孟麗輝，張曉迪，盧慶萍，張宏福

(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 北京畜牧獸醫(yī)研究所 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193)

關(guān)于芽孢桿菌在畜禽日糧中的應(yīng)用國(guó)內(nèi)外已有大量研究，芽孢桿菌能產(chǎn)生多種抗生素，對(duì)許多動(dòng)植物及人類病原菌有很好的抑制作用，在改善畜禽生產(chǎn)性能、維持腸道菌群平衡、提高消化率與免疫力等方面均有較好的效果[1-4]。芽孢桿菌種類有很多，如枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、蘇云金芽孢桿菌，生產(chǎn)中多采用復(fù)合制劑的形式[5]。本試驗(yàn)室針對(duì)芽孢桿菌對(duì)肉雞的作用效果進(jìn)行了系統(tǒng)研究，發(fā)現(xiàn)飼喂復(fù)合芽孢桿菌制劑除了可以提高肉雞的生長(zhǎng)和免疫力外，還可有效降低雞舍空氣中金黃色葡萄球菌等有害菌的數(shù)量[6]、減少氨氣排放[7]。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，將芽孢桿菌制成噴劑在雞舍空氣中噴灑，可起到同飼喂芽孢桿菌制劑相同的促進(jìn)生長(zhǎng)、提高肉雞免疫力、凈化雞舍空氣的效果[7-8]。關(guān)于復(fù)合芽孢桿菌制劑對(duì)畜禽生產(chǎn)性能與改善環(huán)境影響的研究已有很多，但有關(guān)其對(duì)畜禽福利影響方面的研究還未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)即在實(shí)驗(yàn)室前期的研究基礎(chǔ)上進(jìn)一步探討飼喂或噴灑復(fù)合芽孢桿菌制劑是否對(duì)肉雞的福利狀況有影響。本文依據(jù)歐盟目前普遍使用的肉雞福利評(píng)估方法[9]，從死淘率、羽毛清潔度、附部損傷度、腳墊損傷度，步態(tài)等幾方面對(duì)肉雞福利狀況進(jìn)行評(píng)估，旨在揭示復(fù)合芽孢桿菌制劑對(duì)肉雞福利的影響，進(jìn)而為提高肉雞福利水平、提高肉雞產(chǎn)品品質(zhì)提供科學(xué)的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)所用復(fù)合芽孢桿菌制劑由枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌(購(gòu)自北京益農(nóng)飼料中心)復(fù)合配制而成。飼喂用枯草芽孢桿菌及地衣芽孢桿菌有效活菌含量均為2×1010CFU/g，等質(zhì)量混合均勻，得到有效活菌含量仍為2×1010CFU/g的復(fù)合制劑。噴灑用枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌經(jīng)活化后，分別接種培養(yǎng)，制成濃度為108CFU/mL的菌懸液，等體積混合均勻制成噴劑。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)處理

試驗(yàn)于昌平試驗(yàn)基地進(jìn)行，采用單因子完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，選用1日齡的AA肉雞300只，隨機(jī)分成3組，分別在3個(gè)肉雞代謝室中喂養(yǎng)，每個(gè)處理組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)25只雞。處理1為對(duì)照組，飼喂玉米-豆粕基礎(chǔ)日糧；處理2為飼喂芽孢桿菌制劑組，在基礎(chǔ)日糧中添加復(fù)合芽孢桿菌制劑200 mg/kg；處理3為噴灑芽孢桿菌制劑組，試驗(yàn)前期每2天噴灑一次，后期1天噴灑一次，噴灑劑量為2 mL/m3，濃度為108CFU/mL，8∶00均勻噴灑在艙內(nèi)空氣中。試驗(yàn)期間各組肉雞飼喂相同的玉米-豆粕型日糧，日糧依照NRC(2004)營(yíng)養(yǎng)需要來(lái)配制，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)日糧及營(yíng)養(yǎng)水平Table 1 Dietary composition and nutrient level

注：*預(yù)混料可為每千克全價(jià)料提供：維生素A 50 000 IU，維生素D 10 000 IU，維生素E 75.0 g，維生素K318.8 g，維生素B19.8 g，維生素B228.8 g，維生素B619.6 g，維生素B120.1 g，泛酸鈣58.8 g，煙酸196.0 g，葉酸4.9 g，生物素2.5 g，銅4.0 g，鐵40.0 g，鋅37.6 g，錳50.0 g，硒0.2 g，碘0.2 g。

Note: *The premix provides following per kg diet: vitamin A 50 000 IU，vitamin D 10 000 IU， vitamin E 75.0 g，vitamin K318.8 g，vitamin B19.8 g，vitamin B228.8 g，vitamin B619.6 g， vitaminB120.1 g，calcium pantothenate 58.8 g，nicotinic acid 196.0 g，folic acid 4.9 g，biotin 2.5 g，Cu 4.0 g，F(xiàn)e 40.0 g，Zn 37.6 g，Mn 50.0 g，Se 0.2 g，I 0.2 g.

1.3 飼養(yǎng)管理

雞舍面積為3×4.5 m2，24 h光照，相對(duì)濕度45%，育雛期第一周溫度為32～33 ℃,以后每周降低1～2 ℃，至第六周為23～24 ℃，網(wǎng)上平養(yǎng)，一次性清糞。雞只按常規(guī)程序進(jìn)行免疫，采用統(tǒng)一的飼養(yǎng)管理方法，自由采食與飲水。

1.4 測(cè)試指標(biāo)與方法

41日齡時(shí)統(tǒng)計(jì)各處理肉雞的死亡率，并評(píng)估各處理肉雞的羽毛清潔度、腳墊情況、跗關(guān)節(jié)損傷程度及步態(tài)。

1.4.1 羽毛清潔度評(píng)分(Feather Cleanliness Score) 每個(gè)處理隨機(jī)選20只雞(每個(gè)重復(fù)5只)，對(duì)其羽毛清潔度進(jìn)行評(píng)分。評(píng)分設(shè)0到3四個(gè)分值，羽毛清潔光滑無(wú)污物的為0分；胸腹部等羽毛污染程度較輕的為1分；羽毛污染程度中等嚴(yán)重的為2分；羽毛雜亂臟，極不清潔的為3分。

1.4.2 腳墊評(píng)分(Foot Pad Score) 每個(gè)處理隨機(jī)選取的20只雞，對(duì)其腳墊逐一觀察并進(jìn)行評(píng)分。評(píng)分設(shè)0到4五個(gè)分值，腳墊清潔干凈，無(wú)任何損傷及潰瘍、炎癥的為0分；有星點(diǎn)損傷及炎癥的為1分；腳墊損傷稍大，損傷面直徑在0.1到0.5 cm的為2分；腳墊炎癥及損傷很明顯，較嚴(yán)重，損傷面直徑在1 cm左右的為3分；腳墊炎癥很嚴(yán)重，損傷面直徑大于2 cm的為4分。

1.4.3 跗關(guān)節(jié)損傷度評(píng)分(Hock Hurt Score) 每個(gè)處理隨機(jī)選取20只雞，對(duì)其跗關(guān)節(jié)處觀察并進(jìn)行損傷度評(píng)分。評(píng)分設(shè)0到4五個(gè)分值，跗關(guān)節(jié)健康無(wú)任何損傷及潰瘍、炎癥的為0分；有小點(diǎn)紅斑損傷及炎癥的為1分；跗關(guān)節(jié)損傷稍大，損傷面積直徑約在0.1到0.5 cm的為2分；跗關(guān)節(jié)炎癥及損傷很明顯，較嚴(yán)重，損傷面直徑約在1 cm左右的為3分；跗關(guān)節(jié)損傷度很嚴(yán)重，損傷面直徑大于2 cm的為4分。

1.4.4 步態(tài)評(píng)分(Gait Score) 每個(gè)處理組隨機(jī)選取20只雞，進(jìn)行步態(tài)評(píng)估，對(duì)試驗(yàn)雞只逐個(gè)測(cè)試并評(píng)分。評(píng)分設(shè)0到5六個(gè)分值：步態(tài)正常，靈敏機(jī)靈的為0分；步態(tài)稍顯遲鈍緩慢的為1分；步態(tài)較遲緩，走路異常但不是很嚴(yán)重的為2分；步態(tài)異常程度中等嚴(yán)重的為3分；嚴(yán)重異常，只能移動(dòng)幾小步的為4分；完全不能走動(dòng)的為5分。

1.5 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)中死淘率采用SAS9.2軟件中卡方檢驗(yàn)，其他測(cè)試指標(biāo)的評(píng)分?jǐn)?shù)據(jù)采用非參數(shù)性檢驗(yàn)并作兩兩比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理肉雞死亡率比較

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對(duì)照組有3只雞死亡，兩個(gè)試驗(yàn)組未發(fā)現(xiàn)雞只死亡(表2)。經(jīng)卡方分析各處理組肉雞死淘率沒(méi)有明顯差異(P>0.05)。

表2 不同處理對(duì)AA肉雞死亡率的影響(n=100) Table 2 Effects of different treatments on the mortality of AA broilers (n=100)

2.2 不同處理肉雞羽毛清潔度評(píng)估

不同處理對(duì)AA肉雞羽毛清潔度評(píng)分的影響見(jiàn)表3。由表3知，對(duì)不同處理的AA肉仔雞羽毛質(zhì)量評(píng)分采用SPSS 16.0 Kruskal-Wallis test (多個(gè)獨(dú)立樣本的非參數(shù)性秩和檢驗(yàn))分析，差異不顯著(P>0.05)。但對(duì)照組中得分在2 和3，也就是羽毛質(zhì)量較差的雞共計(jì)11只(其他兩組為10只)，得分為1分，即羽毛質(zhì)量較高的雞為9只，而其他兩組的為10只。

表3 不同處理對(duì)AA肉雞羽毛清潔度評(píng)分的影響(n=20) Table 3 Effects of different treatments on feather cleanliness score of AA broilers(n=20)

Note: Total rank of each treatment:Ri= the frequency of each score×average rank; Mean rank: Ri= Ri/n.Numbers in brackets are percentage.The same below.

2.3 不同處理肉雞腳墊評(píng)估

由表4知，飼喂或噴灑芽孢桿菌制劑組的肉雞腳墊評(píng)分均為0即都完好無(wú)損，對(duì)照組中有1只雞的腳墊有損傷。對(duì)不同處理的AA肉雞腳墊評(píng)分采用SPSS 16.0 Kruskal-Wallis test 檢驗(yàn)，差異不顯著(P>0.05)。

2.4 不同處理肉雞跗關(guān)節(jié)損傷度評(píng)估

對(duì)不同處理的肉雞跗關(guān)節(jié)損傷度評(píng)分采用SPSS 16.0 Kruskal-Wallis test 檢驗(yàn)，差異不顯著(P>0.05)，但對(duì)照組中得分為0(表5)，即跗關(guān)節(jié)完好無(wú)損傷的雞只是三個(gè)處理中最多的，優(yōu)于飼喂與噴灑復(fù)合芽孢桿菌制劑組。

2.5 步態(tài)評(píng)分

不同處理肉雞步態(tài)評(píng)分結(jié)果見(jiàn)表6。由表6知，飼喂或噴灑復(fù)合芽孢桿菌制劑組中步態(tài)靈敏正常，即得分為0的雞數(shù)分別比對(duì)照組高28.6%、85%；對(duì)照組中得分在2～5之間，即步態(tài)有明顯及嚴(yán)重異常的雞占到雞群總數(shù)的20%，而兩個(gè)處理組中為0%。對(duì)不同處理的肉雞步態(tài)評(píng)分采用SPSS 16.0 Kruskal-Wallis test 檢驗(yàn)，差異不顯著(P>0.05)。

3 討 論

對(duì)于動(dòng)物福利的評(píng)估目前尚沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。本實(shí)驗(yàn)室前期針對(duì)肉雞福利進(jìn)行的一些研究中[10-11]，選用行為、羽毛清潔度、步態(tài)、肢體不對(duì)稱性(FA)、緊張不動(dòng)性(TI)以及血液中異噬白細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比(H/L)等指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)肉雞福利狀況。從研究結(jié)果上來(lái)看，這些指標(biāo)能夠較好地反映肉雞福利狀態(tài)的變化。歐盟在動(dòng)物福利方面經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的探索與實(shí)踐，已經(jīng)形成了較為完善的農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物福利評(píng)估體系(包括家禽、豬及牛)，并得到很多國(guó)家的認(rèn)可。本試驗(yàn)對(duì)肉雞福利的評(píng)估就是采用其中的家禽福利的評(píng)估方法[9]，從死淘率、羽毛清潔度、跗關(guān)節(jié)損傷度、腳墊，步態(tài)等幾方面對(duì)肉雞福利狀態(tài)進(jìn)行評(píng)估。這些評(píng)價(jià)指標(biāo)易于操作，對(duì)肉雞福利產(chǎn)生影響的因素有很多，如環(huán)境、遺傳、營(yíng)養(yǎng)、管理等。本實(shí)驗(yàn)室白水莉等[10]在研究飼養(yǎng)密度對(duì)肉雞福利狀況的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，降低飼養(yǎng)密度可顯著改善肉雞羽毛質(zhì)量與步態(tài)。另有研究表明，環(huán)境富集材料可以改善肉雞的福利狀況，如在雞舍中添置棲架、沙盤或玩具可顯著改善肉仔雞羽毛清潔度、關(guān)節(jié)及腳墊損傷狀況，提高肉仔雞福利水平[11-12]。本試驗(yàn)從營(yíng)養(yǎng)與環(huán)境兩個(gè)影響因素出發(fā)，在肉雞日糧中添加復(fù)合芽孢桿菌制劑及在雞舍內(nèi)噴灑復(fù)合芽孢桿菌制劑，發(fā)現(xiàn)飼喂或噴灑復(fù)合芽孢桿菌制劑對(duì)肉雞的羽毛清潔度、步態(tài)、腳墊狀況等有一定程度的改善。

表4 不同處理對(duì)AA肉雞腳墊評(píng)分的影響(n=20)Table 4 Effects of different treatments on mat score of AA broilers(n=20)

表5 不同處理對(duì)AA肉雞跗關(guān)節(jié)損傷度的影響(n=20)Table 5 Effects of different treatments on elbow damage degree of AA broilers(n=20)

表6 不同處理對(duì)AA肉雞步態(tài)評(píng)分的影響 (n=20)Table 6 Effects of different treatments on gait score of AA broilers(n=20)

綜合上述各研究結(jié)果，肉雞福利水平的提高與其營(yíng)養(yǎng)狀況的改善及生長(zhǎng)環(huán)境條件密不可分。芽孢桿菌能提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能，并且對(duì)腸道菌群有積極影響，添加枯草芽孢桿菌能夠選擇性地增加肉雞盲腸中乳酸桿菌的數(shù)量, 減少沙門氏菌的數(shù)量[13-14]，減少腸道疾病的發(fā)生。隨著肉雞的生長(zhǎng)，降低有害菌的這種作用更加明顯。芽孢桿菌還可產(chǎn)生多種酶，提高飼料養(yǎng)分消化率[15]，提高動(dòng)物免疫力[16]。在日糧中添加適量芽孢桿菌可提高肉雞的抗氧化能力[17], 并且可以拮抗病原微生物，降低排泄物氨逸失[18]?？傊?，在肉雞飼料中添加芽孢桿菌可以提高肉雞的健康水平，降低死亡率，這可能是其優(yōu)化肉雞福利狀況的一個(gè)原因。

耿愛(ài)蓮等[19]應(yīng)用Delphi法確定動(dòng)物福利的影響因素權(quán)重時(shí)，指出環(huán)境控制條件是動(dòng)物福利眾多影響因素中權(quán)重最大的一個(gè)因素。關(guān)于環(huán)境條件與人類和動(dòng)物的健康關(guān)系的研究已有很多，環(huán)境質(zhì)量很差的空氣，其中的病原微生物通過(guò)呼吸道，皮膚，食水等侵入機(jī)體，導(dǎo)致動(dòng)物及人一些疾病的發(fā)生，主要是呼吸道和皮膚疾病、免疫下降等[20-22]。良好的環(huán)境條件可以從動(dòng)物生理、畜禽舍內(nèi)舒適度、遠(yuǎn)離疾病等方面提高動(dòng)物福利狀況。有研究表明噴灑復(fù)合微生物制劑能夠有效改善環(huán)境質(zhì)量，陳國(guó)營(yíng)等[23]在蛋雞舍中噴灑抑氨菌液，可顯著降低氨氣濃度30%，張曉迪等[7]在肉雞舍內(nèi)噴灑復(fù)合芽孢桿菌制劑，肉雞氨氣排放量降低27.65%。氨氣濃度降低可以減少雞只跗關(guān)節(jié)與腳墊的“氨燒傷”，提高其福利狀態(tài)。另外本實(shí)驗(yàn)室前期的研究發(fā)現(xiàn)，肉雞生長(zhǎng)后期于肉雞舍噴灑復(fù)合芽孢桿菌菌液，能夠顯著降低舍內(nèi)空氣中大腸桿菌與葡萄球菌的數(shù)量，效果與化學(xué)消毒劑相近[8]，研究表明噴灑復(fù)合芽孢桿菌等有益菌，能夠改變畜舍的微生態(tài)結(jié)構(gòu)，使肉雞生長(zhǎng)環(huán)境中的條件致病菌數(shù)量減少，可降低細(xì)菌感染導(dǎo)致的炎癥潰瘍而引發(fā)關(guān)節(jié)炎的情況，且能夠減小呼吸道細(xì)菌感染的幾率，防止常見(jiàn)呼吸道疾病發(fā)生，從而提高雞整體抗病能力，降低死亡率，使肉雞福利得到提升。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，在肉雞日糧中添加復(fù)合芽孢桿菌制劑或在雞舍中噴灑復(fù)合芽孢桿菌制劑可以在一定程度上改善肉雞的福利狀況。

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