胡軼虹 譚興文 張征驕 江新梅

雞甲胺磷中毒性遲發(fā)性神經(jīng)病電生理測(cè)定及藥物干預(yù)研究

胡軼虹 譚興文 張征驕 江新梅

目的 ①建立雞甲胺磷中毒遲發(fā)性神經(jīng)病模型。②通過(guò)周圍神經(jīng)電生理檢測(cè)確定周圍神經(jīng)損傷情況并評(píng)價(jià)三磷酸胞苷二鈉(CTP)對(duì)周圍神經(jīng)的保護(hù)作用。方法 萊亨母雞隨機(jī)分為2組，甲胺磷經(jīng)消化道染毒，從染毒后第2天開(kāi)始A、B組分別每天給鹽水和CTP1周，染毒后1、2、3、4、8周取雞坐骨神經(jīng)進(jìn)行電生理檢測(cè)。結(jié)果 甲胺磷致遲發(fā)性神經(jīng)病早期以軸索損害為主，繼之出現(xiàn)脫髓鞘改變，但各組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 ①利用甲胺磷染毒萊亨雞可成功構(gòu)建遲發(fā)性神經(jīng)病模型。②電生理檢測(cè)陽(yáng)性率高，且早于臨床體征的出現(xiàn)，是診斷遲發(fā)性神經(jīng)病的客觀指標(biāo)之一。③本病有自愈傾向，遠(yuǎn)期預(yù)后較好。

甲胺磷；遲發(fā)性神經(jīng)病；三磷酸胞苷二鈉；周圍神經(jīng)電生理

近年來(lái)，隨著有機(jī)磷農(nóng)藥中毒搶救成功率的提高，遲發(fā)性神經(jīng)病的發(fā)病率也呈上升趨勢(shì)，發(fā)生率5%左右[1]，因此對(duì)其發(fā)病進(jìn)行正確的評(píng)估及積極地預(yù)防治療是我們的重要任務(wù)。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用甲胺磷染毒leghorn雞，并在患雞出現(xiàn)肌無(wú)力等臨床表現(xiàn)前進(jìn)行神經(jīng)電生理檢測(cè)，評(píng)估CTP對(duì)OPIDN(遲發(fā)性神經(jīng)病)的預(yù)防及保護(hù)作用。

1 資料與方法

1.1 構(gòu)建動(dòng)物模型及實(shí)驗(yàn)分組 選取營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)良好的萊亨母雞(購(gòu)自長(zhǎng)春市生物制品所免疫室)50只，雞齡8～14個(gè)月，體質(zhì)量2 kg左右，單只飼養(yǎng)，用植物油溶解甲胺磷(購(gòu)自湖北沙隆達(dá)股份有限公司)，濃度為5 mg/ml，雞斷食24 h后，依照2 ml/kg灌入甲胺磷，分別于染毒前20 min、染毒后3、6、10 h肌肉注射阿托品(購(gòu)自河北省鄭州獸藥廠)保持度過(guò)急性期。A組為鹽水組，染毒后連續(xù)一周肌注生理鹽水(1 ml/kg)。B組為CTP(購(gòu)自北京三九萬(wàn)東藥業(yè)有限責(zé)任公司)組(濃度3 mg/ml)，染毒后連續(xù)一周肌注1 ml/kg。

1.2 標(biāo)本的留取及電生理檢測(cè) 染毒后1、2、3、4、8周隨機(jī)留取標(biāo)本。雞固定在特制木板上，室溫25℃，腹腔注射水合氯醛麻醉，下肢去皮，從髂關(guān)節(jié)至膝關(guān)節(jié)，沿坐骨神經(jīng)走行剝離肌肉，游離坐骨神經(jīng)，取坐骨神經(jīng)長(zhǎng)約3 cm浸于臺(tái)式液中，除去周圍脂肪組織，其后應(yīng)用生物信號(hào)記錄儀(澳大利亞艾德公司生產(chǎn)，吉林大學(xué)生理實(shí)驗(yàn)室提供)行電生理檢查。潛伏期為刺激偽跡前沿到動(dòng)作電位起始處時(shí)間間隔；波幅為上相波頂點(diǎn)與下相波的最低點(diǎn)之間的距離；運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度為兩記錄電極間距離除以兩動(dòng)作電位潛伏期差。

2 結(jié)果

2.1 臨床表現(xiàn) 甲胺磷染毒后5～10 min，雞出現(xiàn)萎靡、流涎、瞳孔縮小、喜臥的臨床表現(xiàn)，在第2～6天陸續(xù)出現(xiàn)死亡，共死亡6只，兩組間比較無(wú)差異，實(shí)驗(yàn)組平均死亡率為12%。經(jīng)過(guò)1周后，雞開(kāi)始出現(xiàn)全身無(wú)力，喜臥，后出現(xiàn)行走不穩(wěn)，重者出現(xiàn)站立困難，沒(méi)有完全癱瘓者，至第4周肌力幾乎恢復(fù)正常，兩組總體發(fā)病率(15.9%)，組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 波幅檢測(cè)結(jié)果 第1周，波幅呈明顯降低，其后2，3周波幅逐漸恢復(fù)，至第4周波幅已近恢復(fù)正常。兩實(shí)驗(yàn)組比較差異無(wú)顯著性。詳見(jiàn)表1。

2.3 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度檢測(cè)結(jié)果 第2周開(kāi)始出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度減慢，第3、4周持續(xù)出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度減慢，至第8周運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度已基本恢復(fù)正常。各個(gè)實(shí)驗(yàn)組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。詳見(jiàn)表2。

表1 各實(shí)驗(yàn)組波幅變化

注：組內(nèi)比較1、2、3與4、8周間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)

表2 各實(shí)驗(yàn)組運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度變化

注：組內(nèi)比較1、8周與2、3、4周間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)

3 討論

甲胺磷是一種高毒、低殘留、廣譜應(yīng)用的有機(jī)磷殺蟲劑[2]。消化道，呼吸道和皮膚接觸均可導(dǎo)致急性中毒，但消化道途徑中毒后，發(fā)生遲發(fā)性神經(jīng)病的可能性最大。不同種屬的動(dòng)物對(duì)有機(jī)磷的敏感性也不盡相同，人和雞相對(duì)敏感。[3]。我們應(yīng)用甲胺磷染毒萊亨母雞，發(fā)現(xiàn)在染毒后1～2周先后出現(xiàn)了波幅及運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度改變(陽(yáng)性率90%)，2周出現(xiàn)不同程度的肌無(wú)力表現(xiàn)(總發(fā)病率15.9%)，成功的構(gòu)建了遲發(fā)性神經(jīng)病的動(dòng)物模型。

本研究發(fā)現(xiàn)染毒后1周出現(xiàn)波幅明顯降低，說(shuō)明早期神經(jīng)損傷表現(xiàn)為軸索變性，2周開(kāi)始出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度減慢，提示出現(xiàn)脫髓鞘改變，這與神經(jīng)病理檢查結(jié)果相吻合。同時(shí)發(fā)現(xiàn)波幅降低(染毒后1周)明顯早于肌無(wú)力(染毒后2周)的出現(xiàn)，電生理檢查的陽(yáng)性率(90%)也明顯高于臨床表現(xiàn)的陽(yáng)性率(15.9%)，而肌無(wú)力癥狀的恢復(fù)(4周)明顯早于波幅及神經(jīng)傳導(dǎo)速度的恢復(fù)(8周)。因此，我們認(rèn)為有機(jī)磷農(nóng)藥中毒的患者，即使成功渡過(guò)急性期，仍需定期隨訪，及時(shí)發(fā)現(xiàn)遲發(fā)性周圍神經(jīng)損害。神經(jīng)電生理檢查不但能夠發(fā)現(xiàn)早期周圍神經(jīng)損害，對(duì)神經(jīng)修復(fù)的預(yù)后判定也是一重要指標(biāo)。

目前有機(jī)磷中毒性遲發(fā)性神經(jīng)病尚無(wú)特異的治療方法。虞炳慶等應(yīng)用激素治療25例OPIDN患者，發(fā)現(xiàn)其能顯著提高遲發(fā)性神經(jīng)病1年內(nèi)痊愈顯效率[4]，但有4例出現(xiàn)柯興氏征，因此開(kāi)發(fā)和應(yīng)用新藥取替它是我們緊迫的任務(wù)。CTP為核苷酸類藥物，在機(jī)體內(nèi)參與磷脂類及核酸的合成和代謝。具有營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)，提高神經(jīng)細(xì)胞抗損傷能力，增強(qiáng)神經(jīng)細(xì)胞活性，促進(jìn)神經(jīng)突起生長(zhǎng)的作用。王敏等[5]對(duì)22例有機(jī)磷中毒后遲發(fā)性神經(jīng)病患者進(jìn)行為期10～14 d的CTP治療，發(fā)現(xiàn)總有效率達(dá)77%。本實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用CTP進(jìn)行早期干預(yù)治療，但各時(shí)間點(diǎn)電生理檢測(cè)組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明該藥并不能阻止遲發(fā)性神經(jīng)病的發(fā)生，至第8周，電生理檢測(cè)結(jié)果已近恢復(fù)正常，提示本病有自愈傾向。為了在OPIDN治療上有所突破，還應(yīng)進(jìn)行發(fā)病機(jī)制方面的相關(guān)研究。

[1] 王漢斌，阮金秀.急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒致臟器損害與并發(fā)癥的防治.中華急診醫(yī)學(xué)雜志，2001，10：285-287.

[2] 范永仙, 陳小龍, 姜曉平,等.甲胺磷農(nóng)藥的生物降解研究進(jìn)展. 微生物學(xué)雜志，2002，22: 45-47.

[3] 郭斌，郭麗華，郭洪志，等.有機(jī)磷中毒引起的遲發(fā)性神經(jīng)病的臨床與電生理研究.中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志，1997，14：186-187.

[4] 虞炳慶，劉保群，芮曉東，等.糖皮質(zhì)激素治療有機(jī)磷農(nóng)藥中毒后遲發(fā)神經(jīng)病的療效觀察.臨床神經(jīng)病學(xué)雜志，1995，11：46-47.

[5] 王敏，李華，王桂華，等.三磷酸胞苷二鈉在有機(jī)磷中毒后遲發(fā)性神經(jīng)病中的應(yīng)用.中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2007,1:19-20.

130021吉林省人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科(胡軼虹 譚興文 張征驕);吉林大學(xué)第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科(江新梅)

江新梅