀（光譜純，上海國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號：20120629）。

1.3 樣品 收集小駁骨12批，經(jīng)廣東省藥品食品檢驗(yàn)所林惠蓉主任中藥師鑒定該12批皆為爵床科植物小駁骨Gendarussa vulgaris Ness.的地上部分加工切制的飲片。如下表1，均符合《中華人民共和國藥典》2010年版一部小駁骨項(xiàng)下質(zhì)量要求。

表1 藥材來源

2 方法[6－15]

2.1 樣品片的制備 樣品分別粉碎（過9號篩），在105℃干燥至恒重，備用。光譜純KBr在105℃干燥至恒重，備用。取樣品粉末約2 mg，精密稱定，取光譜純KBr約200 mg，精密稱定，在紅外光燈下混合研磨，均勻放入模具內(nèi)，壓強(qiáng)為16Mpa，維持30 s，取出，得到樣品片。

2.2 測定方法 在波數(shù)4 000～400 cm－1范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，以空白KBr片采集背景，扣除H2O和CO2的干擾，分辨率為4 cm－1，掃描32次，即得樣品片的紅外光譜。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 精密度試驗(yàn) 取小駁骨樣品（批號：120601201），按“2.1”方法制備樣品，壓片，按“2.2”方法測定，連續(xù)測定6次，所得圖譜見圖1。從圖中可以看出連續(xù)測定6次所得到的紅外光譜圖基本一致。用Matlab7.0軟件計(jì)算相似度，測得的紅外圖譜與其所得共有模式圖譜的相似度分別為0.999 6、1.000 0、1.000 0、1.000 0、1.000 0、1.000 0，RSD為0.02%。表明儀器精密度良好，符合指紋圖譜的要求。

圖1 小駁骨飲片紅外光譜圖精密度疊加圖

2.3.2 重復(fù)性試驗(yàn) 取小駁骨樣品（批號：120601201）6份，按“2.1”方法制備樣品，壓片，按“2.2”方法測定，所得圖譜見圖2。用Matlab7.0軟件計(jì)算紅外圖譜的相似度，測得的紅外圖譜與其所得共有模式圖譜的相似度均分別為0.994、0.987 2、0.991 1、0.992 3、0.999 3、0.982 5，RSD為0.67%。表明小駁骨紅外光譜測定方法具有良好的重復(fù)性。

圖2 小駁骨飲片紅外光譜圖重復(fù)性疊加圖

2.3.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取小駁骨樣品（批號：120601201），按“2.1”方法制備樣品，壓片，放入干燥器內(nèi)保存，分別放置0、1、2、3、5、6、8、10、12、24 h后，按“2.2”方法測定，所得圖譜見圖3。用Matlab7.0軟件計(jì)算紅外圖譜的相似度，測得的紅外圖譜與其所得共有模式圖譜的相似度分別為0.997 8、0.998 3、0.999 6、0.999 7、0.999 7、0.950 7、0.949 6、0.949 1、0.939 7、0.939 9、0.940 1，RSD為2.95%。表明小駁骨樣品片在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

圖3 小駁骨飲片紅外光譜圖穩(wěn)定性疊加圖

2.4 樣品紅外光譜的測定 取12批小駁骨樣品，分別按“2.1”方法制備樣品，壓片，按“2.2”方法測定，每個樣品測定3次，采集得到的光譜作自動基線校正，作13點(diǎn)平滑以降低噪聲干擾，并縱坐標(biāo)歸一化至1.0，將3次測得的光譜經(jīng)加和取平均處理后得到各批小駁骨的紅外光譜。

3 結(jié)果

3.1 小駁骨飲片紅外指紋圖譜構(gòu)建 以波數(shù)（cm－1）為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，小駁骨樣品紅外光譜疊加圖見圖4。從圖中可以看出，12批小駁骨的紅外光譜大體一致，用Matlab7.0軟件計(jì)算其相似度，12批小駁骨樣品紅外光譜與共有模式圖譜的相關(guān)系數(shù)（中位數(shù)）分別為0.993 2、0.973 9、0.992 2、0.996 5、0.992 9、0.989 4、0.993 5、0.993 6、0.994 8、0.995 6、0.995 6、0.990 8。小駁骨紅外光譜的吸收峰主要集中在波數(shù)4 000～400 cm－1。

圖4 12批小駁骨飲片紅外光譜圖

3.2 各批小駁骨樣品的主要吸收峰 由表2可知，12批小駁骨紅外光譜主要峰吸收中存在10個共有峰，分別為3 400 cm－1、2 924 cm－1、1 642 cm－1、1 426 cm－1、1 378 cm－1、1 324 cm－1、1 242 cm－1、1 152 cm－1、1 051 cm－1、769 cm－1。

3.3 共有峰的歸屬 見圖5。

圖5 12批小駁骨飲片紅外光譜生成的共有模式圖譜

表2 小駁骨飲片共有峰的歸屬

表3 12批小駁骨飲片的主要吸收峰

圖6 12批小駁骨飲片的聚類分析圖

3.4 聚類分析 應(yīng)用SPSS 17.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析軟件，對12批小駁骨紅外光譜進(jìn)行聚類分析，選用組間對比法進(jìn)行聚類分析，利用歐式距離作為樣品的測度，聚類分析結(jié)果圖6所示。從結(jié)果可以看出，以紅色直線為距離，12個樣品可以分成5類，3、8、1、7、4、5、9號樣品為一類；11、12號樣品為一類；2號樣品為一類；10號樣品為一類；6號樣品為一類。

4 討論

1）由于紅外光譜法的取樣量少，藥材與溴化鉀混合比例大（1∶100），為保證取樣的代表性及與溴化鉀混合的均勻性，注意將藥材粉末與溴化鉀在瑪瑙研缽充分研磨混合均勻。并且每個樣品測定3次，然后將各次測得的光譜圖曲線加和取平均作為該樣品數(shù)據(jù)曲線。

2）12批小駁骨的紅外光譜圖大體一致，用Matlab7.0軟件計(jì)算其相似度，12批小駁骨樣品紅外光譜圖與共有模式圖譜的相關(guān)系數(shù)（中位數(shù)）均大于0.97，說明了各批次與共有模式圖譜之間的相關(guān)性很高，從而表明共有模式圖譜可以作為小駁骨紅外光譜鑒別特征之一。

3）小駁骨其所含化學(xué)成分及其組分由于受到各種因素（地域環(huán)境、土壤、氣候、采摘等）的影響會在一些微量組分上存在一定差異。將12批小駁骨樣品紅外光譜數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 17.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析軟件做聚類分析，將小駁骨分為5大類，3、8、1、7、4、5、9號樣品為一類；11、12號樣品為一類；2號樣品為一類；10號樣品為一類；6號樣品為一類。

4）小駁骨有非常相似的化學(xué)成分組成，雖然其所含化學(xué)成分及組分相關(guān)報(bào)道較為少見，但從10個共有峰的歸屬推斷，小駁骨所含主要成分可能為黃酮類、有機(jī)酸類等。

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（2014－02－11收稿 責(zé)任編輯：曹柏）

Study on the Infrared Spectra of Herba Gendrussae

Jiang Xiujuan1，Liang hualun2，Chen Yanxia3，Chen kang3
（1 Guangzhou City，Haizhu District Institute for Food And Drug Control，Guangdong Guangzhou 510250，China；2 Guangdong Province Traditional Chinese Medical Hospital，Guangzhou 510515，China；3 Guangzhou University of Chinese Medicine，Guangzhou 510006，China）

Objective：To setup the infrared spectrum of herba gendrussae，so as to provide reference for its quality control.Methods：The 12 batches of Herba Gendrussae weremeasured by infrared spectroscopy and the common infrared spectrum fingerprints was set up，then their sim ilarities were calculated by compared the common model.Results：The common infrared spectrum fingerprint of Herba Gendrussae was set up，and 12 batches of sample similarity were in the range of 0.9739 to 0.9965.Conclusion：Thismethod is with good repeatability and stability，and it is simple，fast，and sensitive，which can be used as a qualitativemethod for herba gendrussae.

Herba Gendrussae；Infrared spectroscopy

R931.71

A

10.3969/j.issn.1673－7202.2014.07.031

江秀娟（1980—），女，廣東饒平人，碩士學(xué)位，現(xiàn)任廣州市海珠區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所主管中藥師，主要從事藥品檢驗(yàn)工作

陳康（1958—），男，廣東陽江人，碩士生導(dǎo)師，現(xiàn)任廣州中醫(yī)藥大學(xué)教授，長期致力于中藥飲片炮制規(guī)范化及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究