趙麗華，施國方，白錫川，邱利佳，李兵，徐森華

（1.湖州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江 湖州 313000；2.吳興區(qū)農(nóng)林發(fā)展局，浙江 湖州 313000；3.蘇州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院，江蘇 蘇州 21500）

湖州地區(qū)野桑蠶對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥抗性調(diào)查

趙麗華1，施國方1，白錫川2，邱利佳2，李兵3，徐森華1

（1.湖州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江 湖州 313000；2.吳興區(qū)農(nóng)林發(fā)展局，浙江 湖州 313000；3.蘇州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院，江蘇 蘇州 21500）

2013年秋調(diào)查了野桑蠶對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥的耐藥性，結(jié)果表明湖州地區(qū)野桑蠶對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥已經(jīng)產(chǎn)生了抗性，不同地區(qū)抗性存在差異?？剐宰顝?qiáng)地區(qū)為南潯區(qū)和孚鎮(zhèn)，其他依次為南潯區(qū)善璉鎮(zhèn)＞菱湖鎮(zhèn)＞千金鎮(zhèn)＞吳興區(qū)八里店鎮(zhèn)。但湖州地區(qū)野桑蠶整體對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥抗性還處在較低水平。

野桑蠶；有機(jī)磷農(nóng)藥；抗性

野桑蠶（Bombyx mandarina）和家蠶（Bombyx mori）具有共同的起源，廣泛分布在各蠶區(qū)桑園，是太湖流域桑園主要害蟲之一，幼蟲食害桑葉，尤其喜食嫩葉，影響夏秋期小蠶用桑。為害嚴(yán)重時(shí)，整片桑園全部桑葉被吃殆盡，影響桑樹正常生長［1］。

對(duì)野桑蠶的防治一直來主要通過化學(xué)手段來實(shí)現(xiàn)，在長期的殺蟲劑的人工選擇下，抗性差的個(gè)體被淘汰，使得現(xiàn)存的野桑蠶生命力極強(qiáng)，對(duì)惡劣的環(huán)境有著很強(qiáng)的抵抗力，再加上它具有比家蠶強(qiáng)得多的活動(dòng)能力，給桑園防治帶來很大困難。野桑蠶對(duì)外源化學(xué)物質(zhì)的抗性還體現(xiàn)在發(fā)育的整齊度上，由于野桑蠶發(fā)生的世代重疊現(xiàn)象極其嚴(yán)重，盡管殺蟲劑能殺滅大多數(shù)野桑蠶，但總有部分野桑蠶由于高抗性或處于特殊發(fā)育階段（如卵期、蛹期、眠期），而躲避了農(nóng)藥的危害，這是造成野蠶防治困難的又一重要因素［2-5］。已有的研究表明，江蘇蠶區(qū)的野桑蠶對(duì)敵敵畏農(nóng)藥產(chǎn)生了較強(qiáng)抗性［4］，為了明確當(dāng)前湖州市野桑蠶對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥抗性水平，我們采用測(cè)定野桑蠶體內(nèi)酯酶的活性，間接對(duì)湖州地區(qū)野桑蠶種群對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥抗性進(jìn)行了調(diào)查，為綜合治理野桑蠶提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)ハx

野桑蠶分別采自湖州市南潯區(qū)和孚鎮(zhèn)陳塔村、善璉鎮(zhèn)施介橋村、菱湖鎮(zhèn)新溪村、千金鎮(zhèn)朝陽村和吳興八里店鎮(zhèn)移沿山村桑園內(nèi)自然生長的幼蟲，統(tǒng)一在室內(nèi)生化培養(yǎng)箱內(nèi)飼養(yǎng)，溫度25±0.5℃，飼養(yǎng)至5齡進(jìn)行測(cè)試。對(duì)照昆蟲為家蠶，品種“秋豐×白玉”，在蠶室內(nèi)，正常飼養(yǎng)至5齡第3 d進(jìn)行測(cè)試。

1.2 檢測(cè)方法

采用專利技術(shù)（一種對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥抗性野桑蠶種群的檢驗(yàn)方法，授權(quán)專利號(hào)：ZL2007 1 0190620.6）。主要是通過野桑蠶血液里的酯酶和底物的反應(yīng)，利用濾紙的顯色來檢驗(yàn)野桑蠶種群對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥的敏感性，在酸性條件下帶紫色的為抗性個(gè)體，不明顯的為敏感個(gè)體。顯色成像和灰度值分析是通過Tanon-2500凝膠圖像處理系統(tǒng)（GIS）完成，每個(gè)處理重復(fù)5次。

2 結(jié)果與分析

2013年秋季，對(duì)湖州地區(qū)5個(gè)調(diào)查點(diǎn)的野桑蠶進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明：①湖州地區(qū)野蠶對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥均已產(chǎn)生了不同程度抗性，抗性強(qiáng)度依次為：和孚點(diǎn)野蠶種群＞善璉點(diǎn)野桑蠶種群＞菱湖點(diǎn)野桑蠶種群＞八里店點(diǎn)野桑蠶種群＞千金點(diǎn)野桑蠶種群＞家蠶；②表1中顯示，野桑蠶對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥的抗性都在1.13～3.26倍之間，最高的也沒有超過3.26倍，表明野桑蠶對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥抗性還處在較低水平；③表中南潯區(qū)千金地區(qū)是湖州市蠶桑重點(diǎn)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，桑園農(nóng)藥使用量在湖州地區(qū)一直處于高水平區(qū)域，而這次調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，對(duì)有機(jī)磷抗性水平比南潯區(qū)其他3個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)低，其原因可能是千金鎮(zhèn)推廣應(yīng)用滅多威、殘殺威等氨基甲酸脂類農(nóng)藥效果好，有機(jī)磷農(nóng)藥使用大量減少所致。

表1 湖州市不同地區(qū)野桑蠶血液酯酶活性分析表Table 1 Analysis on blood esterase activity of Bombyx mandarina in different districts of Huzhou

3 討論

3.1 野桑蠶對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥的抗性檢測(cè)方法

研究害蟲對(duì)農(nóng)藥的檢測(cè)方法有測(cè)定半致死劑量（LD50）和半致死濃度（LC50）等，由于在實(shí)際生產(chǎn)上捕捉到的害蟲數(shù)量很難達(dá)到上述兩種方法的樣本需求，影響了對(duì)各地域害蟲的抗性調(diào)查。由于鱗翅目害蟲對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥的抗性主要和體內(nèi)的酯酶活性有關(guān)，本研究采用測(cè)定野桑蠶體內(nèi)酯酶的活性間接測(cè)定蟲體對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥的抗性，具有樣本需求小，測(cè)定方便等特點(diǎn)，測(cè)定數(shù)據(jù)和桑園治蟲的防治效果基本一致，反應(yīng)了該方法的可行性，為研究其他害蟲對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥的抗性開辟了新的研究思路。

3.2 野桑蠶對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥的抗性分析

有機(jī)磷農(nóng)藥在湖州主要蠶區(qū)桑園中使用已有30年以上時(shí)間，野桑蠶對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥抗性還處在較低水平，分析其原因可能與3個(gè)因素有關(guān)：①蠶桑生產(chǎn)特殊性。和野桑蠶生活習(xí)性特點(diǎn)有關(guān)。蠶桑生產(chǎn)飼養(yǎng)的家蠶同屬鱗翅目昆蟲，對(duì)農(nóng)藥非常敏感，所以，為了防止家蠶農(nóng)藥中毒，桑園治蟲時(shí)使用農(nóng)藥量一般控制在較低水平，也使野桑蠶抗性增漲較緩慢；②野桑蠶生活習(xí)性相關(guān)。野桑蠶卵孵時(shí)間很長，從春季4月陸續(xù)孵化至夏季7月，世代重疊現(xiàn)象非常嚴(yán)重，所以盡管殺蟲劑能殺滅大多數(shù)野蠶，但總有部分野蠶由于處于特殊發(fā)育階段（如卵期、蛹期等），而躲避了農(nóng)藥選擇壓力，這些野桑蠶敏感基因，又稀釋了在農(nóng)藥選擇壓力遺留下來的抗性基因，導(dǎo)致了野桑蠶農(nóng)藥抗性增漲緩慢；③當(dāng)前桑園推廣使用農(nóng)藥相關(guān)。湖州地區(qū)近年來大面積推廣應(yīng)用防治效果好、降解快的氨基甲酸脂類農(nóng)藥，有機(jī)磷農(nóng)藥使用量大幅度減少，導(dǎo)致野桑蠶對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥耐性降低。

［1］熊彩珍，顧立明，陳理.桑園野蠶成災(zāi)的原因淺析［J］.中國蠶業(yè)，2005，3：75.

［2］沈衛(wèi)德，衛(wèi)正國等.中日野桑蠶蛹期發(fā)育的多樣性［J］.蠶業(yè)科學(xué)，2001，27（4）：277～282.

［3］王長青，楊春英.野蠶的生物學(xué)特性及防治的研究［J］.河北農(nóng)業(yè)技術(shù)師范學(xué)院學(xué)習(xí)班報(bào)，1993，4：68～71.

［4］李兵，沈衛(wèi)德.野桑蠶與家蠶對(duì)敵敵畏的抗性研究初報(bào)［J］.江蘇蠶業(yè)，2003，1：57～58.

［5］沈衛(wèi)德，李兵等.野桑蠶和家蠶的環(huán)境適應(yīng)性比較研究［J］.蠶業(yè)科學(xué).2003，29（4）：375～379.

Investigation of Organic Phosphorus Pesticide Resistance on Bombyx mandarina in Huzhou

ZHAO Li-hua1,SHI Guo-fang1,BAI Xi-chuan2,QIU Li-jia2,LI Bing3,XU Sen-hua1
（1.Huzhou Agricultural Academy Sciences,Huzhou 313000 Zhejiang,China;
2.Wuxing Agriculture and Forestry Development Bureau,Huzhou 313000 Zhejiang,China;
3.Institute of Sericulture,Soochow University,Suzhou 215123 Jiangsu,China）

The resistance of organic phosphorus pesticides on Bombyx mandarina in Huzhou were surveyed in autumn of 2013.The results showed that the Bombyx mandarina in Huzhou has got resistance with organic phosphorus pesti?cide,and different regions got the different resistance.The strongest resistance area was Hefu,and others were Shanlian, Linghu,Qianjin,Balidian.However,the total resistance of organic phosphorus pesticides on Bombyx mandarina in Hu?zhou was still in the lower level.

Bombyx mandarina;organic phosphorus pesticide;resistance

S884.9+6

A

0258-4069［2014］01-018-02

湖州市科技計(jì)劃項(xiàng)目（2012GN16）

趙麗華（1978-），女，浙江湖州人，農(nóng)藝師。主要從事蠶桑科學(xué)技術(shù)研究和品種選育。E-mail：zlh98304025@sina.com