謝國旗，顧 韋，蔣建新

膿毒癥是由病原微生物入侵機(jī)體感染引起的全身損傷性防御反應(yīng)癥候群，通常認(rèn)為是機(jī)體過度炎癥反應(yīng)或炎癥失控所致，是嚴(yán)重創(chuàng)傷、損傷、外科大手術(shù)后常見的并發(fā)癥。胃腸道以其在體內(nèi)獨(dú)特的生理環(huán)境參與了膿毒癥病理生理過程，腸道黏膜損害是膿毒癥促發(fā)多器官功能障礙綜合征的重要病理環(huán)節(jié)，腸黏膜屏障功能不全與膿毒癥患者的內(nèi)毒素血癥、系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)綜合征以及多器官功能衰竭密切相關(guān)，臨床上主要表現(xiàn)為應(yīng)激性胃腸黏膜病變、中毒性腸麻痹、腸道微生態(tài)失衡、腸道通透性增加、細(xì)菌易位所致的腸源性感染[1]。因此，預(yù)防和治療腸黏膜屏障功能不全，將對膿毒癥患者預(yù)后有重要意義。本研究通過檢測腸道通透性和糞便菌群分析兩個方面初步探討了膿毒癥患者腸黏膜屏障功能障礙情況。

1 資料與方法

1.1 一般資料 膿毒癥組：選擇2009￣01—2010￣12收住筆者所在醫(yī)院的20例患者，均符合文獻(xiàn)[2]的診斷標(biāo)準(zhǔn)，被證實(shí)有細(xì)菌存在或有高度可疑的感染灶，其診斷標(biāo)準(zhǔn)包括下列3項(xiàng)或3項(xiàng)以上體征：①體溫>38℃或<36℃；②心率>90次/min；③呼吸頻率>20次/min，或過度通氣使動脈血二氧化碳分壓（PaCO2）<32 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）；④外周白細(xì)胞計(jì)數(shù)>12×109/L或<4×109/L或未成熟粒細(xì)胞>10%。對照組：同期接診的外傷患者20例，無任何部位感染征象，血常規(guī)正常。兩組患者性別、年齡構(gòu)成無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

1.2 儀器和試劑 721型分光光度計(jì)；800型醫(yī)用離心機(jī)；PEG-600貯備液：準(zhǔn)確稱取PEG-600（分子量范圍570～660）20.000 g溶于水中，用蒸餾水定容于1000 ml容量瓶中，使用時根據(jù)需要稀釋成不同濃度的溶液。

1.3 Fe（SCN）3-CHCl3二相系統(tǒng)光度法檢測腸道通透性 尿PEG600測定檢測IBF方法的建立[3]：在不同波長下測定有色CHCl3相和水相中Fe（SCN）3的最大吸收波長。測定不同時間吸光度。將PEG-600貯備液稀釋成標(biāo)準(zhǔn)系列，作校準(zhǔn)曲線。計(jì)算回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。將2.00 ml A液和2.00 ml CHCl3混合于10 ml試管中組成兩相系統(tǒng)。將0.2 ml PEG-600標(biāo)準(zhǔn)溶液或尿樣加入含有二相系統(tǒng)的離心管中，用不含PEG的兩相系統(tǒng)中的CHCl3相作參比，最大吸收波長處測定吸光度。膿毒癥組與對照組患者尿中的PEG含量分別計(jì)算均數(shù)（M）與標(biāo)準(zhǔn)差（SD），超過對照組M＋2SD者視為通透性增加。

1.4 糞便菌群分析檢測腸道菌群失調(diào) 參考文獻(xiàn)[4]糞便涂片診斷腸道菌群的理論和基礎(chǔ)，對每份糞便標(biāo)本快速涂片革蘭染色以快速診斷腸道菌群失調(diào)癥，按照菌種總數(shù)及菌群分布分為正常大便及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度菌群失調(diào)癥。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用SPSS統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，組間比較用t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)，P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié) 果

2.1 各組患者的尿樣檢測結(jié)果 尿樣測定發(fā)現(xiàn)膿毒癥組患者與對照組相比，尿液中 PEG-600含量升高 [（90.589±17.565） vs （83.867±6.234） μg，P<0.05]，提示膿毒癥組患者有腸道通透性增加。

2.2 各組菌群失調(diào)率 膿毒癥組高于對照組（P<0.05）。見表1。

表1 兩組患者菌群失調(diào)情況

3 討 論

膿毒癥發(fā)病機(jī)制相當(dāng)復(fù)雜，其發(fā)病機(jī)制不僅包括感染、炎癥、免疫、凝血等基本問題，與腸功能障礙也存在密切關(guān)系。研究證實(shí)，膿毒癥可使胃腸道黏膜缺血缺氧，胃腸道運(yùn)動減弱，腸上皮細(xì)胞損傷，腸道病原微生物粘附、定植能力改變，厭氧菌數(shù)量減少，腸黏膜上粘附、定植的致病菌數(shù)量增加發(fā)生腸道菌群紊亂以及腸黏膜通透性增加[1]。腸黏膜屏障是指由機(jī)械屏障（腸上皮分泌的黏液、腸上皮細(xì)胞及其緊密連接等）、生物屏障（腸道微生態(tài)）和免疫屏障等組成的機(jī)體防御體系，主要作用是能阻止腸道內(nèi)有害物質(zhì)進(jìn)入體循環(huán)[5]。本研究通過檢測腸道通透性和糞便菌群分析兩個方面初步探討了膿毒癥患者腸黏膜屏障功能障礙情況。結(jié)果顯示，膿毒癥組患者有腸道通透性增加、菌群失調(diào)發(fā)病率顯著高于對照組（P<0.05），說明膿毒癥患者確實(shí)易導(dǎo)致腸黏膜屏障功能障礙。

另一方面，膿毒癥由于腸黏膜屏障破壞，腸道通透性增加，致病菌大量繁殖以及缺血缺氧、細(xì)胞因子作用，導(dǎo)致寄生于腸道內(nèi)的微生物和（或）內(nèi)毒素通過某種途徑越過腸黏膜屏障，大量侵入正常情況下為無菌的腸道外組織，如腸壁漿膜、腸系膜淋巴結(jié)、門靜脈及其他遠(yuǎn)處器官，出現(xiàn)腸源性感染并刺激已活化的單核和巨噬細(xì)胞釋放大量的細(xì)胞因子和炎性介質(zhì)，誘發(fā)和加重膿毒癥和多器官功能障礙，故腸功能衰竭又被稱為膿毒癥、多器官功能衰竭的扳機(jī)。腸道在膿毒癥發(fā)病過程的作用主要是通過缺血-再灌注損傷、腸道菌群失調(diào)、內(nèi)毒素釋放炎癥介質(zhì)等機(jī)理，造成腸道細(xì)菌和內(nèi)毒素移位，啟動或加重炎癥介質(zhì)的“瀑布效應(yīng)”，導(dǎo)致失控性SIRS[5]。因此，膿毒癥與腸功能障礙互相影響，極易形成惡性循環(huán)。探討膿毒癥患者的腸黏膜屏障功能，加強(qiáng)早期對膿毒癥患者腸道屏障功能的保護(hù)，對防治腸源性細(xì)菌和毒素移位以及膿毒癥、多器官功能障礙綜合征具有重要的意義。

[1]孟廣剛，任愛民.膿毒癥胃腸黏膜損傷及中西醫(yī)保護(hù)研究進(jìn)展[J].北京中醫(yī)藥，2010，29（10）：795-796.

[2]姚詠明，盛志勇，林洪遠(yuǎn)，等.膿毒癥定義及診斷的新認(rèn)識[J].中國危重病急救醫(yī)學(xué)，2004，16（6）：321-323.

[3]姚玉川，馮天杰，趙江華，等.慢性消化病患者腸黏膜屏障功能障礙與腸道微生態(tài)失衡的關(guān)系[J].中華消化雜志，2006，26（4）：267-268.

[4]張秀榮，徐智民.腸道菌群糞便涂片檢查圖譜[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2000.1223.

[5]Baumgart DC，Dignass AU.Intestinal barrier function[J].Curr Opin Clin Nutr Metab Care，2002，5（7）:685-694.