鄧國(guó)生，何 芳，李麗麗

（廣西玉林市婦幼保健院，廣西 玉林537000）

為了探討時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)技術(shù)在唐氏（唐氏綜合征、21－三體綜合征）篩查中的應(yīng)用價(jià)值，使用芬蘭PE公司生產(chǎn)的1420時(shí)間分辨熒光測(cè)定儀Wallac MultiCalc行唐氏篩查，篩查陽性者部分進(jìn)行羊水產(chǎn)前診斷胎兒染色體核型，統(tǒng)計(jì)分析如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象

2012年1月至2012年11月30日玉林市婦幼保健院圍產(chǎn)保健門診及外院接受唐氏篩查孕婦，年齡20－34歲，孕周15－20＋6周單胎，羊水產(chǎn)前診斷羊膜腔穿刺術(shù)孕周18－22＋6周，病人來源于地級(jí)玉林市城郊，以及轄區(qū)陸川、博白、容縣、北流和興業(yè)等縣市區(qū)。

1.2 儀器與試劑

唐氏篩查使用芬蘭PE公司生產(chǎn)1420時(shí)間分辨熒光測(cè)定儀 Wallac MultiCalc、微孔板洗板機(jī)－DELFIA Platewash、自動(dòng)振蕩器－DELFIA Plateshake、hAFP／Free hCGβ二聯(lián)篩查檢測(cè)試劑盒及LifeCycle 3.0產(chǎn)前篩查風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估軟件；產(chǎn)前診斷使用美國(guó)Forma3111CO2培養(yǎng)箱，美國(guó)CHANG MEDIUM○RD和德國(guó)Cytogen培養(yǎng)基。

1.3 唐氏篩查方法

抽取孕婦空腹靜脈血2－3ml，自然凝固后，離心分離血清－20℃冰箱保存，實(shí)驗(yàn)室設(shè)專人1周集中檢測(cè)1次，嚴(yán)格按說明書程序進(jìn)行孕婦血清中hAFP／Free hCGβ濃度檢測(cè)，測(cè)定結(jié)果結(jié)合孕婦年齡、體重、有無糖尿病及吸煙史等參數(shù)，采用公司風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估軟件，將檢測(cè)結(jié)果與相應(yīng)年齡和孕周實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果的中位數(shù)比較，計(jì)算得出中位數(shù)倍數(shù)（MoM值），根據(jù)孕婦信息進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)校正，最后得出風(fēng)險(xiǎn)值，21－三體綜合征高風(fēng)險(xiǎn)切割值為1∶270，≥1∶270為21－三體綜合征高風(fēng)險(xiǎn)。開放性神經(jīng)管畸形正常參考值（AFPMoM＜2.5）。唐氏先天愚型高風(fēng)險(xiǎn)孕婦建議做羊水產(chǎn)前診斷，開放性神經(jīng)管畸形（NTD）高風(fēng)險(xiǎn)孕婦建議B超診斷。對(duì)唐氏先天愚型高風(fēng)險(xiǎn)孕婦進(jìn)行遺傳咨詢，其中511例高風(fēng)險(xiǎn)孕婦接受羊水產(chǎn)前診斷胎兒染色體核型分析。

1.4 羊水產(chǎn)前診斷胎兒染色體核型方法

在B超引導(dǎo)下穿刺針經(jīng)母腹抽取羊水20ml送檢，培養(yǎng)瓶法染色體分析（320條帶），G顯帶。即抽取羊水20ml分2支15ml離心管，1 500rpm離心10分鐘，在生物安全柜無菌操作，棄上清液后分別加入5ml不同廠家培養(yǎng)基用吸管打勻并分別放入2個(gè)培養(yǎng)瓶于2個(gè)獨(dú)立CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，5天后細(xì)胞生長(zhǎng)良好，即可加秋水仙素3小時(shí)收獲、處理、制片及G顯帶。G顯帶分析（320條帶），計(jì)數(shù)20個(gè)中期分裂相，分析5個(gè)核型，異常者加倍分析、計(jì)數(shù)，染色體核型分析按人類細(xì)胞遺傳學(xué)國(guó)際命名體制（ISCN2009）進(jìn)行，染色體多態(tài)應(yīng)結(jié)合C顯帶的方法確定其核型。

2 結(jié)果

2.1 唐氏篩查狀況

唐氏篩查總例數(shù)12937例，檢出高風(fēng)險(xiǎn)孕婦1087例，篩查陽性率8.40%，其中檢出唐氏先天愚型高風(fēng)險(xiǎn)912例，陽性率7.05%；開放性神經(jīng)管畸形（NTD）高風(fēng)險(xiǎn)175例，陽性率1.36%。

2.2 羊水產(chǎn)前診斷胎兒染色體核型狀況

511例唐氏先天愚型高風(fēng)險(xiǎn)孕婦接受羊水產(chǎn)前診斷胎兒染色體檢查，胎兒染色體異常核型31例，檢出率為6.07%，其中，2例唐氏綜合征，胎兒核型為47，XY，＋21和46，XY，der（14；21），＋21；2例羅伯遜易位攜帶者，胎兒核型為45，XX，der（13；14）（q10；q10）；1例平衡易位，胎兒核型為46，XX，t（7；14）（q31；q11）；4例嵌合體，胎兒核型為46，XY，t（4；7）（q35；q22），r（13）[26]／46，XY，r（13）[24]、47，XYY[25]／46，XY[25]、47，XX，＋7[2]／46，XX[51]、47，XY，＋9[2]／46，XY[48]；2例 Y 倒位，胎兒核型為46，X，inv（Y）（p11q11）；20例染色體多態(tài)，胎兒核型為46，X，Yqh＋1例、46，XX，1qh＋1例、46，XX，9qh＋ 2例、46，XX，inv（9）（p11q13）6例、46，XY，inv（9）（p11q13）4例、46，XX，14pss 1例、46，XX，15pstk＋1例、46，XX，21pstk＋ 2例、46，XX，22pstk＋1例、46，XX，22p＋1例。

3 討論

唐氏綜合征是人類常見的常染色體異常疾病，主要的發(fā)病機(jī)制是卵母細(xì)胞減數(shù)分裂不分離，95%的病人受精卵中21號(hào)染色體額外復(fù)制，還有4%的羅伯遜易位和1%的嵌合現(xiàn)象[1]，本調(diào)查表明，2例唐氏綜合征，胎兒核型為47，XY，＋21和46，XY，der（14；21），＋21。張宏紅等[2]報(bào)道，貴州省唐氏綜合征222例患者嵌合型占2.25%、易位型占4.05%、單純型占92.35%，合并其他染色體異常者占1.35%。

唐氏綜合征患兒目前無改變?nèi)旧w異常的有效方法，只能通過篩查找到高風(fēng)險(xiǎn)對(duì)象進(jìn)行產(chǎn)前診斷明確胎兒染色體狀況，對(duì)染色體異常建議終止妊娠達(dá)到減少出生缺陷、提高出生人口素質(zhì)的目的[3]，在我國(guó)，在分娩前對(duì)畸形胎兒進(jìn)行終止妊娠是合法的。產(chǎn)前診斷是一種創(chuàng)傷高風(fēng)險(xiǎn)醫(yī)療行為，存在感染，流產(chǎn)等并發(fā)癥的可能，因此，不能替代篩查對(duì)所有的孕婦進(jìn)行產(chǎn)前診斷。

本調(diào)查表明，采用1420時(shí)間分辨熒光測(cè)定儀Wallac MultiCalc行唐氏篩查，可以評(píng)估胎兒唐氏綜合征患病風(fēng)險(xiǎn)，可有效降低有創(chuàng)產(chǎn)前檢查胎兒染色體。時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)技術(shù)在唐氏篩查的應(yīng)用效果，根據(jù)楊延?xùn)|等[4]報(bào)道，采用時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)技術(shù)在孕中期進(jìn)行唐氏綜合征篩查，共篩查767例，篩查陽性36例，陽性率為4.69%，其中有32例孕婦自愿接受了產(chǎn)前診斷，有4例證實(shí)為唐氏綜合征，有篩查陽性中，有12.50%為唐氏綜合征胎兒。根據(jù)楊延?xùn)|等[5]報(bào)道，孕中期時(shí)間分辨熒光法檢測(cè)血清標(biāo)志物1976例，唐氏綜合征患病高風(fēng)險(xiǎn)94例，高風(fēng)險(xiǎn)率為4.76%。根據(jù)徐聚春等[6]報(bào)道，對(duì)8864例孕婦采用時(shí)間分辨熒光法進(jìn)行唐氏篩查，唐篩陽性430例，陽性率為4.8%，唐篩陽性中行羊水穿刺365例，21－三體綜合征8例，占唐篩陽性的2.2%。根據(jù)王丹等[7]報(bào)道，應(yīng)用時(shí)間分辨熒光免疫法對(duì)3657例孕中期（14～20＋6周）婦女進(jìn)行唐氏篩查，唐篩陽性212例，陽性率為5.80%，其中，68例接受產(chǎn)前診斷，確診唐氏綜合征3例，唐氏綜合征檢出率占唐篩陽性的4.41%。大量文獻(xiàn)顯示，時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)技術(shù)在唐氏篩查中有較好篩查效果，可以評(píng)估胎兒唐氏綜合征患病風(fēng)險(xiǎn)，有效降低有創(chuàng)產(chǎn)前檢查胎兒染色體。

[1]彭 薇，王春枝，何璽玉，等.唐氏綜合征篩查研究進(jìn)展[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志，2012，20（7）：4.

[2]張宏紅，周從容，吳小平，等.貴州省222例唐氏綜合征患者的細(xì)胞遺傳學(xué)分析[J].中國(guó)婦幼保健，2011，26（24）：3766.

[3]羅 艷，符可鵬.唐氏綜合征發(fā)病狀況調(diào)查分析[J].中國(guó)婦幼保健，2009，24（17）：2404.

[4]蔣 瀅，曹 利，向時(shí)慶，等.唐氏綜合征母體血清時(shí)間分辨熒光免疫篩查和產(chǎn)前診斷分析[J].重慶醫(yī)學(xué)，2009，38（1）：70.

[5]楊延冬，王 莉，姜秀清，等.孕中期時(shí)間分辨熒光法檢測(cè)血清標(biāo)志物在產(chǎn)前篩查中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2010，26（14）：2085.

[6]徐聚春，曹 利，胡 華，等.8864例孕婦唐氏綜合征篩查與羊水穿刺結(jié)果分析[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志，2012，20（1）：30.

[7]王 丹，劉 麗，宋朝暉，等.3657例孕中期唐氏篩查及產(chǎn)前診斷的臨床價(jià)值分析[J].中國(guó)產(chǎn)前診斷雜志（電子版），2010，2（3）：17.