馮學(xué)敏， 劉曉冰， 張仁生， 周春奎

血管性癡呆(vascular dementia，VD)是指因多次腦卒中或長(zhǎng)期慢性腦缺血等腦血管病變引起的腦損害所致的癡呆。腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)屬于神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子家族，支持多種神經(jīng)元生存、發(fā)育、分化及修復(fù)，在海馬有豐富的表達(dá)，參與學(xué)習(xí)和記憶過(guò)程［1］，近年來(lái)越來(lái)越多的證據(jù)表明BDNF與學(xué)習(xí)和記憶等認(rèn)知過(guò)程密切相關(guān)［2，3］，在改善認(rèn)知功能方面起著重要的作用。有動(dòng)物試驗(yàn)推測(cè)血清中BDNF的水平或許可反映腦中BDNF的水平［4］。但目前關(guān)于VD患者血清中BDNF濃度表達(dá)的報(bào)道較少。本文通過(guò)對(duì)3組中血清BDNF的水平進(jìn)行比較，探討B(tài)DNF與VD的相關(guān)性。

1 資料和方法

1.1 研究對(duì)象

1.1.1 血管性癡呆組 收集2010年3月 ～2010年10月入住我院神經(jīng)內(nèi)科缺血性腦血管病患者，用簡(jiǎn)易智能量表(Mini-Mental State Examnation，MMSE)檢測(cè)患者的智能并進(jìn)行初篩，用美國(guó)精神病學(xué)會(huì)的精神障礙診斷和統(tǒng)計(jì)手冊(cè)(DSM-IV)標(biāo)準(zhǔn)診斷癡呆。所有VD患者的診斷均符合NINDS-AIREN標(biāo)準(zhǔn)。本組32例，男19例，女13例;年齡40～77歲，平均62.66±9.26歲;受教育年限平均5.94±2.71年;根據(jù)MMSE評(píng)分文盲(未受教育)≤17分、小學(xué)文化(受教育年限≤6年)≤20分、中學(xué)或以上(受教育年限﹥6年)≤24分，Hachinski缺血指數(shù)量表評(píng)分≥7分。

1.1.2 腦梗死組 同期住院腦梗死患者中，年齡、性別、受教育程度與VD組相匹配者35例，男19例，女16例;年齡46～77歲，平均61.49±8.78歲;受教育年限6.43±2.83年;經(jīng)臨床評(píng)估及體檢，無(wú)嚴(yán)重軀體疾病，MMSE評(píng)分文盲≥17分、小學(xué)文化≥20分、初中以上文化≥24分。

1.1.3 正常對(duì)照組 為本院同期健康體檢記憶及認(rèn)知功能正常者，共35例，其中男17例、女18例，年齡48～78歲，平均62.97±8.33 歲;受教育年限8.86±2.43 年。

1.2 方法 血液標(biāo)本采集及血清BDNF的測(cè)定:于非急性期進(jìn)行神經(jīng)心理量表評(píng)定，并于評(píng)定后2d，抽取清晨空腹肘靜脈血4ml，置于促凝管中，室溫凝集60min，以1000r/min離心10min，取血清分裝于EP管中，置-80℃低溫冰箱凍存?zhèn)溆?。采用ELlSA法檢測(cè)血清BDNF，ELISA試劑盒購(gòu)自美國(guó)R＆D生物公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 所得數(shù)據(jù)均用“社會(huì)科學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件包”SPSS17.0作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料的比較用χ2檢驗(yàn)，多組樣本均數(shù)的比較用單因素方差分析，兩兩比較用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 各組間相關(guān)病史及危險(xiǎn)因素分析 高血壓病史3組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，說(shuō)明高血壓病可能是VD的危險(xiǎn)因素，糖尿病史、吸煙史、飲酒史比較，3組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)(見(jiàn)表1)。

2.2 3組血清中BDNF濃度比較 VD組、腦梗死組、正常組之間進(jìn)行BDNF比較，統(tǒng)計(jì)采用單向方差分析(One-way ANOVA)。VD組血清中BDNF的平均濃度在3組中水平最低，腦梗死組血清中BDNF平均濃度在3組中水平最高。通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析，VD組和正常組進(jìn)行比較，P＞0.05，兩組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;VD組和腦梗死組進(jìn)行比較，P＜0.05，兩組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;腦梗死組和正常組進(jìn)行比較，P＞0.05，兩組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(見(jiàn)表2、表3)

表1 3組相關(guān)病史及危險(xiǎn)因素的比較

表2 3組血清中BDNF的ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表3 血清中BDNF在各實(shí)驗(yàn)組間的比較

3 討論

眾多的研究均證實(shí)［5，6］，高血壓、高血糖與其正常者相比較，其VD的發(fā)生率明顯升高(P＜0.05)。本研究中，3組中伴隨疾病最多的是高血壓病，VD患者其高血壓構(gòu)成比分別與腦梗死組及正常組相比都具有明顯的差異。積極預(yù)防和控制高血壓可能會(huì)降低VD的發(fā)病率。但在本實(shí)驗(yàn)中糖尿病在3組中并未見(jiàn)明顯的差異，考慮可能與本實(shí)驗(yàn)樣本量小有關(guān)，若明確糖尿病與VD的相關(guān)性可能需進(jìn)一步大樣本的研究。

缺血性腦血管病引起的癡呆是VD的主要形式，有研究表明在腦缺血早期，BDNF表達(dá)增高，其特異的功能受體TrKB表達(dá)也明顯上升，BDNF與TrkB相結(jié)合，產(chǎn)生相應(yīng)的效應(yīng)分子而對(duì)缺血的神經(jīng)元起保護(hù)作用［7，8］。Yamasaki等［9］也發(fā)現(xiàn)，腦缺血早期在海馬放射層BDNF的表達(dá)顯著增加。同時(shí)有研究發(fā)現(xiàn)［10，11］對(duì)缺乏BDNF基因的小鼠進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)其梗死灶面積明顯大于對(duì)照組，而提高內(nèi)源性BDNF水平可明顯減輕腦缺血后的神經(jīng)元損傷程度。向腦缺血大鼠側(cè)腦室內(nèi)注射BDNF，可明顯減少腦梗死灶的體積，促進(jìn)感覺(jué)及運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)［12］。

這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示腦缺血后BDNF反應(yīng)性增強(qiáng)對(duì)機(jī)體早期神經(jīng)元缺血、缺氧產(chǎn)生保護(hù)作用。Schabitz等［13］發(fā)現(xiàn)，BDNF顯著下調(diào)半暗帶的凋亡前體蛋白Bax的表達(dá)，并上調(diào)該區(qū)域抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)，抑制半暗帶腦細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)半暗帶腦細(xì)胞的存活。研究認(rèn)為caspase家族是凋亡的執(zhí)行者，BDNF能通過(guò)阻止caspase-3的活性而抑制細(xì)胞凋亡［14］。有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)［15］，BDNF 在 VD 小鼠早期表達(dá)增多，后期表達(dá)持續(xù)降低。但Yasutake等［16］研究發(fā)現(xiàn)，AD患者外周血清中BDNF水平與正常對(duì)照組有明顯差異，而VD患者與正常對(duì)照組未見(jiàn)明顯差異。也有實(shí)驗(yàn)［17］發(fā)現(xiàn)血管性認(rèn)知障礙患者與正常對(duì)照組外周血清中BDNF水平無(wú)明顯差異。

本文研究發(fā)現(xiàn)VD組患者血清BDNF濃度雖低于正常對(duì)照組，但無(wú)顯著性差異，與上述得出的結(jié)論一致。本研究發(fā)現(xiàn)，腦梗死組和正常組相比，雖然腦梗死組血清BDNF濃度稍高于正常組，但并無(wú)顯著性差異。薛永等［18］也發(fā)現(xiàn)腦梗死患者血清BDNF水平與對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。此結(jié)果與相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果并不完全相符合，腦梗死后人腦組織病理學(xué)檢查及BDNF在腦組織中表達(dá)情況國(guó)內(nèi)外罕見(jiàn)報(bào)道，腦梗死后人腦組織病理學(xué)檢查人體血清BDNF水平與腦梗死時(shí)大腦組織內(nèi)BDNF含量和時(shí)相變化是否一致仍需進(jìn)一步研究。

在本研究中，3組中血清BDNF濃度水平在VD組最低，腦梗死組最高，對(duì)3組血清BDNF濃度水平進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示:VD組和腦梗死組分別與正常對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異，但VD組與腦梗死組相比有顯著性差異，我們考慮是否為腦梗死初期由于神經(jīng)元受損導(dǎo)致BDNF水平反應(yīng)性增高，但隨著神經(jīng)元受損的進(jìn)一步加重以及BDNF的產(chǎn)生減少，導(dǎo)致腦梗死進(jìn)展為血管性癡呆時(shí)BDNF下降，提示BDNF可能參與了腦梗死進(jìn)展為血管性癡呆的病理生理過(guò)程。由于本研究標(biāo)本量較小，且可能有其他混雜因素影響，如患者在不同時(shí)間段的標(biāo)本是否有差異，不同檢測(cè)系統(tǒng)之間以及不同實(shí)驗(yàn)方法之間的可比性等有待進(jìn)一步探討。由于目前對(duì)血清中BDNF水平是否能表示腦組織中BDNF水平尚無(wú)明確定論，BDNF在血管性癡呆患者中表達(dá)及其作用有待更深入細(xì)致的研究。同時(shí)對(duì)于BDNF在腦梗死進(jìn)展為血管性癡呆過(guò)程中如何發(fā)揮作用仍需大量的實(shí)驗(yàn)去研究，其含量從腦梗死進(jìn)展為血管性癡呆降低的機(jī)制以及是否可以通過(guò)外源性給予BDNF阻斷腦梗死進(jìn)展為血管性癡呆需進(jìn)一步的探討。

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