雷曉寧，魯建江，劉子龍，童延斌，李?yuàn)櫬?/p>

（石河子大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院／新疆兵團(tuán)化工綠色過程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，石河子832003）

抗生素（antibiotics）是一類大量應(yīng)用于人和動(dòng)物感染性疾病治療的廣譜藥物，同時(shí)也以亞治療劑量長(zhǎng)期添加于動(dòng)物飼料中，作為生長(zhǎng)促進(jìn)劑促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育［1－2］。在我國(guó)部分地區(qū)（如珠江三角洲），四環(huán)素類 （tetracycline，TCs）、喹諾酮類 （quinolones，QNs）及磺胺類（sulfanilamide，SAs）抗生素的人均日使用量比瑞士、澳大利亞等發(fā)達(dá)國(guó)家高出1～3個(gè)數(shù)量級(jí)［3］。人畜服用的抗生素類藥物大多不能被充分吸收利用而隨排泄物進(jìn)入污水或直接排入環(huán)境。雖然許多抗生素的半衰期較短，但由于其被頻繁地使用并進(jìn)入環(huán)境，導(dǎo)致其形成假持續(xù)現(xiàn)象［4－5］。環(huán)境中持續(xù)存在的抗生素不僅可以選擇性抑殺一些環(huán)境微生物，而且能夠誘導(dǎo)一些耐藥菌群或抗性基因的產(chǎn)生，從而導(dǎo)致其特殊的生態(tài)毒理效應(yīng)［5］，對(duì)人類健康和整個(gè)生態(tài)系統(tǒng)構(gòu)成了長(zhǎng)期潛在的威脅［6］。

污水處理廠被認(rèn)為是多種污染物消除的主要場(chǎng)所之一［7－9］，進(jìn)入污水處理廠的抗生素一部分隨出水進(jìn)入地表水中，另外也有一部分在處理過程中進(jìn)入到活性污泥中；污泥中的抗生素很難被降解，因而對(duì)抗生素具有一定的蓄積作用。TCs、QNs及SAs三類抗生素已在城市污泥中被頻繁檢出［10－11］，且檢出濃度可高達(dá) mg／kg級(jí)［12］。

對(duì)于活性污泥中抗生素類藥物的檢測(cè)方法僅限于一種或一類抗生素，有必要建立一種同步測(cè)定污泥中多類抗生素的分析方法。在基質(zhì)復(fù)雜的活性污泥樣品處理過程中，提取步驟對(duì)樣品中目標(biāo)物的回收率和基質(zhì)效應(yīng)起到關(guān)鍵作用。固體樣品中有機(jī)物提取的常用方法是超聲萃取技術(shù)（USE）［13－15］和加速溶劑萃?。ˋSE）［16－17］，而 ASE技術(shù)使用昂貴，在我國(guó)尚未普及［18］。

抗生素類藥物殘留檢測(cè)的方法較多，主要有高效液相色譜法（HPLC）、液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法（LCMS）、液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法（LC－MS／MS）等［19］，其中高效液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜方法（HPLC－MS／MS）靈敏度高、選擇性好，能夠?qū)?fù)雜環(huán)境基質(zhì)中的低濃度目標(biāo)物進(jìn)行很好的定性與定量，已成為檢測(cè)的首選技術(shù)［20－21］。

本文應(yīng)用USE技術(shù)、聯(lián)合固相萃取（SPE）及HPLC－ESI－MS／MS技術(shù)建立了高效液相色譜－電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜法（HPLC－ESI－ms／ms）同步檢測(cè)污水處理廠活性污泥中3類共12種抗生素類藥物的方法。該方法選擇性強(qiáng)、靈敏度高、重現(xiàn)性較好，可滿足活性污泥中抗生素類藥物殘留檢測(cè)的要求。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

1.1.1儀器

Finnigan Surveyor液相色譜系統(tǒng)（Thermo E－lectron，USA）和Finnigan TSQ Quantum Discovery MAX三重四極桿質(zhì)譜分析儀；24孔固相萃取裝置（美國(guó)Supelco公司）；超聲萃取儀（上海超聲波儀器廠）；LGJ－12型冷凍干燥機(jī)（北京博醫(yī)康公司）；Milli－Q純水儀（美國(guó) Millipore公司）。

1.1.2試劑

甲醇和乙腈（色譜純，美國(guó) Tedia公司），甲酸（純度為98%，美國(guó)Fluka公司），乙二胺四乙酸二鈉鹽（Na2EDTA）為分析純（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

四環(huán)素類抗生素藥物標(biāo)準(zhǔn)品（TCs）具體如下：

土霉素（oxytetracycline，OTC），四環(huán)素（tetracycline，TC），金霉素（chlortetracycline CTC）與強(qiáng)力霉素（doxycycline，DC）；喹 諾 酮 類 抗 生 素 藥 物 標(biāo) 準(zhǔn) 品（QNs）：環(huán)丙沙星（ciprofloxacin，CIP）、恩諾沙星（enrofloxacin，ENR）、氧氟沙星（ofloxacin，OFL）與洛美沙星（lomefloxacin，LOM）；磺胺類抗生素藥物標(biāo)準(zhǔn)品（SAs）：磺胺嘧啶（sulfadiazine，SDZ）、磺胺甲基異惡唑（sulfisoxazole，SIZ）、磺胺醋酰（sulfacetamide，SAAM）與磺胺甲惡唑（sulfamethoxazole，SMZ）；替代物標(biāo)準(zhǔn)品：環(huán)丙沙星－d8（Ciprofioxacin－d8，CIP－d8），磺胺甲惡唑－d4（sulfamethazine－d4，SMZ－d4），地美環(huán)素（demeclocycline，DMC）均購(gòu)自Dr Ehrenstorfer GmbH公司。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液及緩沖溶液配制

單標(biāo)儲(chǔ)備液 （100mg／L）和混合標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制：分別稱取10.0mg標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶解并定容于100mL棕色容量瓶中，混勻，于4℃下保存。取各單標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量，用甲醇配制所需濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液 （用前配制）。

含0.1mol／L EDTA的Mcllvaine緩沖溶液的配制：稱取12.9g檸檬酸，27.5g磷酸氫二鈉與37.2g乙二胺四乙酸二鈉，溶于水中并定容至1L，pH＝（4±0.05）。

1.3 樣品采集

于2012年3月采集石河子市某污水處理廠初沉池的活性污泥，所有活性污泥樣品均采自表層 （0～15cm）。用錫箔紙將樣品包裹后進(jìn)行冷凍干燥，經(jīng)研磨后過80目篩，轉(zhuǎn)移至密封玻璃瓶中于－20℃保存。

1.4 高效液相色譜－電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定條件

1.4.1色譜條件

Waters Symmetry－C18色譜柱 （150mm ×2.1 mm，3.5μm，美國(guó) Waters公司）；柱溫40℃；進(jìn)樣量10μL；流速0.2mL／min；流動(dòng)相：乙腈（A）＋0.3%甲酸水溶液（B）。梯度洗脫條件：0～1min，15%A～20%A，保持1min；2～10min，20%A～30%A；10～17min，30%A～15%A，保持9min。

1.4.2電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜條件

電噴霧正電離源 （ESI＋）；毛細(xì)管電壓為4.5 kV；鞘氣壓力為25Arb，輔助氣壓力為8Arb，氣體均為高純氮?dú)?；碰撞室出口電壓?.0V，碰撞氣為氬氣；離子傳輸毛細(xì)管溫度350℃；掃描模式：選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè) （SRM）；每對(duì)離子掃描時(shí)間為0.01s。

每種抗生素的質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)見表1。

表1 12種目標(biāo)抗生素的質(zhì)譜檢測(cè)條件Tab.1 Experimental parameters of electrospray ionization tandem mass spectrometry for 12antibiotics

1.5 樣品前處理方法

1.5.1提取

準(zhǔn)確稱取2.0g樣品（精確至0.01g）置于50 mL離心管中，依次加入0.2g Na2EDTA、50μL of 1μg／L 替代標(biāo)準(zhǔn)（CIP－d8，SMZ－d4與 DMC）和30 mL乙腈－0.1mol／L EDTA－Mcllvaine提取液（V∶V＝1∶1），渦旋混合1min；在40℃下超聲萃取15min，然后以3000r／min轉(zhuǎn)速離心5min，取上層清液；重復(fù)上步操作2次，合并3次操作收集的提取液并用純水稀釋至300mL，用0.45μm玻璃纖維濾膜過濾。

1.5.2凈化

將Oasis MCX （3mL，60mg）和 Oasis HLB（6 mL，200mg）SPE小柱串聯(lián)，以8mL甲醇和8mL水活化。將稀釋后的萃取液以3mL／min的速度通過串聯(lián)萃取柱之后用10mL的純水淋洗萃取柱，棄去全部流出液；然后在負(fù)壓下抽干萃取柱，最后依次用6 mL甲醇和6mL含2%氨水的甲醇洗脫。將洗脫液氮吹濃縮至近干，加入甲醇定容至1mL，經(jīng)0.22μm針式濾器過濾后進(jìn)行HPLC－MS／MS測(cè)定。

2 結(jié)果與討論

2.1 高效液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定條件的優(yōu)化

2.1.1液相色譜條件的優(yōu)化

在 HPLC－ESI－MS／MS分析檢測(cè)中，不同的流動(dòng)相對(duì)分析物的保留時(shí)間、峰形以及檢測(cè)靈敏度等都有很大影響。本研究分別考察了甲醇－0.3%甲酸溶液、甲醇－0.3%乙酸銨溶液、乙腈－0.3%甲酸溶液與乙腈－0.3%乙酸銨溶液作為流動(dòng)相時(shí)12種目標(biāo)物分離度和相應(yīng)信號(hào)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：與甲醇相比，乙腈作為流動(dòng)相時(shí)信號(hào)較穩(wěn)定，可獲得更好的色譜峰形；乙酸銨會(huì)使TCs的峰形嚴(yán)重拖尾，而采用0.3%甲酸體系則可同時(shí)使3類目標(biāo)分析物的響應(yīng)值顯著增加，信噪比提高很多。為保證流動(dòng)相的分離效果，實(shí)驗(yàn)最終確定乙腈－0.3%甲酸溶液為流動(dòng)相。

2.1.2質(zhì)譜條件的優(yōu)化

根據(jù)目標(biāo)分析物的分子結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)，采用電噴霧電離源（ESI），在正離子掃描下以選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（SRM）進(jìn)行分析。采用針泵進(jìn)樣，分別進(jìn)行Q1和Q3掃描確定定性定量離子對(duì)，并對(duì)碰撞能等質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化（表1），使信號(hào)穩(wěn)定、靈敏度最高。在選定的色譜條件下接入流動(dòng)相，進(jìn)而對(duì)離子源和離子噴霧電壓等參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化。

圖1為優(yōu)化條件下12種目標(biāo)化合物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（100μg／L）的總離子流圖。

圖1 12種目標(biāo)化合物的總離子流圖Fig.1 Total ion chromatogram of 12antibiotics

2.2 樣品前處理?xiàng)l件的優(yōu)化

2.2.1提取液優(yōu)化

在復(fù)雜基質(zhì)樣品中多種目標(biāo)物的提取過程中，不同的提取方式對(duì)提取效率有很大的影響。王碩等［12］比較了USE和ASE兩種常見的提取方式對(duì)污泥中50種藥物的提取效率，結(jié)果表明這2種提取方式對(duì)SAs和QNs的提取效率相似，另外，由于TCs熱解析溫度低，ASE提取方式不能從污泥中提取出TCs。因此本實(shí)驗(yàn)采用USE提取方式，對(duì)比了乙腈－水（25∶75）、甲醇－檸檬酸緩沖液和乙腈－EDTAMcllvaine緩沖液等不同溶劑作為提取液時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。結(jié)果表明：乙腈－EDTA－Mcllvaine作為提取劑時(shí)，可將污泥樣品中3類12種抗生素全部提取出來，SAs、TCs和QNs 3類抗生素的回收率分別為83%～109%、78%～92%和80%～103%，而且比乙腈－水（25∶75）和甲醇－檸檬酸緩沖液作提取液時(shí)的整體回收率都高。其原因可能是：活性污泥中含有天然有機(jī)質(zhì)（如腐植酸）和金屬離子等，許多抗生素易與金屬離子鰲合，影響提取效率，利用EDTA－Mcllvaine緩沖液能有效地阻止抗生素與樣品中金屬離子的鏊合作用。因此，以乙腈－EDTA－Mcllvaine為提取劑時(shí)提取效果較好。

2.2.2固相萃取柱的選擇

由于目標(biāo)分析物的酸堿性和極性差異比較大，本實(shí)驗(yàn)比較了HLB、MCX和C18三種不同的SPE小柱的富集效果，結(jié)果如圖2所示。

圖2 不同固相萃取柱對(duì)12種抗生素回收率的影響Fig.2 Influence of different solid phase extraction columns on recoveries of 12antibiotics

由圖2可知：目標(biāo)物經(jīng)過HLB柱后，QNs與TCs的回收率均高于70%；MCX柱對(duì)SAs的回收率較高；而C18小柱對(duì)12種目標(biāo)物的回收率均略低。為提高12種目標(biāo)物的整體萃取效率，實(shí)驗(yàn)中將MCX和HLB兩種萃取柱串聯(lián)對(duì)12種目標(biāo)物進(jìn)行萃取。結(jié)果表明：串聯(lián)柱對(duì)SAs、QNs和TCs三類分析物的平均回收率均高于HLB、MCX和C18三種萃取柱單獨(dú)使用時(shí)的富集效果，且回收率穩(wěn)定、重現(xiàn)性好，因此，本實(shí)驗(yàn)選用MCX和HLB串聯(lián)柱對(duì)污泥樣品進(jìn)行富集、凈化。

2.2.3洗脫液的選擇

本實(shí)驗(yàn)考察了不同洗脫液對(duì)12種目標(biāo)抗生素洗脫效果的影響。在300mL的自來水中加入100 μL混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（1μg／mL），經(jīng) MCX 3mL，60mg）和 HLB（6mL，200mg）SPE串聯(lián)小柱富集，10mL純水淋洗，負(fù)壓下抽干萃取柱，分別以6mL的甲醇、含2%氨水（體積比）的甲醇以及含10%丙酮的甲醇3種不同試劑洗脫。結(jié)果表明：以甲醇作為洗脫劑時(shí)，TCs可獲得較高的回收率，SAs和QNs整體的洗脫效果都不佳；含2%氨水的甲醇對(duì)SAs和QNs的洗脫效果較好，而TCs在堿性條件下不穩(wěn)定導(dǎo)致其回收率較低。因而，本實(shí)驗(yàn)先用甲醇再用2%氨水的甲醇對(duì)12種目標(biāo)物進(jìn)行洗脫。

2.2.4濃縮方法優(yōu)化

常用的濃縮方法有氮?dú)鉂饪s與旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，本研究利用含1%氨水的甲醇配制了10mL不同濃度 （1、50與100ng／L）的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，比較兩種濃縮方法對(duì)12種目標(biāo)物回收率的影響。結(jié)果表明，使用氮?dú)鉂饪s時(shí)12種目標(biāo)物回收率均略微高于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法，且所有分析物的回收率都大于83%。因此，本實(shí)驗(yàn)選用氮?dú)鉂饪s法。

2.3 方法學(xué)確證

2.3.1線性范圍和檢出限

在選定的色譜和質(zhì)譜條件下，對(duì)一系列不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.5μg／L～250μg／L）進(jìn)行分析。以待測(cè)組分定量離子對(duì)的峰面積進(jìn)行定量，得到12種分析物檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程、線性范圍及相關(guān)系數(shù)等參數(shù)，結(jié)果見表2。

由表2可知：12種化合物均在較寬的范圍內(nèi)具有良好的線性（r2＞0.990），TCs、QNs及SAs三類目標(biāo)抗生素的檢出限（LOD，S／N＝3）分別為0.25 μg／kg～1.13μg／kg、0.11μg／kg～0.42μg／kg及0.33μg／kg～1.15μg／kg，都低于潘尋等［14］建立的污泥樣品中多種SAs和TCs檢測(cè)方法的檢出限（1 μg／kg～16μg／kg）。

表2 12種抗生素的線性回歸方程、線性范圍、相關(guān)系數(shù)（r2）及檢出限（LOD，S／N＝3）Tab.2 Regression equations，linear ranges，correlation coefficients（r2）and limits of detection（LOD，S／N＝3）of 12antibiotics

2.3.2方法的精密度與準(zhǔn)確度

在2g空白活性污泥樣品中，分別進(jìn)行50μg／kg和200μg／kg二個(gè)濃度水平的加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，按1.5節(jié)所述方法對(duì)樣品進(jìn)行處理，每個(gè)加標(biāo)水平取6份平行樣，考察方法的回收率和重現(xiàn)性，結(jié)果見表3。

由表3可知：本文采用的前處理方法具有較好的精密度與準(zhǔn)確度。在2個(gè)加標(biāo)水平上12種目標(biāo)物在活性污泥中的平均回收率為63.17%～102.83%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）（n＝6）為1.28%～9.30%。

表3 目標(biāo)抗生素的加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）（n＝6）Tab.3 Spiked recoveries and relative standard deviations（RSD）of the target compounds（n＝6）

2.4 實(shí)際樣品分析

采用優(yōu)化的樣品前處理?xiàng)l件和 HPLC－MS／MS分析條件，對(duì)石河子市某污水處理廠初沉池表層活性污泥樣品進(jìn)行分析，結(jié)果見圖3。

圖3顯示：除LOM外，其他目標(biāo)分析物在所有樣品中均被檢出。TCs、QNs及SAs三類抗生素的濃度范圍分別為21.50μg／kg（TC）～143.75μg／kg（OTC）、nd（LOM）～115.23μg／kg（CIP）及1.81μg／kg（SAAM）～24.28μg／kg（SDZ）；總濃度分別為：247.08 μg／kg、148.94μg／kg及50.00μg／kg。

圖3 石河子市某污水處理廠活性污泥中12種抗生素的含量Fig.3 Concentrations of 12antibiotics in the activated sludge of municipal sewage treatment plants in Shihezi

3 結(jié)論

1）本文采用 USE、SPE與 HPLC－MS／MS聯(lián)用技術(shù)建立了活性污泥中3類共12種抗生素類藥物殘留的分析方法。樣品經(jīng)乙腈與EDTA－Mcllvaine緩沖溶液超聲萃??；Oasis MAX與HLB串聯(lián)固相萃取柱富集凈化，然后依次以甲醇和含2%氨水的甲醇溶液洗脫；以乙腈和0.3%甲酸水溶液為流動(dòng)相進(jìn)行 HPLC－ESI－MS／MS分析。

2）該方法易于操作，適用于污水處理廠活性污泥中多種抗生素的分析和監(jiān)測(cè)，為進(jìn)一步研究其在環(huán)境中遷移轉(zhuǎn)化提供了支持。

3）應(yīng)用該方法，在石河子市某污水處理廠活性污泥中檢測(cè)到TCs、QNs及SAs三類抗生素的總濃度分別為：247.08μg／kg、148.94μg／kg及50.00 μg／kg。

［1］Martinez J L.Environmental pollution by antibiotics and by antibiotic resistance determinants［J］.Environ Pollut，2009，157（11）：2893－2902.

［2］Kümmerer K.Antibiotics in the aquatic environment－a review－part I［J］.Chemosphere，2009，75（4）：417－434.

［3］Leung H W，Minh T B，Murphy M B，et al.Distribution，fate and risk assessment of antibiotics in sewage treatment plants in Hong Kong，South China［J］.Environment international，2012，42：1－9.

［4］Gulkowska A，Leung H W，So M K，et al.Removal of antibiotics from wastewater by sewage treatment facilities in Hong Kong and Shenzhen，China［J］.Water Res，2008，42（1／2）：395－403.

［5］Watkinson A J，Murby E J，Kolpin D W，et al.The occurrence of antibiotics in an urban watershed：From wastewater to drinking water［J］.Sci Total Environ，2009，407（8）：2711－2723.

［6］Al－Bahry S N，Mahmoud I Y，Al－Belushi K I A，et al.Coastal sewage discharge and its impact on fish with reference to antibiotic resistant enteric bacteria and enteric pathogens as bioindicators of pollution［J］.Chemosphere，2009，77：1534－1539.

［7］張晶，王碩，楊奕，等.城市污水處理廠污泥中磺胺類抗生素的液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定［J］.衛(wèi)生研究，2012，41（2）：240－246.

［8］劉婭，董瑞，顏海燕，等.薄皮核桃殼活性炭處理啤酒工業(yè)廢水的研究［J］.石河子大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2011，29（1）：94－97.

［9］程喜梅，武春陽，徐龍龍，等.介質(zhì)阻擋放電降解廢水中硝基苯的研究［J］.石河子大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2010，28（2）：211－214.

［10］Gao P，Mariya M，Irene X.Correlation of tetracycline and sulfonamide antibiotics with corresponding resistance genes and resistant bacteria in a conventional municipal wastewater treatment plant［J］.Sci Total Environ，2012，421－422：173－183.

［11］劉沖，黃滿紅，肖 斌.城市污水廠中四環(huán)素類抗生素分布特性研究［J］.廣州化工，2012，40（14）：153－156.

［12］王碩，張晶，邵兵.超高效液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定污泥中氯霉素、磺胺類、喹諾酮類、四環(huán)素類與大環(huán)內(nèi)酯類抗生素［J］.分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2013，32（2）：179－185.

［13］Yang J F，Ying G G，Zhao J L.Simultaneous determination of four classes of antibiotics in sediments of the Pearl Rivers using RRLC－MS／MS［J］.Sci Total Environ，2010，408（16）：3424－3432.

［14］潘尋，賁偉偉，強(qiáng)志民.高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法同步測(cè)定城市污水處理廠活性污泥中的多類抗生素殘留［J］.分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2011，30（4）：448－452.

［15］張莉，王靜.高效液相色譜法測(cè)定小麥粉中毗蟲琳的殘留量［J］.石河子大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2003，21（3）：209－210.

［16］厲文輝，史亞利，高立紅，等.加速溶劑萃?。咝б合嗌V－出來質(zhì)譜法同時(shí)檢測(cè)魚肉中喹諾酮、磺胺與大環(huán)內(nèi)脂類抗生素［J］.分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2010，29（10）：987－992.

［17］Li W H，Shi Y L，Gao L H，et al.Occurrence and removal of antibiotics in a municipal wastewater reclamation plant in Beijing，China［J］.Chemosphere，2013，92（4）：435－444.

［18］雷曉寧，方小丹，魯建江，等.HPLC－ESI－MS／MS檢測(cè)典型廢水與活性污泥中4種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素［J］.分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2013，32（6）：715－720.

［19］蔣興東，陳玉飛，涂健，等.左氧氟沙星人工抗原的制備及其抗體鑒定［J］.石河子大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2008，26（1）：68－71.

［20］楊常青，王龍星，侯曉虹，等.HPLC－ESI－MS／MS檢測(cè)典型廢水與活性污泥中4種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素［J］.色譜，2012，30（8）：756－762.

［21］高立紅，史亞利，厲文輝，等.高效液相色譜－電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)環(huán)境水樣中22種抗生素類藥物［J］.色譜，2010，28（5）：491－497.