井大煒,邢尚軍
(1德州學(xué)院,山東德州253023;2山東省林業(yè)科學(xué)研究院,山東濟(jì)南250014)
土壤生物學(xué)活性主要指土壤微生物和酶活性。土壤微生物是土壤中各種生物化學(xué)過(guò)程的主要調(diào)節(jié)者,微生物量碳、氮被認(rèn)為是土壤活性養(yǎng)分的儲(chǔ)存庫(kù),是植物生長(zhǎng)可利用養(yǎng)分的重要來(lái)源[1]。土壤酶是土壤中動(dòng)植物殘?bào)w分解、植物根系分泌和土壤微生物代謝的產(chǎn)物,是一類(lèi)具有生物化學(xué)催化活性的特殊物質(zhì),參與土壤中許多重要的生物化學(xué)過(guò)程,如腐殖質(zhì)的合成與分解,有機(jī)化合物、高等植物和微生物殘?bào)w的分解及其轉(zhuǎn)化等[2]。土壤中的酶和微生物活性高低可以代表土壤中物質(zhì)代謝的旺盛程度,在一定程度上反映作物對(duì)養(yǎng)分吸收利用與生長(zhǎng)發(fā)育狀況等,是土壤肥力的一個(gè)重要指標(biāo)[2-4]。
近年來(lái),許多學(xué)者對(duì)施用化肥[5-6]、豬圈肥[7]、芝麻餅肥[8]、秸稈還田[9-10]和連年翻壓綠肥[11]等處理下微生物量和酶活性的變化進(jìn)行了深入的研究,而且主要集中在小麥、玉米和烤煙等作物,而對(duì)雞糞有機(jī)肥及楊樹(shù)根際土壤微生物等方面的研究較少。雞糞是植物生產(chǎn)中優(yōu)質(zhì)的有機(jī)肥,富含氮、磷、鉀等植物所必需的養(yǎng)分,與其他家畜家禽糞便相比養(yǎng)分含量居于首位;與餅肥中氮、磷、鉀含量相當(dāng),且養(yǎng)分比例變幅小,是優(yōu)質(zhì)天然復(fù)合肥[12]。利用雞糞生產(chǎn)制成的有機(jī)肥和有機(jī)無(wú)機(jī)復(fù)合肥對(duì)農(nóng)作物增產(chǎn)明顯。據(jù)統(tǒng)計(jì),在西瓜、西蘭花、茶葉、紅茄、大白菜、楊梅等作物上施用雞糞有機(jī)肥,增產(chǎn)幅度在15% ~25%之間[12]。在果蔗上長(zhǎng)期施用雞糞有機(jī)肥,可以改變土壤結(jié)構(gòu),使板結(jié)的土壤松化,增加透氣性和保肥性[13]。關(guān)于雞糞有機(jī)肥對(duì)楊樹(shù)苗根際土壤酶活性及微生物量碳、氮的影響,尤其對(duì)楊樹(shù)苗在年生長(zhǎng)過(guò)程內(nèi)系統(tǒng)的動(dòng)態(tài)變化研究尚未見(jiàn)報(bào)道。為此,本試驗(yàn)以山東省濟(jì)寧市三環(huán)化工有限公司生產(chǎn)的雞糞有機(jī)肥為供試原料,開(kāi)展了雞糞有機(jī)肥與化肥的不同搭配比例對(duì)一年生I-107歐美楊在不同生長(zhǎng)時(shí)期內(nèi)根際土壤酶活性和土壤微生物量碳、氮的動(dòng)態(tài)變化研究,以期揭示不同施肥處理根際土壤的生物化學(xué)過(guò)程的變化規(guī)律,為探討施用雞糞有機(jī)肥對(duì)楊樹(shù)苗根際土壤的作用機(jī)理提供理論依據(jù),并且為楊樹(shù)苗的培育和施肥管理提供技術(shù)參考。
試驗(yàn)設(shè)在山東省林業(yè)科學(xué)研究院試驗(yàn)苗圃,供試土壤為潮土,有機(jī)質(zhì)含量6.83 g/kg,全氮0.52 g/kg,速效氮 27.96 mg/kg,速效磷 26.52 mg/kg,速效鉀 79 mg/kg,電導(dǎo)率 24.3 μS/m,pH 8.08。供試雞糞有機(jī)肥為山東省濟(jì)寧市三環(huán)化工有限公司提供,N、P2O5和K2O含量分別為1.22%,1.33%和2.71%,有機(jī)質(zhì)含量24.18%,含水量29.02%。所用化肥為尿素、過(guò)磷酸鈣、氯化鉀。楊樹(shù)扦插苗品種為I-107歐美楊,接穗長(zhǎng)15~16 cm,莖粗2 cm,重量25~27 g。
采用盆栽試驗(yàn),設(shè)5個(gè)處理:CK,不施肥;N100,100% 的氮由尿素提供(尿素7.72 g);M10N90,10%的氮由雞糞有機(jī)肥提供(雞糞有機(jī)肥37.54 g),90%的氮由尿素提供(尿素6.95 g);M30N70,30%的氮由雞糞有機(jī)肥提供(雞糞有機(jī)肥112.62 g),70%的氮由尿素提供(尿素5.40 g);M50N50,50%的氮由雞糞有機(jī)肥提供(雞糞有機(jī)肥187.70 g),50%的氮由尿素提供(尿素3.86 g)。每個(gè)處理20盆,共計(jì)100盆。隨機(jī)區(qū)組排列,除CK外,各處理均為等養(yǎng)分量,N、P和K含量分別為3.55、1.94、3.94 g,各處理P和K不足部分分別用過(guò)磷酸鈣、氯化鉀補(bǔ)足。試驗(yàn)用盆為塑料盆,盆高20 cm、寬30 cm。于2011年4月13日盆栽試驗(yàn)時(shí),將肥料與土壤充分混勻后裝盆,每盆裝土10.5 kg。
分別在施肥后的30 d、60 d、90 d、120 d、150 d和180 d采集土壤樣品,每次每個(gè)處理采3盆。在土壤水分含量適中時(shí)采用剝落分離法[14]取樣,將帶土植株取出,先輕輕抖落大塊不含根系的土壤,然后用力將根表面附著的土壤全部抖落下來(lái),迅速裝入塑料袋內(nèi)(根際土)。部分新鮮樣品立即進(jìn)行土壤微生物碳、氮的測(cè)定,部分土樣風(fēng)干過(guò)篩后進(jìn)行土壤酶活性測(cè)定。土壤酶活性和微生物量碳、氮均為每處理3盆土樣分別測(cè)定。
土壤微生物量碳、氮用氯仿熏蒸法[15-16]測(cè)定;土壤脲酶用苯酚鈉-次氯酸鈉比色法;磷酸酶用磷酸苯二鈉比色法;過(guò)氧化氫酶用KMnO4滴定法;蔗糖酶用Na2S2O3滴定法[17]測(cè)定。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS 9.2和Excel 2003軟件進(jìn)行分析。
2.1.1對(duì)根際土壤脲酶活性的影響 不同處理的脲酶活性動(dòng)態(tài)變化規(guī)律相似,均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)(圖1)。在生長(zhǎng)前期(30~60 d)時(shí),各處理的脲酶活性緩慢上升,但從生長(zhǎng)前期進(jìn)入快速生長(zhǎng)期(90 d)時(shí),各處理均有迅速升高的趨勢(shì),并在120 d時(shí)達(dá)到了最大值,此時(shí)M30N70處理的脲酶活性分別比其他處理提高了49.04%、26.49%、12.50%和7.83%,隨后逐漸降低。各處理在楊樹(shù)苗不同生長(zhǎng)時(shí)期內(nèi)的總體變化規(guī)律為 M30N70>M50N50>M10N90>N100>CK,表明施肥明顯增加了根際土壤的脲酶活性。在各施肥處理中,雞糞配施處理顯著高于單施化肥處理,以 M30N70處理最高,比對(duì)照提高了24.51%~49.04%,比單施化肥處理提高了14.41%~26.49%。在雞糞有機(jī)肥配施的三個(gè)處理中,M10N90與M50N50的脲酶活性均顯著低于M30N70。可見(jiàn),在雞糞有機(jī)肥與化肥的不同配施處理中,隨著雞糞有機(jī)肥比例的增加,脲酶活性呈先升高后降低的趨勢(shì)。因此,并非雞糞有機(jī)肥所占的比例越大,土壤的脲酶活性就越強(qiáng)。
2.1.2對(duì)根際土壤堿性磷酸酶活性的影響 各處理的堿性磷酸酶活性均呈先降低后升高再降低的趨勢(shì)(圖2)。所有處理均在120 d時(shí)出現(xiàn)峰值,此時(shí)楊樹(shù)苗正處于快速生長(zhǎng)期,M30N70處理最高,分別比CK、N100、M10N90和 M50N50提高了 23.18%、20.00%、7.51%和8.77%,隨后開(kāi)始緩慢的下降。
圖1 不同處理對(duì)根際土壤脲酶活性的影響Fig.1 Effects of different treatments on urease activity in rhizosphere soil
在楊樹(shù)苗的年生長(zhǎng)進(jìn)程中,各處理堿性磷酸酶活性的變化規(guī)律為M30N70>M10N90≈M50N50>N100≈CK。M30N70顯著高于其他處理,比 N100提高了13.87% ~27.93%;N100處理與CK差異不顯著,可能是由于對(duì)照土壤缺磷,土壤供磷能力遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足作物生長(zhǎng)的需要,因此作物根系分泌較多的磷酸酶,以促進(jìn)土壤中有機(jī)磷化合物水解,生成可以被植物所利用的無(wú)機(jī)態(tài)磷,這是作物適應(yīng)營(yíng)養(yǎng)環(huán)境的一種機(jī)制[18]。配施雞糞有機(jī)肥的處理均顯著高于單施化肥處理,說(shuō)明配施雞糞可促進(jìn)土壤堿性磷酸酶活性的提高。另外,在配施雞糞有機(jī)肥處理中,M10N90與M50N50差異不顯著,這表明楊樹(shù)苗根際土壤堿性磷酸酶活性并不隨著雞糞有機(jī)肥所占比例的增加而提高,而是取決于雞糞有機(jī)肥與化肥的搭配比例。
圖2 不同處理對(duì)根際土壤堿性磷酸酶活性的影響Fig.2 Effects of different treatments on alkaline phosphatase activity in rhizosphere soil
2.1.3對(duì)根際土壤過(guò)氧化氫酶活性的影響 各處理的過(guò)氧化氫酶活性均表現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)(圖3)。在施肥后120 d,所有處理均達(dá)到了最大值,其中,M30N70處理的過(guò)氧化氫酶活性最高,分別比 CK、N100、M10N90和 M50N50,提高了 32.37%、21.16%、10.63%和8.53%。之后各處理均開(kāi)始迅速下降,至落葉期(180 d)時(shí)達(dá)到了最低值,相比最大值分別降低了 58.96%、49.21%、44.93%、42.79%和44.55%。在楊樹(shù)苗不同的生長(zhǎng)時(shí)期內(nèi),各處理根際土壤過(guò)氧化氫酶活性的變化規(guī)律為M30N70>M10N90≈M50N50>N100>CK。M30N70處理分別比CK提高了12.33% ~71.83%,比N100處理提高了12.07% ~27.08%;M10N90處理與M50N50處理差異不顯著,但均顯著高于CK和N100處理。施肥后80~130 d是楊樹(shù)苗快速生長(zhǎng)、干物質(zhì)積累最大的時(shí)期,也是楊樹(shù)苗對(duì)營(yíng)養(yǎng)元素吸收量最大的階段。此時(shí)過(guò)氧化氫酶活性處于較高值,可以解除楊樹(shù)苗快速生長(zhǎng)積累的過(guò)氧化氫等物質(zhì)產(chǎn)生的毒害,說(shuō)明過(guò)氧化氫酶活性與楊樹(shù)苗生長(zhǎng)發(fā)育進(jìn)程密切相關(guān)。
圖3 不同處理對(duì)根際土壤過(guò)氧化氫酶活性的影響Fig.3 Effects of different treatments on catalase activity in rhizosphere soil
2.1.4對(duì)根際土壤蔗糖酶活性的影響 所有施肥處理的蔗糖酶活性均顯著高于CK,說(shuō)明施肥能明顯提高根際土壤的蔗糖酶活性(圖4)。各處理均呈現(xiàn)先升高后降低又緩慢升高的變化趨勢(shì)。施肥后30~120 d期間,各處理均處于上升的趨勢(shì),在120 d時(shí)達(dá)到最大值,之后開(kāi)始顯著下降,在150 d之后又開(kāi)始緩慢升高。
在120 d時(shí),M30N70處理分別比 CK、N100、M10N90和 M50N50處理提高了 47.62%、29.17%、9.81%和8.04%;同 N100處理相比,M10N90、M30N70和M50N50處理分別提高了17.63%、29.17%和19.55%。在整個(gè)生育期內(nèi),M30N70處理的蔗糖酶活性比N100處理提高了29.17% ~46.43%,比CK提高了47.62% ~66.67%。而 M10N90和 M50N50處理分別比 N100處理提高了 14.63% ~27.09%和19.55%~44.33%。說(shuō)明配施雞糞有機(jī)肥比單施化肥更有利于提高土壤蔗糖酶的活性。在3個(gè)配施雞糞有機(jī)肥處理中,隨著雞糞有機(jī)肥所占比例的提高,蔗糖酶活性呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)。
圖4 不同處理對(duì)根際土壤蔗糖酶活性的Fig.4 Effects of different treatments on invertase activity in rhizosphere soil
2.2.1對(duì)根際土壤微生物量碳的影響 各施肥處理的SMBC含量均顯著高于CK(表1)。施肥后60 d,CK達(dá)到了最大值,在90 d時(shí)就出現(xiàn)了缺肥癥狀,葉子發(fā)黃,根系活性降低,因而土壤微生物活性也降低。而N100、M10N90、M30N70和M50N50處理隨著楊樹(shù)苗的快速生長(zhǎng)發(fā)育、根系分泌量的增加及氣溫的不斷提高,SMBC含量在增加,到90 d時(shí)達(dá)到高峰,之后開(kāi)始迅速地下降。與N100處理相比,M10N90、M30N70和M50N50處理的下降更快。施肥后180 d(落葉期),各處理SMBC含量稍微有所回升,與施肥后150 d相比,分別增加了 27.56、14.14、36.31、35.35和30.73 mg/kg。從楊樹(shù)苗的年生長(zhǎng)進(jìn)程來(lái)看,3個(gè)雞糞有機(jī)肥與化肥配施的處理一直顯著高于CK和N100處理;M10N90、M30N70和 M50N50處理分別比N100處理提高了47.11~68.39%、63.00% ~76.62%和52.90% ~70.87%。
可見(jiàn),隨著雞糞有機(jī)肥所占比例的增加,SMBC含量呈先增加后減少的趨勢(shì)。在雞糞有機(jī)肥與化肥的不同配施中,M30N70的SMBC含量最大。結(jié)果表明,配施雞糞有機(jī)肥對(duì)SMBC含量具有明顯的影響,其作用效果取決于雞糞有機(jī)肥與化肥的搭配比例。
2.2.2對(duì)根際土壤微生物量氮的影響 在楊樹(shù)苗的不同生長(zhǎng)時(shí)期內(nèi),總的變化規(guī)律為:施肥后30 d各處理土壤SMBN含量達(dá)到最高值,隨生育進(jìn)程明顯下降,落葉期呈現(xiàn)回升趨勢(shì)(表2)。施肥后30 d,各施肥處理的SMBN含量均顯著高于CK。與N100相比,雞糞與化肥配施的3個(gè)處理均顯著提高了SMBN含量。M30N70處理的 SMBN含量顯著高于CK、N100、M10N90和 M50N50處理,分別提高了142.17%、82.77%、20.90%和15.11%。施肥后60 d,各處理的SMBN含量均出現(xiàn)不同程度的下降,其中CK的SMBN含量在施肥后90 d最早降為最低值,可能是因?yàn)橥寥赖貭I(yíng)養(yǎng)不能滿(mǎn)足楊樹(shù)苗生長(zhǎng)的需求,土壤微生物不得不加速自身礦化來(lái)提供養(yǎng)分,說(shuō)明在沒(méi)有氮肥投入的情況下,土壤微生物生物量氮也能夠?yàn)樽魑锷L(zhǎng)提供一定量的氮素養(yǎng)分。而各施肥處理的SMBN含量繼續(xù)下降,在施肥后150 d達(dá)到了最低值;在落葉期(180 d)時(shí),各處理的SMBN含量均有不同程度的升高。
表1 不同處理對(duì)根際土壤微生物量碳的影響(mg/kg)Table 1 Effects of different treatments on SMBC in rhizosphere soil
表2 不同處理對(duì)根際土壤微生物量氮的影響(mg/kg)Table 2 Effects of different treatments on SMBN in rhizosphere soil
在楊樹(shù)苗的年生長(zhǎng)進(jìn)程中,雞糞配施處理均顯著地高于對(duì)照和單施化肥處理,其中M30N70處理的SMBN含量一直處于最高,分別比CK和N100提高了83.20% ~269.41%和40.01% ~90.38%。可見(jiàn),在3個(gè)雞糞有機(jī)肥與化肥的不同配施處理中,隨著雞糞有機(jī)肥比例的增加,SMBN含量呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),這與SMBC含量變化規(guī)律相似。
武雪萍等[8]研究表明,芝麻餅肥和化肥配施與單施化肥相比,能顯著提高根際土壤的脂肪酶、轉(zhuǎn)化酶和脲酶活性。李娟等[10]和程?hào)|娟等[19]通過(guò)田間有機(jī)無(wú)機(jī)肥料定位培肥試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),有機(jī)無(wú)機(jī)肥料配施可明顯增加土壤脲酶和堿性磷酸酶活性,并且明顯高于單施化肥。本研究結(jié)果與前人的報(bào)道基本一致,雞糞有機(jī)肥與化肥配施明顯增強(qiáng)了土壤酶活性,不僅蔗糖酶、脲酶和堿性磷酸酶活性均顯著高于對(duì)照和單施化肥處理,而且過(guò)氧化氫酶活性亦符合這個(gè)規(guī)律。原因可能是:1)雞糞有機(jī)肥和化肥配施有利于改善土壤理化性質(zhì),調(diào)節(jié)土壤C/N,促進(jìn)楊樹(shù)苗和土壤微生物的生長(zhǎng),提高土壤酶活性;2)雞糞有機(jī)肥的施用可以為土壤酶提供更多、更豐富的酶促基質(zhì),發(fā)揮底物誘導(dǎo)作用;3)施用雞糞有機(jī)肥可以提高土壤腐殖質(zhì)含量,而腐殖質(zhì)能夠通過(guò)離子交換、離子鍵或共價(jià)鍵等與土壤酶結(jié)合,固定土壤酶[20-21]。本試驗(yàn)結(jié)果還可看出,在雞糞有機(jī)肥與化肥的不同比例搭配中,比例為3∶7的效果好于1∶9和5∶5的比例。這一方面可能是因?yàn)殡u糞有機(jī)肥與化肥以3∶7的比例配施更好地調(diào)節(jié)了土壤的C/N,改善了土壤理化性質(zhì),有助于增強(qiáng)根系活性,促進(jìn)楊樹(shù)苗的旺盛生長(zhǎng),從而使根系分泌較多的酶類(lèi)進(jìn)入土壤;另一方面可能是由于3∶7的比例搭配也促進(jìn)了土壤動(dòng)物的生長(zhǎng)和微生物的繁殖,加速了有機(jī)物的分解,為土壤酶提供了更多的底物。
許多研究已經(jīng)證明微生物量是土壤中有機(jī)質(zhì)養(yǎng)分的一種短暫而最有效的貯存形式,是土壤養(yǎng)分的源和庫(kù)[22]。土壤微生物量作為土壤肥力水平的活指標(biāo),已日漸受到土壤科學(xué)工作者的關(guān)注,研究土壤微生物生物量對(duì)了解土壤養(yǎng)分轉(zhuǎn)化及循環(huán)具有重要意義[23]。本研究結(jié)果表明,在楊樹(shù)苗的年生長(zhǎng)過(guò)程中,雞糞有機(jī)肥配施處理的SMBC、SMBN含量均顯著高于對(duì)照和單施化肥處理,這與 Goyal等[24]和Simek等[25]的研究結(jié)果一致。這是由于施肥直接增加根系生物量及根系分泌物,促進(jìn)微生物生長(zhǎng);同時(shí)施用有機(jī)肥不但增加了土壤養(yǎng)分,也為微生物提供了充足的碳源,這也證明了雞糞有機(jī)肥配施下有較多的氮素通過(guò)同化作用轉(zhuǎn)入到微生物體內(nèi)被暫時(shí)固定,相應(yīng)地減少了通過(guò)NH3揮發(fā)和NO-3淋失以及反硝化脫氮等途徑造成的氮素?fù)p失。這對(duì)調(diào)節(jié)土壤氮素供應(yīng)、提高土壤氮素利用率、保護(hù)大氣環(huán)境、防止水資源污染和保證林業(yè)可持續(xù)發(fā)展都具有積極意義[26]。
本研究還發(fā)現(xiàn),試驗(yàn)各處理SMBN含量在楊樹(shù)苗的生育過(guò)程中表現(xiàn)為施肥初期升高,隨生育進(jìn)程推進(jìn)逐漸下降,落葉期有一定回升的趨勢(shì)。這與羅蘭芳等[27]報(bào)道一致,這一變化趨勢(shì)的產(chǎn)生與楊樹(shù)苗對(duì)養(yǎng)分的吸收,土壤微生物活動(dòng)以及外界氣溫的變化有關(guān)。施肥初期(30 d),各處理SMBN含量達(dá)到最高。其主要原因有:1)施入土壤的氮肥迅速釋放,土壤礦質(zhì)氮含量達(dá)到最高,而楊樹(shù)正處于苗期,生長(zhǎng)緩慢,對(duì)土壤養(yǎng)分的吸收能力很弱;2)隨著楊樹(shù)苗根系的成活,根系分泌物增多,為微生物的活動(dòng)增加了能源;3)土壤溫度的上升,根系周?chē)寥牢⑸锘钚匝杆僭鰪?qiáng),土壤微生物對(duì)土壤中氮素開(kāi)始固持,使土壤微生物生物量增加。隨著生育進(jìn)程的推進(jìn),楊樹(shù)苗對(duì)土壤氮素養(yǎng)分的需求量增加,而各處理的SMBN含量逐漸降低,表明一部分微生物量氮又被釋放出來(lái),以供楊樹(shù)苗生長(zhǎng)發(fā)育的需要,這反映出土壤微生物量氮是植物有效氮的重要儲(chǔ)備以及在協(xié)調(diào)土壤氮素供應(yīng)方面的重要作用[28]。進(jìn)入落葉期,楊樹(shù)苗停止生長(zhǎng),地下根系逐漸衰老死亡,植株通過(guò)根系分泌物和殘?bào)w向土壤提供有機(jī)碳、氮,促進(jìn)了微生物生長(zhǎng),從而使 SMBC、SMBN含量增加[29]。此外,在雞糞有機(jī)肥與化肥的不同比例配施中,3∶7比例搭配處理的SMBC、SMBN含量均顯著高于1∶9和5∶5比例搭配處理??赡苁且?yàn)?∶7比例搭配更好地調(diào)節(jié)了土壤碳氮比,有利于土壤微生物的大量繁殖和微生物活性的提高,從而增加了土壤微生物生物量。
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