， ，

(1.浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，浙江杭州 310058；2.杭州市蕭山區(qū)浦陽(yáng)鎮(zhèn)人民政府；3.杭州市蕭山出入境檢驗(yàn)檢疫局)

豬口蹄疫是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一種急性、熱性、接觸性傳染病，以患豬的口、蹄等部位發(fā)生水泡性病癥為主要特征，傳染性很強(qiáng)，發(fā)病率很高。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為A類(lèi)動(dòng)物傳染病，我國(guó)將其列為一類(lèi)動(dòng)物傳染病。主要通過(guò)免疫接種進(jìn)行預(yù)防。

近年來(lái)，由于豬口蹄疫的病原變異、疫苗免疫質(zhì)量及病原性免疫抑制等因素的影響，在實(shí)際生產(chǎn)中普遍存在免疫抗體合格率下降和穩(wěn)定性較差等問(wèn)題。為提高豬口蹄疫的免疫效果，杭州市蕭山區(qū)有關(guān)部門(mén)通過(guò)引進(jìn)豬口蹄疫O型合成肽疫苗及不同廠家生產(chǎn)的豬口蹄疫(O型Ⅱ)滅活疫苗進(jìn)行免疫預(yù)防?，F(xiàn)將不同口蹄疫疫苗的免疫效果試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1試驗(yàn)動(dòng)物 試驗(yàn)于2012年9-12月在杭州市蕭山區(qū)某規(guī)模豬場(chǎng)進(jìn)行。選擇飼養(yǎng)管理?xiàng)l件良好的健康仔豬134頭，按試驗(yàn)要求隨機(jī)分為6組，即A1、A2、A3組(均采用豬口蹄疫O型合成肽疫苗)及B、C、D組(采用由3家招投標(biāo)公司生產(chǎn)的豬口蹄疫O型Ⅱ滅活疫苗)。

1.2供試疫苗 豬口蹄疫O型合成肽疫苗，抗原主要成分為2570+7309，由A公司生產(chǎn)；豬口蹄疫(O型Ⅱ)滅活疫苗由政府組織招投標(biāo)的三家公司(即B公司、C公司和D公司)生產(chǎn)。供試的所有疫苗均在有效期內(nèi)。

1.3檢測(cè)試劑 口蹄疫合成肽免疫抗體檢測(cè)采用VPⅠ結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA試劑盒，由上海某生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)；豬口蹄疫滅活疫苗(O型Ⅱ)免疫抗體檢測(cè)采用正向間接血凝試劑(IHA)，由中國(guó)農(nóng)科院某獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，所用試劑均在有效期內(nèi)。

1.4試驗(yàn)方法

1.4.1試驗(yàn)分組 選用60日齡健康仔豬12欄共134頭，隨機(jī)分為6組，A1組22頭，A2組22頭，A3組24頭，均采用由A公司生產(chǎn)的豬口蹄疫O型合成肽疫苗免疫；B組22頭，C組24頭，D組20頭，分別采用由B、C、D三家招投標(biāo)公司生產(chǎn)的豬口蹄疫O型Ⅱ滅活疫苗。免疫程序和劑量見(jiàn)表1。

表1 豬口蹄疫不同疫苗的免疫程序設(shè)計(jì)

1.4.2采血日齡 分別于90、120、150日齡采血，每次采血2 mL,采集后凝固分離血清并冷凍保存，等全部血樣采集完成后一并檢測(cè)。

1.4.3檢測(cè)方法 根據(jù)周志平等(2008)[1]報(bào)道，IHA檢測(cè)試劑對(duì)合成肽免疫抗體很難檢出，而對(duì)濃縮滅活苗的抗原粒子則有較好的凝集反應(yīng)，所以對(duì)合成肽疫苗采用VPⅠ結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA試劑進(jìn)行檢測(cè)，抗體效價(jià)≥26為合格；對(duì)豬口蹄疫滅活疫苗采用正向間接血凝法(IHA)進(jìn)行檢測(cè)，以抗體效價(jià)≥25為合格。

2 結(jié)果與分析

2.1豬口蹄疫O型合成肽疫苗的免疫效果觀察 詳見(jiàn)表2。

表2 豬口蹄疫O 型合成肽疫苗的免疫效果觀察

由表2可見(jiàn)，豬口蹄疫O型合成肽疫苗首免后，A1組的抗體合格率較低，但均已超過(guò)農(nóng)業(yè)部規(guī)定抗體合格率≥ 70%的規(guī)定，經(jīng)二免和三免后，合格率均達(dá)到100%。證實(shí)使用豬口蹄疫O型合成肽疫苗免疫效果良好。

2.2不同廠家生產(chǎn)的豬口蹄疫O型Ⅱ滅活疫苗的免疫效果觀察 詳見(jiàn)表3。

表3 不同廠家生產(chǎn)的豬口蹄疫O 型Ⅱ滅活疫苗的免疫效果觀察

由表3可見(jiàn)，不同廠家生產(chǎn)的豬口蹄疫O型Ⅱ滅活苗首免后，免疫抗體合格率較低(均低于20%)，但經(jīng)二免和三免后抗體合格率明顯提高，達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定抗體合格率≥70%的要求，這與朱中武等(2008)[2]報(bào)道基本一致，證實(shí)豬口蹄疫O型Ⅱ滅活疫苗至少進(jìn)行二免后才能起到較好的抗體保護(hù)效果。

2.3豬口蹄疫不同疫苗類(lèi)型的免疫效果觀察 詳見(jiàn)表4。

表4 豬口蹄疫不同疫苗類(lèi)型的免疫效果觀察

由表4可見(jiàn)，無(wú)論一免、二免，或三免中，豬口蹄疫O型合成肽疫苗組的抗體合格率均高于豬口蹄疫O型Ⅱ滅活疫苗組，特別是一免后，合成肽疫苗組的抗體合格率已達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定抗體合格率≥70%的標(biāo)準(zhǔn)，而滅活苗組的抗體合格率則遠(yuǎn)低于農(nóng)業(yè)部規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。但經(jīng)二免后，抗體合格率明顯提高，均達(dá)到了農(nóng)業(yè)部規(guī)定的抗體合格標(biāo)準(zhǔn)(≥70%)。因此，豬口蹄疫O型合成肽疫苗，一般在肉豬生產(chǎn)中進(jìn)行一免就可達(dá)到良好的免疫效果，而豬口蹄疫O型Ⅱ滅活疫苗則至少進(jìn)行二免后才能達(dá)到良好的保護(hù)效果。

2.4豬口蹄疫不同疫苗類(lèi)型的免疫應(yīng)激反應(yīng)比較 詳見(jiàn)表5。

表5 豬口蹄疫不同疫苗類(lèi)型的免疫應(yīng)激反應(yīng)比較

由表5可見(jiàn)，臨床免疫注射過(guò)程中，口蹄疫O型合成肽疫苗的應(yīng)激反應(yīng)明顯低于口蹄疫O型Ⅱ滅活疫苗，而且尚未出現(xiàn)倒地、全身發(fā)紫等嚴(yán)重應(yīng)激反應(yīng)。

3 討 論

3.1經(jīng)本次試驗(yàn)觀察，豬口蹄疫O型合成肽疫苗免疫后的抗體合格率明顯高于豬口蹄疫O型Ⅱ滅活疫苗。

國(guó)際上檢驗(yàn)疫苗免疫效果的方法主要采用人工強(qiáng)毒攻擊，本次試驗(yàn)由于受生物安全性條件限制，僅對(duì)血樣免疫抗體進(jìn)行檢測(cè)，且采用兩種不同的檢測(cè)方法，可能對(duì)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生一定影響[3-5]，所以能否真正達(dá)到相似的攻毒保護(hù)率尚待進(jìn)一步試驗(yàn)確定。

3.2由三家不同廠家生產(chǎn)的豬口蹄疫O型Ⅱ滅活疫苗經(jīng)二免后，免疫抗體合格率均達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的抗體合格率≥70%要求，說(shuō)明疫苗免疫效果良好，能對(duì)豬口蹄疫疫病起到良好的保護(hù)作用。

但據(jù)試驗(yàn)，三種疫苗的免疫抗體差異較大，由D公司生產(chǎn)的疫苗免疫后血樣抗體合格率最高，B公司生產(chǎn)的疫苗經(jīng)三免后抗體合格率則略有下降，與金大春等(2003)[6]報(bào)道不相一致，這可能與試驗(yàn)豬數(shù)較少有關(guān)，有待進(jìn)一步研究探討。

3.3根據(jù)獸醫(yī)技術(shù)人員的臨床觀察，注射豬口蹄疫O型合成肽疫苗后未見(jiàn)嚴(yán)重不良應(yīng)激反應(yīng)，這可能與合成肽疫苗的抗原單一、不含異體蛋白等特性有關(guān)。

據(jù)本次試驗(yàn)，注射滅活疫苗后則有部分豬只出現(xiàn)食欲減退、廢食等一般應(yīng)激反應(yīng)，嚴(yán)重者則出現(xiàn)倒地、全身發(fā)紫等應(yīng)激反應(yīng)，這與趙朝美等(2012)[7]報(bào)道基本一致，應(yīng)引起臨床獸醫(yī)技術(shù)人員的注意。

綜上所述，通過(guò)本次試驗(yàn)，對(duì)豬口蹄疫O型合成肽疫苗和不同廠家生產(chǎn)的豬口蹄疫O型Ⅱ滅活疫苗進(jìn)行了抗體效價(jià)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，使用合成肽疫苗免疫，進(jìn)行一免后即能達(dá)到良好的抗體保護(hù)效果；使用滅活疫苗免疫，則必需二免后，才能達(dá)到良好的抗體保護(hù)效果。

在實(shí)際生產(chǎn)中，疫苗免疫效果受多種因數(shù)的影響，進(jìn)行免疫接種時(shí)不僅要根據(jù)豬場(chǎng)的實(shí)際情況制定科學(xué)合理的免疫程序，還要關(guān)注豬群中口蹄疫抗體的變化情況，適時(shí)抽檢，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，及時(shí)分析原因，采取補(bǔ)救措施，才能確保豬群始終保持較高的免疫抗體水平。

[1] 周志平,朱曉路,范坤曉等.規(guī)模豬場(chǎng)豬口蹄疫O型合成肽疫苗免疫程序檢測(cè)[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志,2009,45(12)：36-38.

[2] 朱中武,魯杏華,呂曉星等.集約化養(yǎng)豬場(chǎng)口蹄疫免疫程序探討[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2008,44(6)：34-35.

[3] 孫寶權(quán),王昌斌,王小新等.豬口蹄疫O型滅活疫苗免疫效果評(píng)價(jià)[J].養(yǎng)豬,20013,(1)：102-104.

[4] 姜東,周兵,許志成等.豬口蹄疫O型疫苗免疫效果監(jiān)測(cè)分析[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志,2011,47(8)：38-40.

[5] 陳偉杰,周彩琴,趙靈燕等.豬口蹄疫抗體不同檢測(cè)方法的比較分析[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2010,46(1):23.

[6] 金大春,王躍川,季旭平等.豬口蹄疫免疫程序和抗體水平[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2003(8):30-31.

[7] 趙朝美,聶文軍,張玲琴等.不同口蹄疫O型疫苗免疫效果及檢測(cè)[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘,2012,(3)：109-110.