劉 雄 李 闌 李 兵 孟 凡

ABX Pentra DF 120血細(xì)胞分析儀有核紅細(xì)胞報(bào)警提示的可信度評(píng)估

劉 雄①李 闌①李 兵①孟 凡①

目的：評(píng)估ABX Pentra DF 120血細(xì)胞分析儀對(duì)有核紅細(xì)胞(NRBC)提示的可信度。方法：采集血細(xì)胞儀器白細(xì)胞分類欄有NRBC報(bào)警提示的樣本170份及430份無NRBC報(bào)警提示的樣本涂片進(jìn)行鏡檢，并對(duì)其檢測結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果：ABX Pentra DF 120全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀對(duì)NRBC報(bào)警提示的靈敏度為90.7%，特異度為93.2%，陽性預(yù)期值為76.47%，陰性預(yù)期值為96.28%，假陽性率為23.53%。結(jié)論：ABX Pentra DF 120血細(xì)胞分析儀對(duì)NRBC報(bào)警提示具有一定可信度，但其假陽性較高，因而該血細(xì)胞分析儀對(duì)NRBC報(bào)警提示僅可作為一種過篩作用，樣本仍需顯微鏡檢查。

血液分析儀；有核紅細(xì)胞；鏡檢；報(bào)警；可信度

劉雄,男,(1965- ),本科學(xué)歷，主管技師。成都藍(lán)海醫(yī)院檢驗(yàn)科，從事血液學(xué)檢驗(yàn)及形態(tài)學(xué)研究。

[First-author’s address]Department of Laboratory Medicine, Lan Hai Hospital Chengdu, sichuan 610011, China.

幼稚的骨髓紅系細(xì)胞釋放入外周血，導(dǎo)致血液中出現(xiàn)有核紅細(xì)胞(nucleated red blood cell，NRBC)，又稱幼稚紅細(xì)胞。健康成年人外周血中無NRBC，但在出生1周之內(nèi)的嬰幼兒血液中可見少量NRBC[1]。血液中的NRBC大多為中、晚幼紅細(xì)胞或早幼紅細(xì)胞(如紅血病、紅白血病)。外周血中出現(xiàn)NRBC與許多疾病狀態(tài)和不良的預(yù)后相關(guān)，多見于溶血性貧血、急性失血性休克、嚴(yán)重的細(xì)胞組織缺氧、急性白血病、慢性白血病、淋巴瘤患者、髓外造血以及骨髓纖維化患者等諸多疾病[2]。故外周血液中NRBC對(duì)于諸多疾病的診斷與鑒別診斷有著非常重要的意義[3]。國內(nèi)外血液學(xué)專家委員會(huì)提出，當(dāng)血液分析儀提示出現(xiàn)有核紅細(xì)胞時(shí)，為了避免有核紅細(xì)胞的干擾要進(jìn)行顯微鏡鏡檢[4]。本研究通過比較ABXPentra DF 120血細(xì)胞分析儀NRBC異常提示信息和傳統(tǒng)的外周血涂片染色鏡檢的方法對(duì)NRBC的可靠性進(jìn)行評(píng)估。

1 資料與方法

1.1 儀器與試劑

ABX Pentra DF 120血細(xì)胞分析儀及配套進(jìn)口試劑；日本Olympus雙目顯微鏡。瑞氏染液由貝克曼公司提供。

1.2 標(biāo)本的采集

選取成都藍(lán)海醫(yī)院檢驗(yàn)科臨檢室住院患者血常規(guī)樣本共600例，其中經(jīng)ABX Pentra DF 120檢測后有NRBC異常提示的血液樣本170例，未出現(xiàn)異常NRBC提示的樣本430例。

1.3 標(biāo)本的檢測

抽取住院患者靜脈血2 ml于EDTA-K2抗凝管中送檢，在2 h內(nèi)經(jīng)ABX Pentra DF 120血細(xì)胞分析儀分析。儀器依據(jù)外周血中有NRBC的情況給出提示信息，選擇其樣本制備血涂片，瑞氏染色后由經(jīng)過細(xì)胞形態(tài)學(xué)進(jìn)修培訓(xùn)的檢驗(yàn)工作人員嚴(yán)格按檢驗(yàn)操作規(guī)程進(jìn)行顯微鏡檢查；以顯微鏡鏡檢找到NRBC作為金標(biāo)準(zhǔn)，每個(gè)標(biāo)本總共檢查200個(gè)白細(xì)胞，若發(fā)現(xiàn)有核紅細(xì)胞即判斷為真陽性；未找到NRBC為鏡檢陰性，即為假陽性，并以X個(gè)NRBC/100個(gè)WBC表示，同時(shí)將特殊細(xì)胞形態(tài)記錄下來，如小淋巴細(xì)胞、大血小板及紅細(xì)胞碎片等。同時(shí)選擇儀器無NRBC報(bào)警的430例標(biāo)本，同樣用手工制片，經(jīng)瑞氏染色后，以顯微鏡鏡檢未查見NRBC為真陰性，查見NRBC為假陰性，將顯微鏡油鏡檢查結(jié)果和儀器有異常提示NRBC信息進(jìn)行比較，依據(jù)公式計(jì)算靈敏度、特異度及準(zhǔn)確率。靈敏度＝真陽性÷(真陽性+假陰性)；特異度＝真陰性÷(真陰性+假陽性)；準(zhǔn)確率＝(真陽性＋真陰性)÷樣本總數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

(1)用ABX Pentra DF 120血細(xì)胞分析儀檢測600例實(shí)驗(yàn)標(biāo)本，有NRBC提示信息170例，染色鏡檢陽性146例，兩法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=10.28，P＜0.05)，見表1。

表1 兩種方法對(duì)有核紅細(xì)胞檢測結(jié)果比較[%(例)]

假陽性率為23.53%，靈敏度為89.0%，特異度為93.2%，準(zhǔn)確率為90.7%，陽性預(yù)測值為76.47%，陰性預(yù)測值為96.28%。

(2)儀器法與手工鏡檢均檢出NRBC標(biāo)本130例，鏡檢發(fā)現(xiàn)N≤5 RBC/100 WBC為27例，5 RBC/100 WBC＜N≤10 RBC/100 WBC為85例，N＞10 RBC/100 WBC為18例。16例儀器檢查陰性標(biāo)本中，鏡檢發(fā)現(xiàn)N≤5 RBC/100 WBC為11例，5 RBC/100 WBC＜N≤10 RBC/100 WBC為2例，N＞10 RBC/100 WBC有為例。

3 討論

ABX Pentra DF 120血細(xì)胞分析儀運(yùn)用多種技術(shù)聯(lián)合對(duì)血液細(xì)胞進(jìn)行質(zhì)量及數(shù)量的多種參數(shù)分析，其先進(jìn)的鞘流技術(shù)、細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)以及激光散射技術(shù)在很大程度上提高了對(duì)異常細(xì)胞的篩選能力[5]。由雙鞘流通路和嗜堿性粒細(xì)胞通路共同完成，在雙鞘流通路中，結(jié)合細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)，對(duì)不同類型的白細(xì)胞實(shí)施不同程度的染色，從而產(chǎn)生不同的光吸收率，再利用鞘流阻抗法檢測細(xì)胞體積，完成對(duì)嗜中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的檢測。利用嗜堿性通路的差別溶解技術(shù)檢測嗜堿性粒細(xì)胞，提示巨大未成熟細(xì)胞及異型淋巴細(xì)胞和有核紅細(xì)胞[6]。有核紅細(xì)胞因具有細(xì)胞核，不易被溶血素破壞，可被視作白細(xì)胞從而導(dǎo)致白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果偏高，因此檢測NRBC對(duì)保證檢查結(jié)果的準(zhǔn)確可靠性具有十分重要的意義[7]。

本實(shí)驗(yàn)研究對(duì)600例實(shí)驗(yàn)標(biāo)本進(jìn)行儀器檢測，結(jié)果提示NRBC報(bào)警信息的靈敏度為89.0%，特異度為93.2%。儀器有NRBC提示的170例標(biāo)本中130例顯微鏡鏡檢陽性，符合率為76.47%，一定的假陽性率和較高的陰性預(yù)期值(96.28%)，表明儀器有效地避免了假陰性的發(fā)生。130例真陽性樣本中，嬰幼兒患者占57例，血液病患者占14例，其他病種患者占59例。在儀器無NRBC提示的430例標(biāo)本中，顯微鏡發(fā)現(xiàn)有NRBC16例，并且N≤5 RBC/100 WBC有11例，造成兩種方法結(jié)果之間有差別可能是NRBC低含量的樣本，儀器漏檢的NRBC為嗜堿性，因其細(xì)胞漿著色偏藍(lán)，表明該細(xì)胞漿中核酸含量較高，因而在白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖可能在淋巴細(xì)胞區(qū)域[8]。NRBC是骨髓紅系細(xì)胞造血系統(tǒng)釋放到外周血液中的幼稚紅細(xì)胞，多為未成熟的中、晚、幼紅細(xì)胞。除嬰幼兒外周血中可有少量NRBC外，患有某種疾病的成年人外周血也可出現(xiàn)NRBC。有文獻(xiàn)報(bào)道，心肺疾病、敗血癥、菌血癥、尿毒癥、肝臟疾病以及細(xì)胞因子在治療某些疾病過程中外周血也可能出現(xiàn)NRBC，因而NRBC的檢測對(duì)某些疾病的診治及疾病的監(jiān)測具有十分重要的意義[9-11]。

本研究在進(jìn)行ABX Pentra DF 120血細(xì)胞分析儀對(duì)白細(xì)胞分析時(shí)，儀器對(duì)NRBC報(bào)警信息提示的假陽性率為23.53%，由于樣本中存在巨型血小板及血小板聚集增多，以及血液中可能存在衰老死亡的小淋巴細(xì)胞，因其大小和熒光強(qiáng)度與NRBC裸核接近，導(dǎo)致NRBC錯(cuò)誤信息提示。當(dāng)儀器電壓不穩(wěn)或室內(nèi)溫度等環(huán)境因素超過儀器所允許的范圍，導(dǎo)致結(jié)果發(fā)生嚴(yán)重漂移也易造成假陰性報(bào)警[12]。而顯微鏡檢查是依據(jù)NRBC的細(xì)胞核、胞漿及細(xì)胞核染色質(zhì)形態(tài)特征進(jìn)行人工分析，較儀器更為客觀，但實(shí)驗(yàn)室人員業(yè)務(wù)素質(zhì)的高低，以及血液染片的質(zhì)量又可造成主觀誤差，從而影響了NRBC結(jié)果的準(zhǔn)確性[13]。因此，對(duì)提供的NRBC樣本應(yīng)認(rèn)真對(duì)待，以防漏診和誤診，這樣才能真正提高工作質(zhì)量。

綜上所述，ABX Pentra DF 120血細(xì)胞分析儀具有NRBC報(bào)警提示的功能，具有迅速、簡便等優(yōu)點(diǎn)，陰性預(yù)期值高(96.28%)，可有效地避免假陰性的發(fā)生。陽性預(yù)期值有一定可信度，但其假陽率仍然較高(23.53%)，因而當(dāng)儀器出現(xiàn)NRBC報(bào)警提示時(shí)應(yīng)需進(jìn)行顯微鏡檢查，以提高檢查結(jié)果的準(zhǔn)確率，為臨床疾病的診斷提供更多有價(jià)值的數(shù)據(jù)[14-15]。

[1]葉應(yīng)嫵,五毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:128-133.

[2]李建英.血細(xì)胞分析自動(dòng)計(jì)數(shù)外周血有核紅細(xì)胞的應(yīng)用研究[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2005,28(6):606-608.

[3]邢輝,郭學(xué)霖.血液分析儀避免有核紅細(xì)胞影響血液分析[J].中國誤診學(xué)雜志,2008,8(15):3566-3567.

[4]中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志編緝委員會(huì).全國血液學(xué)復(fù)檢專家小組工作會(huì)議紀(jì)要暨血細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)復(fù)檢規(guī)則釋義[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,30(6):380-382.

[5]李鴻飛,洪巖,邱廣斌.ABX-120血液細(xì)胞分析儀臨床應(yīng)用評(píng)價(jià)[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9(11):1351-1352.

[6]周萍,張洪亞.Pentra 120全自動(dòng)分析儀白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)結(jié)果及散點(diǎn)圖分析[J].南京軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2003,25(4):280-282.

[7]杜海珍,束國防,吳嵐嵐,等.XE 2100血液分析儀測定有核紅細(xì)胞的評(píng)估[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué),2008,36(2):112-114.

[8]何雪岷,黃伏生.XT 1800i血液分析儀有核紅細(xì)胞報(bào)警功能評(píng)價(jià)[J].武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2005,26(5): 671-672.

[9]Wang FS,Itose Y,Tsuji T,et al.Development and clinical application of nucleated red blood cell counting and staging on the automated heamatology analyzer XE 2100TM[J].Clin Lab Heam,2003,25(1):17-23.

[10]余洲海,楊輝,章曉鷹,等.BecKman Coulter LH 750血細(xì)胞分析儀異常細(xì)胞報(bào)警提示功能的評(píng)價(jià)[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2012,33(13):1647-1648.

[11]唐勁光,楊崢.LH血細(xì)胞分析儀檢測有核紅細(xì)胞的準(zhǔn)確性評(píng)價(jià)[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2013,10(7):830-831.

[12]安邦權(quán),凌曉午,張燕,等.ADVA 120型血液分析儀異常報(bào)警參數(shù)及其可靠性分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2006, 21(5):498-500.

[13]陳海生,張勁豐,鄔華坤,等.外周血有核紅細(xì)胞自動(dòng)檢測應(yīng)用研究[J].現(xiàn)代醫(yī)院,2011,11(6):69-70.

[14]強(qiáng)克萍,侯興寧.血細(xì)胞分析儀自動(dòng)計(jì)數(shù)外周血有核紅細(xì)胞的臨床應(yīng)用[J].寧夏醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2007,29(4): 388-389.

[15]馬江濤,王雙,陳衛(wèi).BC-5500與SYSMEX XS-800i血液分析儀性能評(píng)價(jià)[J].航空航天醫(yī)學(xué)雜志,2012, 23(2):133-134.

Evaluation on credibility of system ABX Pentra DF 120 hematology analyze in detection of nucleated red blood cells/

LIU Xiong, LI Lan, LI Bing, et al// China Medical Equipment,2014,11(12):54-56.

Objective:To evaluation the credibility of system ABX Pentra DF 120 Hematology Analyzer in detection of nucleated red blood cells (NRBC).Methods:Collected 170 cases spcimens with abnormal prompt about NRBC in WBC column and 430 cases spcimens without abnormal prompt for smear test and compared.Results:The sensitivity of ABX Pentra DF 120 Hematology Analyzer to NRBC was 90.7%, specificity was 93.2% ,positive predictive value was 76.47%, negative predictive value was 96.28% ,false positive rate was 23.53%.Conclusion:The alarm to NRBC from system ABX Pentra DF 120 Analyzer has a certain credibility, the false positive rate is also higher, so abnormal prompt to NRBC from ABX Pentra DF 120 Hematology Analyzer could be used as an effective screening tool, but also could not completely replace the microscope detection.

Hematology analyzer; Nucleated red blood cells; Microscope test; Warning; Credibility

1672-8270(2014)12-0054-03

R614

A

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2014.12.019

2014-04-10

①成都藍(lán)海醫(yī)院檢驗(yàn)科 四川 成都 610011