劉 鵬

（焦作市第二人民醫(yī)院檢驗科，河南 焦作 454100）

3種血清學檢測方法在梅毒各期應(yīng)用的特點分析

劉 鵬

（焦作市第二人民醫(yī)院檢驗科，河南 焦作 454100）

目的 研究分析3種檢測方法在梅毒各期應(yīng)用的特點。方法 采用TP-ELISA（梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附法）、TRUST（甲苯胺紅不加熱血清凝集實驗）和TPPA（梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗）檢測368例各期梅毒患者的血清。結(jié)果 其中69例一期梅毒患者中：TPELISA方法陽性率96%，TRUST陽性率83%，TPPA陽性率91%；156例二期梅毒患者中：TP-ELISA方法陽性率100%，TRUST陽性率94%，TPPA陽性率98%；63例三期梅毒患者中：TP-ELISA方法陽性率100%，TRUST陽性率20%，TPPA陽性率100%。結(jié)論 在梅毒各期血清學檢測中，應(yīng)該同時檢測特異性抗體（TP-ELISA）和非特異性抗體（TRUST），并用TPPA做確診實驗。

梅毒；梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附法；甲苯胺紅不加熱血清凝集實驗；梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗；梅毒各期

梅毒的發(fā)病機制主要是由梅毒螺旋體侵犯組織器官后而引起的一種慢性的、系統(tǒng)性的性傳播傳染病，患者在受到梅毒螺旋體感染后，體內(nèi)血清中可產(chǎn)生梅毒非特異性抗體和梅毒螺旋體抗原的特異抗體。隨著社會的發(fā)展和環(huán)境的改變，梅毒的感染者持續(xù)增多。而針對梅毒的檢測也成為各個醫(yī)院檢驗科的重要項目。目前，我院檢驗科對于梅毒檢測的常用方法主要是：TP-ELISA（梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附法）、TRUST（甲苯胺紅不加熱血清凝集實驗）和TPPA（梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗）。3種檢測方法在臨床應(yīng)用上都有其不同的價值，而在梅毒各期的檢測中有其相關(guān)性，也有其特殊性。對于檢測方法的合理選用和避免臨床誤診、漏診非常重要的。為此，我院對2013年1月至2014年3月間住院和門診368例各期梅毒患者的血清使用TPELISA、TRUST和TPPA進行了分析。現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：收集我院2013年1月至2014年3月間住院以及門診梅毒患者288例，經(jīng)院皮膚性病科診斷確定：一期梅毒患者69例，二期梅毒患者156例，三期梅毒患者63例。

1.2 方法：采集梅毒患者血清3 mL離心分離后保存使用。使用TPELISA（上海科華）、TRUST（北京萬泰）和TPPA（日本富士瑞）試劑，嚴格按照試劑說明書操作。

2 結(jié) 果

使用TP-ELISA、TRUST和TPPA三種實驗方法檢測288例梅毒患者。其中69例一期梅毒患者中：TP-ELISA方法陽性66例，TRUST陽性57例，TPPA陽性63例；156例二期梅毒患者中：TP-ELISA方法陽性156例，TRUST陽性147例，TPPA陽性153例；63例三期梅毒患者中：TP-ELISA方法陽性63例，TRUST陽性13例，TPPA陽性63例。

3 討 論

梅毒是性傳染疾病，是由于梅毒螺旋體感染人體后所產(chǎn)生的，人體感染梅毒螺旋體后可以產(chǎn)生特異性抗螺旋體抗體和非特異性抗類脂質(zhì)抗體[1]。目前，臨床上把梅毒患者按照病程通常劃分為三期：一期梅毒。即硬下疳，潛伏期2～4周，外生殖器部位發(fā)生暗紅色硬腫塊、淺潰瘍，有軟骨樣硬度，周圍淋巴結(jié)腫大；二期梅毒為梅毒的泛發(fā)期，自硬下疳消失至二期梅毒疹出現(xiàn)前的時期。二期梅毒一般發(fā)生在硬下疳消退后3～4周，相當于感染后9～12周。二期梅毒是梅毒螺旋體經(jīng)淋巴結(jié)進入血行引起全身廣泛性損害。除引起皮膚損害外，尚可侵犯內(nèi)臟及神經(jīng)系統(tǒng)；三期梅毒，發(fā)生在感染后2～3年乃至10年，皮膚為樹膠樣腫，還可涉及骨、關(guān)節(jié)、心、血管，表現(xiàn)為主動脈炎、主動脈瓣閉鎖不全和主動脈瘤等，侵及神經(jīng)為脊髓癆，全身麻痹（麻痹性癡呆）。先天梅毒有早期先天梅毒，相當于后天二期，但較重。晚期先天梅毒與后天相似，但很少發(fā)生心、血管及神經(jīng)病變。主要為實質(zhì)性角膜炎、神經(jīng)性耳聾、哈欽森氏齒（上門齒中央切痕，下小上大，寬厚相等）、佩刀形脛骨等。

人體在被梅毒感染后，在長期病程中， 由于機體的抵抗力和反應(yīng)性的改變，癥狀時而顯發(fā)，時而隱伏[2]。皮膚損害在梅毒活動期中癥狀十分明顯，再結(jié)合血清學測定，對于臨床診斷有很大作用。而在梅毒潛伏期中，臨床診斷往往是依靠血清學的檢測。在梅毒各期的檢測中，特異性抗體和非特異性抗體都有重要的意義。在本次試驗中，TPELISA和TPPA都屬于特異性抗體檢測，TRUST是非特異性抗體檢測。

本次試驗使用3種方法檢測288例梅毒患者的標本，其中69例一期梅毒患者中：TP-ELISA方法陽性率96%，TRUST陽性率83%，TPPA陽性率91%；156例二期梅毒患者中：TP-ELISA方法陽性率100%，TRUST陽性率94%，TPPA陽性率98%；63例三期梅毒患者中：TPELISA方法陽性率100%，TRUST陽性率20%，TPPA陽性率100%。

TP-ELISA法是針對對梅毒患者體內(nèi)梅毒螺旋體抗體的特異性試驗，在實驗室應(yīng)用中對各期梅毒患者均有比較高的敏感性和特異性。由于患者被梅毒螺旋體抗體感染后，即使經(jīng)抗梅毒治療后，此抗體仍然會被檢出，甚至機體會終身攜帶。所以，很多處于潛伏期無癥狀的患者，TRUST無法檢出，TP-ELISA法卻可以檢出。因此，很多醫(yī)院將此方法作為入院患者的梅毒檢測的首選檢測方法。且方法操作簡便，適用于實驗室大批量標本檢測及全自動酶免疫系統(tǒng)的開展。另外，TPELISA法再與TPPA確證實驗方法相比較，靈敏度與特異性上均無顯著差異性。而與TRUST法相比較，則靈敏度要明顯高于。在對I期梅毒和治療后的梅毒患者檢測中，TP-ELISA法均有顯著的檢出率，在避免梅毒血液傳播風險上有重要意義。因此，無論是在梅毒患者篩選，還是梅毒分期檢測中，TP-ELISA法均是實驗室必備的檢測方法。

TRUST法為梅毒非特異性抗體試驗，梅毒非特異性并非梅毒螺旋體所直接產(chǎn)生的抗體，而是人體組織在被梅毒螺旋體所破壞的過程中，間接引起而產(chǎn)生的具有抗體性質(zhì)的反應(yīng)素，梅毒非特異性抗體并非終身攜帶的?；颊弑幻范韭菪w感染后，硬下疳出現(xiàn)2～4周后，非特異性抗體才能被檢出。所以，非特異性抗體出現(xiàn)要晚于特異性抗體。在梅毒各期，三期梅毒和治療后梅毒患者中，非特異性抗體陰性率較高。本次試驗中，三期梅毒患者的TRUST陽性率只有20%。而一期梅毒陽性率83%，二期梅毒陽性率94%，符合有關(guān)報道[3]。另外，由于一些病癥可能導致TRUST假陽性。所以，患者TRUST單獨陽性不一定是被梅毒螺旋體所感染，需要與其他檢測方法相結(jié)合才能判定。

TPPA法（梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗），TPPA是在凝膠顆粒上包被經(jīng)過純化處理的梅毒特異性抗原。在實驗過程中，標本血清中的抗體與凝膠顆粒上的特異性抗原發(fā)生特異性反應(yīng)時，凝膠顆粒就會出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。而且抗體的濃度與其成正相關(guān)。由于此抗體在血清中長期存在，不易轉(zhuǎn)陰，也不會隨著病程變化及治療效果而改變，可終身保留。因此特異性強、敏感性高是TPPA最重要的特點，目前國內(nèi)各實驗室將TPPA法作為梅毒確證實驗。但是由于該方法操作繁瑣，試劑多為進口，價格昂貴，結(jié)果判斷需要進行系列稀釋，因此難以自動化、批量化，無法應(yīng)用于大批標本的檢測。

通過此次試驗表明，少數(shù)一期梅毒患者由于感染梅毒螺旋體的時間較短，抗體還沒產(chǎn)生或產(chǎn)生抗體的濃度較低。在進行血清學檢查時，可能會為陰性。另外，在實驗中，梅毒非特異性抗體在二期的陽性率明顯要高于一期，而三期的陽性率最低。原因可能是和梅毒各期活動水平差異有關(guān)。而在梅毒各期中無論是使用TP-ELISA法或是TRUST法檢測，均會受到患者體內(nèi)一些疾病干擾因素而導致假陽性。因此最好使用TPPA法做進一步確診。

綜上所述，通過此次實驗分析表明，在梅毒血清學檢測中，應(yīng)該同時檢測特異性抗體（TP-ELISA）和非特異性抗體（TRUST），并用TPPA做確診實驗。才能避免誤診和漏診，為臨床診斷和治療提供及時、可靠地依據(jù)。

[1] 陳剛.梅毒血清學試驗中特異性抗體與非特異性抗體檢測的臨床應(yīng)用[J].臨床和實驗醫(yī)學雜志,2008,7(2):59-63.

[2] 宋芳吉.性病圍譜[M].沈陽:遼寧科學技術(shù)出版社,1989.

[3] 郭秀筠,鄭治修,謝文峰,等.酶聯(lián)免疫吸附法檢測梅毒特異性球蛋白C[J].中華醫(yī)學檢驗雜志,1999,22(3):178.

R759.1

B

1671-8194（2014）36-0165-02

10.15912/j.cnki.gocm.2014.36.127