★劉榮 孔昭琰（江蘇省鹽城市婦幼保健院藥事科 鹽城 224002）

明黨參Changium smyrnioides Wolff是我國特有的傘形科（Umbelliferae）明黨參屬（Changium）的單種屬植物，現(xiàn)為江蘇特產(chǎn)道地藥材之一，具有“補氣生津，潤肺化痰，平肝和胃，消腫解毒”之功效[1]。

1 儀器和材料

1.1 儀器與試劑

Waters515型高效液相色譜儀（德國Waters公司），包括二元泵、在線脫氣機、進樣器、UV檢測器（2487）；高速離心機（TGl-16C，Anke）。乙腈為色譜純，水為雙蒸水，甲醇為色譜純，乙醇為分析純[2，3]。中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)2004A版1.0版（國家藥典委員會）。

1.2 藥材來源

明黨參藥材是經(jīng)鹽城市藥品檢驗所林玉蓮主任中藥師鑒定確認(rèn)為傘形科植物明黨參Changium smyrnioides Wolff的干燥根，粉碎過20目篩，備用（見表1）。

表1 藥材產(chǎn)地及編號

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件的選擇

2.1.1 流動相及梯度洗脫條件的選擇

比較了甲醇-水、乙腈-水系統(tǒng)，發(fā)現(xiàn)乙腈-水系統(tǒng)分離效果更好，且柱壓較甲醇-水系統(tǒng)低，因此，最后確定用乙腈-水溶液作為流動相。

2.1.2 檢測波長的選擇

取明黨參粗粉5g，按“2.2”項下的制備方法制備供試品液，在205-320nm之間每隔5nm選取一個檢測波長，測定樣品，記錄色譜圖。經(jīng)比較發(fā)現(xiàn)明黨參醇提物在254nm處得到的色譜峰信息最多，且各峰分離良好，確定選取254nm作為明黨參醇提物的檢測波長。

2.1.3 提取溶媒的選擇

選用水，50%乙醇，70%乙醇，90%乙醇這幾種溶媒按“2.3.5”項下的制備方法制備供試品液，在相同條件下進樣，記錄色譜圖。結(jié)果表明水和50%乙醇提取的供試液信息量少，70%乙醇和90%乙醇提取供試液的信息量較豐富但無太大差別，綜合考慮，確定選取70%乙醇作為提取溶媒。

2.1.4 色譜條件

色譜柱為KromasilC18分析柱（5μm，4.6mm×250mm）；檢測波長：254nm；體積流量：1.0mL/分；柱溫：25℃；流動相：A相為水溶液，B相為乙腈，線性梯度洗脫，0-10分鐘，保持A-B（94:6），10-25分鐘線性至A-B（64:36），25-54分鐘線性至A-B（35:65），54-66分鐘保持A-B（35:65），66-70分鐘線性至 A-B（15:85），70-75分鐘線性至A-B（94:6）。

2.2 供試品溶液的制備

取供試藥材粗粉5g，加70%乙醇50mL，回流提取1小時，提取液以4800r/分，離心20分鐘，轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，加70%乙醇定容至刻度，搖勻，12 000r/分，離心20分鐘，即得。

2.3 數(shù)據(jù)處理方法

使用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)2004A版（國家藥典委員會）進行數(shù)據(jù)處理，將5～10號圖譜進行綜合比較生成對照模式色譜圖，并計算每樣品色譜圖與對照模式色譜圖的相似度，本實驗采用相關(guān)系數(shù)（平均數(shù)）進行評價。

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 精密度試驗

取同一批樣品，制備供試品溶液，連續(xù)進樣8次，檢測指紋圖譜，以“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)”評價，結(jié)果相似度都在0.98以上，RSD為0.20%，表明儀器的精密度良好。

2.4.2 穩(wěn)定性試驗

取同一批樣品，制備供試品溶液，分別在0、2、4、8、12 小時進樣，檢測指紋圖譜，以“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)”評價，結(jié)果相似度都在0.98以上，RSD為0.20%，表明供試品溶液的穩(wěn)定性良好。

2.4.3 重現(xiàn)性試驗

取同一批供試品5份，分別精密稱定，制備供試品溶液，分別進樣，檢測指紋圖譜，以“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)”評價，結(jié)果相似度都在0.98以上，RSD為0.50%，表明樣品的重現(xiàn)性良好。

2.5 樣品分析

精密吸取供試品溶液20μL，注入液相色譜儀，采集0～70分鐘的圖譜,以“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)”進行數(shù)據(jù)處理，結(jié)果見表2,色譜圖見圖1。

表2 不同產(chǎn)地明黨參相似度

圖1 不同產(chǎn)地明黨參指紋圖譜

3 討論

本實驗比較了不同提取方法如冷浸提取、索氏提取、回流提取、超聲提取等不同提取方法的提取效果，以70%乙醇回流提取1h的總體效果為佳，采用該方法對主要成分的提取率高，所得圖譜峰較多且分離良好。

對測定波長進行考察，選擇代表性波長205，210，230，240，254、260、280，320nm進行檢測，結(jié)果顯示，在254nm處色譜圖信號豐富，各色譜峰分布比較均勻，且明黨參中各成分在此波長處吸收良好，分離度較好，所以采用254nm為檢測波長。

明黨參樣品的共有峰為10個，這些峰構(gòu)成了10個產(chǎn)地明黨參藥材的HPLC色譜指紋圖譜特征峰。

不同產(chǎn)地明黨參藥材樣品的指紋圖譜整體面貌基本一致，反映了明黨參藥材的同源性及其群體化學(xué)組分的相似性，揭示出明黨參指紋圖譜具有自身化學(xué)條碼特征，是其內(nèi)在化學(xué)成分種類的反映，但同時也反映出其共有成分的含量存在較大差異這說明，從表2中可以看出不同產(chǎn)地來源的明黨參藥材HPLC峰的相似度不同，表明其內(nèi)在質(zhì)量與產(chǎn)地因素密切相關(guān)。因此，采用HPLC指紋圖譜的質(zhì)量控制模式來控制質(zhì)量，對保證其臨床療效的穩(wěn)定具有重要意義。

本文對明黨參樣品進行了指紋圖譜分析，實驗結(jié)果反映了明黨參藥材的化學(xué)組成及其相對比例，既可用于定性鑒別，也可用于定量分析，并且對于明黨參的栽培、生產(chǎn)加工、貯藏運輸、臨床使用等各個環(huán)節(jié)的全面質(zhì)量監(jiān)控提供了可靠的依據(jù)。

[1]國家藥典委員會.中國藥典（第一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版，2010：195-196.

[2]段志富，陳勇，陳建偉，等.明黨參藥材水溶性活性成分的研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2010，22，（2）：232-234，247

[3]任冬春，錢士輝，楊念云，等.明黨參化學(xué)成分研究[J].中藥材2008，31（1）：47-49.