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(余姚市禽畜病防治研究所, 浙江余姚 315400)

2010年以來，我國部分省市的蛋鴨群突然出現(xiàn)了一種新的產(chǎn)蛋下降病，大量研究表明該病由黃病毒科黃病毒屬的一種新病毒引起[1-3]，由于該病毒的核苷酸序列與黃病毒屬恩他耶病毒群的蚊媒坦布蘇病毒印尼株和泰國株的同源性達(dá)87%～91%[2]，因此將其命名為鴨坦布蘇病毒。由于該病是近年來新發(fā)的一種傳染病，本文將鴨坦布蘇病毒病的流行特點(diǎn)及診斷要點(diǎn)簡要介紹如下，供參考。

1 流行特點(diǎn)

1.1傳播速度快 筆者在臨床診斷過程中發(fā)現(xiàn)鴨坦布蘇病毒在1～2 d內(nèi)能感染鴨場的所有鴨子，一般1周左右即可感染一個(gè)養(yǎng)殖小區(qū)或聚養(yǎng)區(qū)的所有鴨群。一戶養(yǎng)鴨一旦發(fā)病，隨后以點(diǎn)為中心，快速向周邊區(qū)域擴(kuò)散，數(shù)天內(nèi)即可傳播周邊區(qū)域，特別是鴨棚密集區(qū)傳播更迅速，發(fā)病更嚴(yán)重。

1.2發(fā)病率高，死亡率較低 鴨場一旦發(fā)生該病，即可引起鴨群中的所有個(gè)體感染發(fā)??；發(fā)病率幾近100%，但死亡率較低，產(chǎn)蛋鴨通常低于15%，多數(shù)在5%以下[4]；發(fā)病率和死亡率多與發(fā)病季節(jié)和養(yǎng)殖場的管理和繼發(fā)感染有關(guān)；部分養(yǎng)殖場的青年鴨和雛鴨發(fā)病后，死亡率可達(dá)20%左右。

1.3鴨為主要宿主 該病主要危害各種蛋鴨、肉用種鴨(櫻桃谷鴨、北京鴨等)和野鴨種鴨，也有少量20～30日齡幼鴨、種鵝和蛋雞發(fā)病的報(bào)道[1,5,6]。

2 臨床診斷要點(diǎn)

2.1采食量突然下降 該病發(fā)病后，2～3 d內(nèi)鴨群采食量可突然降至原來的20%～30%，部分患鴨停食，一般需2周左右采食量才能逐漸恢復(fù)[7]。

2.2產(chǎn)蛋率急劇下降 伴隨著采食量的驟降，1周內(nèi)產(chǎn)蛋率可從高峰期的90%～95%下降到5%～10%，甚至停止產(chǎn)蛋。一般在發(fā)病后20～30 d產(chǎn)蛋量開始恢復(fù)，大部分蛋鴨產(chǎn)蛋率可恢復(fù)到原來的90%左右[7,8]。

2.3病鴨體溫升高 患鴨排綠色稀糞，體溫升高，后期部分發(fā)病鴨可能出現(xiàn)腦炎樣神經(jīng)癥狀，表現(xiàn)為行走、站立不穩(wěn)，頭頸抽搐，倒地不起，個(gè)別患鴨癱瘓、共濟(jì)失調(diào)。肉鴨發(fā)病以神經(jīng)癥狀為主。

2.4種蛋受精率下降 患鴨發(fā)病期間種蛋受精率下降，病程1個(gè)月左右即可自行恢復(fù)，恢復(fù)程度與鴨群狀態(tài)、日齡相關(guān)，但不能達(dá)到產(chǎn)蛋高峰[8]。

3 病理診斷要點(diǎn)

病變特點(diǎn)之一 卵巢病變，表現(xiàn)為卵泡膜嚴(yán)重充血、出血，卵泡變形、液化、壞死，卵巢萎縮等(圖1 A、B)，后期卵泡破裂，出現(xiàn)卵黃性腹膜炎。

病變特點(diǎn)之二 肝臟腫大，表面有出血點(diǎn)或出血塊(圖1 C、D)。

病變特點(diǎn)之三 脾臟斑駁呈大理石狀，部分極度腫大出血并破裂(圖1 E、F)；胰腺有出血和壞死，心肌外觀蒼白，有白色條紋狀壞死，內(nèi)膜出血。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

鴨坦布蘇病毒的實(shí)驗(yàn)室診斷主要有病毒分離、RT-PCR檢測、ELISA檢測等。

4.1病毒分離培養(yǎng) 這是檢測病鴨組織中鴨坦布蘇病毒最為準(zhǔn)確的一種病原學(xué)診斷方法。采集病死鴨的出血卵泡膜和卵巢病料，按常規(guī)勻漿后反復(fù)凍融3次，經(jīng)尿囊腔無菌接種9日齡SPF雞胚或10日齡鴨胚，接胚后4 d左右胚胎死亡，部分需連續(xù)傳代3代以上胚胎才出現(xiàn)死亡。死胚胚胎充血、出血，肝臟出血，腎臟有尿酸鹽沉積，尿囊液粘稠，并含有大量尿酸鹽[9]。

對分離病毒進(jìn)行血凝試驗(yàn)，鴨坦布蘇病毒無血凝活性；流感病毒、鴨副粘病毒、EDS則均有血凝活性。對分離病毒還可采用RT-PCR、血清中和試驗(yàn)、免疫熒光等技術(shù)進(jìn)行鑒定。

圖1 鴨坦布蘇病毒感染引起的卵巢、肝臟、脾臟病變

4.2RT-PCR技術(shù) 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外基因擴(kuò)增技術(shù)，該技術(shù)具有高度敏感性和特異性，為鴨坦布蘇病毒的快速診斷提供了敏感、快速、直觀的檢測方法，是目前最為實(shí)用的一種檢測方法。實(shí)驗(yàn)室診斷可根據(jù)鴨坦布蘇病毒E基因設(shè)計(jì)的一對引物，目的片段大小為450 bp,應(yīng)用該法可對臨床病例進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)該法具有很好的特異性和敏感性。

Yan L等(2011)[10]針對鴨坦布蘇病毒Fengxian株E基因序列設(shè)計(jì)引物與TaqMan熒光探針，建立了鴨坦布蘇病毒的一種快速，準(zhǔn)確和定量的TaqMan熒光探針實(shí)時(shí)定量PCR檢測方法，該法比常規(guī)PCR的靈敏度高100倍。Yun T(2012)[11]針對3 端非編碼區(qū)設(shè)計(jì)的MGB探針，建立了單步實(shí)時(shí)RT-PCR檢測方法，該法能檢測出20拷貝/μL的核酸，且與其他病原無交叉反應(yīng)，檢測只需2 h左右,該法具有快速、敏感、特異的特點(diǎn)。

4.3酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)診斷技術(shù) 采用鴨坦布蘇病毒的全病毒和E基因原核表達(dá)蛋白作為包被抗原，建立檢測鴨坦布蘇病毒血清抗體的間接 ELISA 檢測方法。

筆者采用該法對寧波地區(qū)的多個(gè)發(fā)病鴨場發(fā)病后15～60 d的患鴨進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)發(fā)病后15 d開始各鴨場患鴨的血清陽性率均達(dá)100%。經(jīng)大量臨床檢測應(yīng)用表明該法具有較好的特異性、敏感性和穩(wěn)定性。

5 鑒別診斷

5.1鴨流感的鑒別 鴨流感是由正粘病毒科的A型流感病毒引起的一種急性傳染病。該病可引起不同品種、不同日齡鴨群感染發(fā)病，但不同毒株的致病力差異較大，有的毒株自然感染時(shí)發(fā)病率和死亡率高達(dá)100%。患鴨主要表現(xiàn)為食欲減退或廢絕，喜飲水，排白色或帶淡黃色水樣稀糞?；鉴喚癯劣簦荒苷玖?，迅速脫水、消瘦，發(fā)病后2～3 d鴨群大批死亡，蛋鴨產(chǎn)蛋率大幅下降。急性死亡患鴨全身皮膚充血、出血，腹部皮下脂肪有散在性出血點(diǎn)。肝臟腫大，呈淡黃色，有出血斑，脾臟腫大、出血，表面有灰白色壞死點(diǎn)。胰充血、出血，且有點(diǎn)狀壞死、液化，心冠脂肪出血等特征性病變。

對鴨流感病毒分離后進(jìn)行血凝試驗(yàn)和血凝抑制試驗(yàn)，有血凝活性，可被陽性血清抑制，據(jù)此可作出初步鑒別診斷，采用禽流感通用引物對分離病毒進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增[12]，可確診鴨流感。

5.2鴨產(chǎn)蛋下降綜合征的鑒別 鴨產(chǎn)蛋下降綜合征是由鴨腺病毒感染引起的一種疾病，該病主要引起蛋(種)鴨發(fā)病，一般病鴨無明顯癥狀，采食量稍有減少，主要表現(xiàn)為產(chǎn)蛋下降，蛋鴨產(chǎn)蛋率可降至產(chǎn)蛋高峰期的50%左右，期間軟殼蛋、薄殼蛋和畸形蛋大量增加，一般不引起患鴨死亡。病鴨主要病變在卵巢，表現(xiàn)為卵泡充血、出血、萎縮、壞死，其他組織臟器則無明顯病變。

對鴨腺病毒的鑒別診斷可采集病鴨血清進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)或采集病料進(jìn)行病毒分離試驗(yàn)，發(fā)病鴨血清抗體效價(jià)很高，分離的鴨腺病毒有血凝活性；鴨坦布蘇病毒則無血凝活性，據(jù)此可作出鑒別診斷，也可直接提取發(fā)病鴨病變卵巢或分離病毒的DNA，用產(chǎn)蛋下降綜合征引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，鑒定出鴨腺病毒。

5.3禽霍亂的鑒別 禽霍亂是由禽多殺性巴氏桿菌引起的一種細(xì)菌性傳染疾病，多發(fā)于青年鴨及成年鴨，發(fā)病率較低，但死亡率較高?；鉴喍喑市募〕鲅?，肝臟腫大，表面散布灰白色、針尖大小的壞死點(diǎn)等特征性病變，為禽霍亂與其他疾病的主要鑒別要點(diǎn)。

實(shí)驗(yàn)室診斷，可采集患鴨肝臟涂片，進(jìn)行瑞氏染色，鏡檢可見兩極著色的藍(lán)色桿菌，對患鴨用敏感抗生素治療有較好療效。

5.4鴨卵黃性腹膜炎的鑒別 鴨卵黃性腹膜炎是由大腸桿菌引起的一種細(xì)菌性疾病，是產(chǎn)蛋鴨群特別是高產(chǎn)期蛋鴨的一種常見多發(fā)性疾病。該病發(fā)病率較低，病鴨臨床表現(xiàn)為排綠色稀糞，嚴(yán)重者腳軟不能站立而伏臥于地面，驅(qū)動時(shí)能勉強(qiáng)爬動，常廢食死亡。

主要病變?yōu)楦鼓ぴ龊?，有大量黃白色滲出物附著于腹膜，卵泡充血、出血，絕大部分病例輸卵管中有大小不一、像煮熟樣的蛋白團(tuán)塊滯留，部分卵泡破裂充滿整個(gè)腹腔。卵黃性腹膜炎引起的產(chǎn)蛋率較低，用敏感的抗菌藥物治療有較好的療效。

鴨坦布蘇病毒病是我國近年來出現(xiàn)的一種新發(fā)鴨病，目前通過臨床癥狀、剖檢病變和實(shí)驗(yàn)室診斷能基本確診該病，基層獸醫(yī)工作者在家禽門診診斷時(shí)，應(yīng)注意與鴨流感、產(chǎn)蛋下降綜合征等進(jìn)行鑒別診斷，以有效制定合理的防控方案。

目前對該病尚無有效的防治措施。對發(fā)病鴨主要通過加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，減少應(yīng)激，合理應(yīng)用抗生素防止繼發(fā)感染，鴨群可在發(fā)病后20～30 d左右自行恢復(fù)產(chǎn)蛋，產(chǎn)蛋率可恢復(fù)到原來的90%左右。

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