昆明市第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，云南 昆明 650041

甲胎蛋白(AFP)是原發(fā)性肝細(xì)胞癌的一個(gè)重要標(biāo)志物[1]，臨床主要用于原發(fā)性肝癌的輔助診斷及監(jiān)測治療效果或者臨床變化的一個(gè)良好指標(biāo)。ISO15189作為醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)，要求醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)檢測系統(tǒng)、設(shè)備或方法的主要分析性能進(jìn)行驗(yàn)證或確認(rèn)。 精密度性能是檢測系統(tǒng)的主要分析性能之一，更是其他性能評(píng)價(jià)的基礎(chǔ)[2]，如果精密度差，其他性能評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)則無法進(jìn)行。目前國內(nèi)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室對(duì)樣品只作單次測量便發(fā)出報(bào)告，這種情況下精密度性能評(píng)價(jià)更是至關(guān)重要[3]。美國國家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)頒布的EP5-A2文件修正法規(guī)(CLSI)規(guī)定了檢測系統(tǒng)性能評(píng)估的最基本要求為精密度、準(zhǔn)確度、可報(bào)告范圍和參考區(qū)間。我們對(duì)羅氏E170免疫分析儀檢測AFP的精密度、準(zhǔn)確度進(jìn)行驗(yàn)證?，F(xiàn)將驗(yàn)證結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 羅氏E170全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。羅氏公司提供原裝AFP配套試劑盒，校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。

1.2 樣本 美國伯樂公司高、低值質(zhì)控品(BIO-RAD)，批號(hào)分別為:BIO-RAD369/BIO-RAD367；2012年衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心第二次腫瘤標(biāo)記物室間質(zhì)控品。

1.3 方法 按照儀器操作說明書要求對(duì)儀器進(jìn)行定期的維護(hù)保養(yǎng)，每天進(jìn)行兩個(gè)濃度水平常規(guī)質(zhì)控，選擇兩個(gè)高低濃度水平的人混合血清作為實(shí)驗(yàn)樣品，每天分析1個(gè)批次，每個(gè)濃度重復(fù)測定4次，連續(xù)5天，嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)。

1.3.1 精密度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn):通常廠家都會(huì)給出兩種精密度的聲明—批內(nèi)精密度(S批內(nèi))和總的實(shí)驗(yàn)室精密度(S總)。按照EP10-A2《臨床實(shí)驗(yàn)室定量方法的初步評(píng)價(jià)》對(duì)AFP測定的精密度進(jìn)行驗(yàn)證，因此本方案主要通過實(shí)驗(yàn)得到估計(jì)的批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差(S批內(nèi))和總的標(biāo)準(zhǔn)差(S總)并與廠家聲明比較[3]。

1.3.2 準(zhǔn)確度的驗(yàn)證: 通過對(duì)美國伯樂公司高、低濃度的定值質(zhì)控品進(jìn)行檢測，選擇相對(duì)應(yīng)的靶值及允許范圍，并分別計(jì)算絕對(duì)偏差和相對(duì)偏差；對(duì)2012年衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心第二次腫瘤標(biāo)記物室間質(zhì)控品進(jìn)行檢測，檢測值與已知的“靶值”進(jìn)行比較。

1.4 數(shù)據(jù)處理 采用EP15-A2提供的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法在EX-CELL表格上處理數(shù)據(jù)。

1.4.1 批內(nèi)精密度(S批內(nèi))計(jì)算

1.4.2 總精密度(S總)計(jì)算

2 結(jié)果

2.1 精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果 羅氏公司聲明電化學(xué)發(fā)光法檢測AFP的批內(nèi)精密度為3%，總精密度為6%，S批內(nèi)<2/3S總，我們每天分析一個(gè)批次兩個(gè)濃度水平的室內(nèi)質(zhì)控品，每個(gè)濃度重復(fù)測定4次，連續(xù)5天。數(shù)據(jù)見表1及表2。

表1 AFP精密度實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表(低值)單位：IU/mL

表2 AFP精密度實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表(高值)單位：IU/mL

從表1可以看出，低值樣本測定均值為11.43 IU/mL，S批內(nèi)(驗(yàn)證)(0.29IU/mL)

從表2可以看出，高值樣本測定均值為237.38 IU/mL，S批內(nèi)(驗(yàn)證)(1.58IU/mL)

2.2 準(zhǔn)確度驗(yàn)證結(jié)果

2.2.1 對(duì)美國伯樂公司高、低濃度定值質(zhì)控品進(jìn)行檢測，選擇相應(yīng)的靶值及允許范圍，分別計(jì)算絕對(duì)偏差、相對(duì)偏差。結(jié)果見表3。

表3 校準(zhǔn)品驗(yàn)證結(jié)果(IU/mL)

表3結(jié)果顯示，AFP低濃度質(zhì)控品測定值與廠家給出靶值的絕對(duì)偏差為0.23 IU/mL，相對(duì)偏差為2.1%；AFP高濃度質(zhì)控品測定值與廠家給出靶值的絕對(duì)偏差為2.38 IU/mL，相對(duì)偏差為1.0%，明顯小于根據(jù)生物學(xué)變異導(dǎo)出的總允許誤差5.0%[4]。

2.2.2 對(duì)衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心2012年發(fā)放的5份第二次室間質(zhì)控品進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果與已知的“靶值”和可接受限進(jìn)行比較，計(jì)算偏倚,偏倚為-4.65%～11.2%，均小于質(zhì)量要求，結(jié)果見表4。

表4 室間質(zhì)評(píng)控制品驗(yàn)證結(jié)果(單位：ng/mL)

3 討論

檢測系統(tǒng)最主要的性能指標(biāo)是精密度和準(zhǔn)確度[4]。NCCLS出版的EP15-A文件《用戶對(duì)精密度和準(zhǔn)確度性能的核實(shí)試驗(yàn)—批準(zhǔn)指南》，目的就是使用戶通過最小的努力即可以核實(shí)廠家聲明的精密度和準(zhǔn)確度性能。要求臨床實(shí)驗(yàn)室的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)使用操作簡單,方便快捷的方法來驗(yàn)證廠家已經(jīng)聲明的性能參數(shù)。檢測系統(tǒng)的分析性能能夠滿足臨床要求是實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可和檢驗(yàn)結(jié)果互認(rèn)的根本保證[5]。

精密度是指重復(fù)測定值間的一致性[6]。國內(nèi)臨床實(shí)驗(yàn)室對(duì)樣品只作單次測量便發(fā)出報(bào)告，所以精密度性能更是至關(guān)重要。我們使用EP15-A文件批準(zhǔn)指南對(duì)羅氏E170電化學(xué)發(fā)光測定AFP的批內(nèi)不精密度和總不精密度進(jìn)行驗(yàn)證。 從表1可以看出，低值樣本S批內(nèi)(驗(yàn)證)(0.29IU/mL)

準(zhǔn)確度性能指的是一個(gè)檢測數(shù)值偏離標(biāo)準(zhǔn)或真值[7]。是分析測量范圍、靈敏度及生物參考期間評(píng)價(jià)等實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。我們依據(jù)EP9-A2方案提供的檢測方法，以羅氏E-170電化學(xué)發(fā)光法檢測AFP的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)來驗(yàn)證準(zhǔn)確度。表3結(jié)果顯示，低值質(zhì)控品的AFP測定的相對(duì)偏差為2.1%，高值質(zhì)控品的相對(duì)偏差為1.0%，檢測結(jié)果與“標(biāo)示值”的偏倚在1.0%～2.1%之間，明顯小于生物學(xué)變異導(dǎo)出的總允許誤差5.0%。表4結(jié)果顯示，通過對(duì)2012年衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心第二次腫瘤標(biāo)記物室間質(zhì)控品進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果與已知的“靶值”和可接受限進(jìn)行比較，偏倚為-4.65%～11.2%，均小于質(zhì)量要求。對(duì)于準(zhǔn)確度，可以通過檢測商品化的校準(zhǔn)品或定值質(zhì)控品、具有確定值的能力比對(duì)試驗(yàn)調(diào)查樣本或有參考方法檢測結(jié)果的患者標(biāo)本等來評(píng)估準(zhǔn)確性[8]。上述結(jié)果說明，此兩種方法對(duì)羅氏E-170電化學(xué)發(fā)光檢測AFP的準(zhǔn)確度驗(yàn)證是符合要求的。

綜上所述，評(píng)價(jià)羅氏E170全自動(dòng)免疫分析儀測定血清AFP檢測系統(tǒng)有較好的精密度、準(zhǔn)確度性能，能滿足臨床的要求。此驗(yàn)證方案和實(shí)驗(yàn)方法簡便可行，可用于其它項(xiàng)目的性能驗(yàn)證。

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