黃 翔， 雷 芳， 江天久

(暨南大學(xué)赤潮與海洋生物學(xué)研究中心;廣東省高校水體富營養(yǎng)化與赤潮防治重點實驗室，廣東廣州510632)

腹瀉性貝類毒素(diarrhetic shellfish poisoning，DSP)是由多環(huán)醚類聚合的脂肪酸衍生物，不溶于水，能溶于甲醇、乙醚和氯仿等有機溶劑，屬于脂溶性物質(zhì).DSP主要是由鰭藻(Dinophysis spp.)和原甲藻(Prorocentrum spp.)等藻類產(chǎn)生［1］.貝類攝食有毒藻后，在體內(nèi)轉(zhuǎn)化、代謝并累積DSP，影響消費者生命健康安全.自1976年日本報道了首例DSP中毒事件［2］以來，世界各地沿海，特別是西歐、北歐和亞洲沿海各國均發(fā)現(xiàn)了DSP.近年來對我國沿海部分海區(qū)貝類毒素的調(diào)查顯示，我國近海養(yǎng)殖的雙殼貝類普遍受到DSP污染，遼東灣、萊州灣，福建福清、深圳等海域均發(fā)現(xiàn) DSP［3－4］.水產(chǎn)品的質(zhì)量安全與人們的健康密切相關(guān)，本實驗通過對華南最大的水產(chǎn)品集散地羅湖水產(chǎn)批發(fā)市場貝類的調(diào)查研究，分析產(chǎn)自我國東海和南海近岸養(yǎng)殖區(qū)的貝類DSP污染狀況，以期為我國市售海產(chǎn)貝類的安全監(jiān)理提供理論依據(jù).

1 材料和方法

1.1 實驗材料

于2007年11月至2008年10月在深圳羅湖水產(chǎn)批發(fā)市場定期采集產(chǎn)自東海和南海海域貝類樣本，共14種，186份.采集的貝類品種包括華貴櫛孔扇貝(Chlamys nobilis)、波紋巴非蛤(Paphia undulata)、翡翠貽貝(Perna viridis)、文蛤(Meretrix meretrix)、雜色蛤仔(Ruditapea variegata)、菲律賓蛤仔(Ruditapes philippinara)、櫛江珧(Atrina pectinata)、青蛤(Cyclina sinensis)、毛蚶(Scapharca subcrenata)、大竹蟶(Soleen grandis)、鈍綴錦蛤(Tapes turgida)、曲畸心蛤(Anomalocardia flexuosa)、泥蚶(Tegillarea granosa)和縊蟶(Sinonovacula constricat).

產(chǎn)自東海海域的貝類全部來自福建沿海，產(chǎn)自南海海域貝類來自廣東沿海和廣西沿海.

1.2 實驗方法

采用我國進出口商品檢驗行業(yè)標準“腹瀉性貝毒(DSP)的小白鼠生物檢測方法”［5］，200 g貝肉勻漿后，使用丙酮抽提兩次;抽提液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙酮，加入少量的乙醚和水;靜置分層后，分離醚層并通風使乙醚充分揮發(fā)，加入體積分數(shù)1%吐溫60生理鹽水將全部濃縮物在刻度試管中稀釋到10 mL，此即為小鼠注射液.分別將1 mL試液注射到3只體質(zhì)量16～20 g的健康雄性小白鼠腹腔中，觀察24 h內(nèi)小白鼠中毒反應(yīng)和存活情況，得到每組(3只)中死亡2只以上的最小注射劑量，參照注射劑量與毒力值的關(guān)系表計算毒力值的大?。?］.通常用MU/g表示每克貝類軟組織中含有DSP毒素的毒力.鼠單位(MU)是國際上用來表示DSP毒力大小的單位，1個鼠單位的定義是使1只體質(zhì)量16～20 g的小白鼠在24 h內(nèi)死亡所需腹腔注射的劑量.目前我國規(guī)定DSP含量警戒標準為每克貝組織內(nèi)的毒素24 h內(nèi)使3只小白鼠死亡2只以上的腹腔注射劑量，即0.05 MU/g.

2 結(jié)果

2.1 廣東海域貝類DSP污染狀況

(1)不同品種貝類DSP污染狀況 廣東海域貝類種類豐富，有華貴櫛孔扇貝、波紋巴非蛤、翡翠貽貝和文蛤等共9種.貝類樣品118份，其中62份檢測呈陽性，48份超標，檢出率和超標率分別為52.54%和40.68%(見圖1).

波紋巴非蛤35份，檢出率和超標率分別為62.86%和51.43%;華貴櫛孔扇貝樣品35份，檢出率和超標率分別為54.29%和48.57%;菲律賓蛤仔和青蛤各有樣品1份，雖然檢出率均為100%，且青蛤超標率為100%，但因樣品數(shù)太少，難以準確反映污染狀況;毛蚶有2份，未檢測出毒素.總體而言，廣東海域貝類都受到較高程度DSP污染，特別是波紋巴非蛤和華貴櫛孔扇貝污染嚴重.

圖1 廣東海域不同品種貝類DSP檢出率和超標率Fig.1 The positive rate and over-standard rate of DSP in shellfish from the coast of Guangdong province

(2)貝類DSP污染季節(jié)性變化 廣東海域貝類DSP污染狀況呈現(xiàn)季節(jié)性變化特征(見圖2).2007年秋季，貝類樣品13份，其中10份樣品檢測呈陽性且超標，檢出率和超標率同為76.92%;2007年冬季，樣品37份，檢出率和超標率分別為45.95%和29.73%;2008年春季樣品39份，檢出率和超標率分別為56.41%和48.32%;2008年夏季19份樣品，檢出率和超標率分別為42.11%和26.32%;2008年秋季采集樣品10份，檢出率和超標率分別為50%和30%.可以看出，檢出率和超標率存在季節(jié)性差異，秋、春季的DSP污染比冬、夏季DSP污染嚴重.

圖2 廣東海域貝類不同季節(jié)DSP檢出率和超標率Fig.2 The positive rate and over-standard rate of DSP in shellfish from the coast of Guangdong province in different seasons

2.2 廣西海域貝類DSP污染狀況

(1)不同品種貝類DSP污染差異 廣西海域主產(chǎn)貝類品種主要為波紋巴非蛤、櫛江珧、大竹蟶、鈍綴錦蛤和曲畸心蛤，共43份樣品，檢出率20.93%，超標率13.95%.波紋巴非蛤僅1份樣品且超標;櫛江珧21份樣品，檢出率和超標率分別為33.33%和23.81%;大竹蟶18份樣品，其中1份樣品檢測呈陽性，檢出率和超標率均為5.56%;鈍綴錦蛤2份樣品，曲畸心蛤1份樣品，均未檢出毒素.整體上，廣西海域貝類受DSP污染程度較輕，僅個別品種貝類DSP污染超標率較高(見圖3).

圖3 廣西海域貝類不同品種間DSP檢出率和超標率Fig.3 The positive rate and over-standard rate of DSP in shellfish from the coast of Guangxi province

(2)不同季節(jié)貝類DSP污染狀況 2007年秋季4份樣品，檢出率和超標率同為25%;2007年冬季12份樣品，其中2份樣品檢測呈陽性，1份超標，檢出率和超標率分別為16.67%和8.33%;2008年春季15份樣品，檢出率和超標率同為26.67%;2008年夏季7份樣品，1份樣品檢測呈陽性，未超標，檢出率為14.29%;2008年秋季5份樣品，1份樣品檢測呈陽性，未超標，檢出率為20%.

總體上，廣西沿海貝類樣品DSP陽性檢出率和超標率處于較低水平，春、秋季DSP污染狀況比夏、冬季嚴重;其中08年夏季和秋季未檢出DSP毒素超標，08年春季檢出率和超標率均為最高(見圖4).

圖4 不同季節(jié)廣西沿海貝類DSP檢出率和超標率Fig.4 The positive rate and over-standard rate of DSP in shellfish from the coast of Guangxi province in different seasons

2.3 福建沿海貝類DSP污染狀況

(1)不同品種貝類DSP污染情況 福建海域主產(chǎn)貝類包括華貴櫛孔扇貝、波紋巴非蛤、泥蚶和縊蟶.華貴櫛孔扇貝樣品13份，檢出率和超標率分別為30.77%和15.38%;波紋巴非蛤樣品10份，檢出率和超標率分別為80%和50%;泥蚶和縊蟶各1份，均未檢測出毒素.波紋巴非蛤DSP污染嚴重(見圖5).

圖5 福建沿海貝類不同品種DSP檢出率和超標率Fig.5 The positive rate and over-standard rate of DSP in shellfish from the coast of Fujian province

(2)不同季節(jié)貝類DSP污染狀況 2007年秋季樣品4份，檢測均呈陽性，3份樣品超標，檢出率和超標率分別為100%和75%;2007年冬季樣品5份，檢出率和超標率分別為60%和40%;2008年春季樣品共3份，未檢出毒素;2008年夏季樣品共10份，檢出率和超標率分別為50%和20%;2008年秋季樣品3份，檢測率和超標率同為33.33%(見圖6).

福建海域貝類樣品，除08年春季未檢出DSP毒素外，其他4個季節(jié)均檢出，其中07年秋季檢出率和超標率均為最高;此后，檢出率隨季節(jié)變化呈遞減趨勢，而超標率呈現(xiàn)先降低后增加的變化趨勢，08年夏季超標率最低.

圖6 不同季節(jié)福建沿海貝類DSP檢出率和超標率Fig.6 The positive rate and over-standard rate of DSP in shellfish from the coast of Fujian province in different seasons

3 討論

貝類DSP污染情況由多種因素，包括貝類種類和生理特性，有毒藻種類、數(shù)量、毒素含量等因素綜合作用.貝類對有毒藻類濾食，吸收、轉(zhuǎn)化并累積毒素的能力，因種類差異而不同［6－7］.2005年徐志斌等［8］對廣東近岸海域35種貝類的調(diào)查結(jié)果表明，有27種貝類DSP污染水平超標，近江牡蠣和波紋巴非蛤的DSP污染水平最高，而且貝類DSP污染存在季節(jié)差異，秋季DSP最高，與本次調(diào)查結(jié)果基本一致;檢測廣東近岸海域81份樣品，檢出率和超標率分別為75.3%和60.5%，結(jié)果甚至高于本次調(diào)查結(jié)果.

季節(jié)的不同，造成水體溫度、光照條件等環(huán)境因素變化，進而影響藻類種群、數(shù)量和貝類的生理狀態(tài).沈東升等［9］的研究表明，在溫度15～30℃，大多海洋微藻的數(shù)量隨溫度升高而增加，溫度的影響大于光照.統(tǒng)計我國沿海赤潮災(zāi)害的信息，可以發(fā)現(xiàn)赤潮發(fā)生的頻次與水體表層的溫度呈正相關(guān)趨勢，東海海域赤潮發(fā)生次數(shù)最多的月份為5月和6月，南海海域赤潮高發(fā)期為3至5月［10－11］.貝類需要濾食有毒藻類，并累積毒素于體內(nèi)，最終達到一定含量之后才能被檢測出，這個過程需要一段時間.因此，南海海域近岸貝類DSP毒素陽性檢出率和超標率在春季較高，而東海海域近岸春季貝類樣品沒有檢出DSP毒素.另一方面，在適宜溫度范圍內(nèi)，貝類攝食率隨溫度升高而增加，這主要是因為貝類的鰓絲纖毛擺動頻率與溫度呈正相關(guān)［12］，運動越頻繁，攝食藻類數(shù)量越多，積累的藻毒素也越多.

不同海域往往存在不同的有毒藻，有毒藻之間具有產(chǎn)毒特異性.通過對長江口及鄰近海域有毒藻類和赤潮毒素調(diào)查發(fā)現(xiàn)，該海域能夠產(chǎn)生DSP的藻類是具尾鰭藻(Dinophysis caudata)和倒卵形鰭藻(D.fortii)，且這些有毒藻類常年存在于該海域［13］.另外，有研究表明在廣東近岸海域能產(chǎn)生DSP的藻類包括漸尖鰭藻(Dinophysis acuminata)、三角鰭藻(D.tripos)、倒卵形鰭藻(D.fortii)、帽狀鰭藻(D.mitra)、利瑪原甲藻(Prorocentrum lima)、波羅的海原甲藻(P.balticum)和墨西哥原甲藻(P.mexicanum)等［14］.另外，新的有毒赤潮藻擴張也可能造成新的威脅.2009年發(fā)生在珠海海域的旋溝藻赤潮標志著該種藻在我國沿海的擴散［15］.廣東近岸海域有毒藻種類多，而且密度較高，這可能是造成當?shù)刎愵怐SP污染嚴重的原因之一.河口和近海海域富營養(yǎng)化，導(dǎo)致有害赤潮頻發(fā)，這主要和陸源污染物不斷增加有關(guān)［16］.廣東陸源污染物排出集中于珠江口海域，是赤潮的高發(fā)區(qū)［17］.而沿海城市的經(jīng)濟快速發(fā)展時期也往往是赤潮爆發(fā)的高峰期.深圳市社會經(jīng)濟的快速發(fā)展，伴隨著大量污染物被排放到周圍水體中;深圳東部海域甲藻赤潮發(fā)生頻率與深圳市總氮、總磷凈排放量呈明顯正相關(guān)［18－19］.城市經(jīng)濟發(fā)展過程中大量污染物排放入海，造成富營養(yǎng)化而導(dǎo)致赤潮發(fā)生，因此經(jīng)濟發(fā)達省市的貝類樣品DSP污染狀況往往更嚴重，這與本研究中廣東海域貝類中DSP檢出率和超標率遠高于其他地區(qū)的結(jié)果相符合.深圳水產(chǎn)批發(fā)市場應(yīng)當對產(chǎn)自該海域的貝類DSP重點監(jiān)測和管理，以保障海產(chǎn)貝類的食用安全.

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