趙珩伊 余 冰 毛湘冰 何 軍 鄭 萍 黃志清 韓國全 虞 潔 陳代文

（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營養(yǎng)研究所，動(dòng)物抗病營養(yǎng)農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，雅安625014）

飼料中的霉菌毒素污染是困擾全球飼料生產(chǎn)廠家的一個(gè)重大問題。據(jù)調(diào)查顯示，世界上至少有25%的谷物受到霉菌毒素污染［1］。在我國，飼料和原料霉菌毒素超標(biāo)的比例高達(dá)60%～70%［2］。動(dòng)物的霉菌毒素中毒會(huì)降低其生長性能，抑制免疫機(jī)制，影響機(jī)體的健康，進(jìn)而帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，人們嘗試用多種方法（如化學(xué)法、物理分離法、放射法和熱失活法）來消除飼料霉菌毒素的毒性，但這些方法均難在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)用。而飼糧中添加霉菌毒素吸附劑，如水合硅鋁酸鈉鈣（hydrated sodium calcium aluminosilicates，HSCAS），是降低霉菌毒素危害的有效手段［3］。目前，以HSCAS為主要成分的霉菌毒素吸附劑作為美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）首次批準(zhǔn)的吸附劑產(chǎn)品，被最先用于飼料行業(yè)當(dāng)中。HSCAS之所以可以吸附霉菌毒素，主要源于其是一種層狀硅鋁酸鹽，利用其四面體－八面體－四面體層間多空結(jié)構(gòu)與表面形成的離子極性，強(qiáng)吸附同樣具有離子極性的霉菌毒素。但是，HSCAS是一種缺乏正電荷的層狀硅鋁酸鹽，有吸附富余正電荷或陽離子化合物的潛在可能。已有關(guān)于綿羊和雛雞的研究均表明，在HSCAS高效吸附飼糧中霉菌毒素的同時(shí)，也會(huì)對某些維生素和礦物元素進(jìn)行吸附［4－5］。目前，對 HSCAS的研究主要集中于其對飼料中霉菌毒素（特別是黃曲霉毒素）的吸附作用，但未見在正常飼糧（未添加霉菌毒素）中添加HSCAS對豬的安全性研究。因此，本試驗(yàn)以生長育肥豬為研究對象，旨在研究在飼糧中添加不同水平的HSCAS對生長育肥豬上生長性能、養(yǎng)分表觀消化率及抗氧化能力的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

HSCAS購于美國密爾白有限公司，有效成分含量95%以上。推薦用量為每噸飼糧中添加2.5kg。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選用（48.0±10.0）kg的健康“杜×長×大”生長豬45頭，按體重相近、各處理公母比例一致原則，隨機(jī)分為3個(gè)處理，每個(gè)處理5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3頭豬。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加0.25%和2.50%HSCAS的飼糧。試驗(yàn)分為48～80kg（前期）和81～110kg（后期）2階段進(jìn)行，試驗(yàn)期為70d，至豬體重達(dá)110kg左右結(jié)束。

1.3 試驗(yàn)飼糧

試驗(yàn)飼糧參照NRC（1998）豬營養(yǎng)需要配制，基礎(chǔ)飼糧為玉米－豆粕型，按試驗(yàn)設(shè)計(jì)分別以相應(yīng)劑量的HSCAS替換配方中的統(tǒng)糠配成試驗(yàn)飼糧?；A(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營養(yǎng)研究所教學(xué)科研試驗(yàn)基地進(jìn)行。試驗(yàn)期間豬舍溫度控制在25℃左右，自由采食和飲水，每日飼喂3次（08：00、12：00、18：00），少喂勤添，添加量以料槽內(nèi)略有余料為準(zhǔn)。保持圈舍通風(fēng)、衛(wèi)生、干燥，每天結(jié)算余料，并做好采食量記錄。

1.5 樣品采集與處理

1.5.1 飼料樣品的采集與處理

各處理飼料混合均勻后，多處均勻取樣。將同一處理的飼料再混合，粉碎后過40目篩，－20℃保存。

1.5.2 糞便樣品的采集與處理

于試驗(yàn)第38天和第66天開始，連續(xù)4d收集新鮮糞樣，準(zhǔn)確稱重，按每100g糞樣滴加10mL 10%的硫酸，另加幾滴甲苯防腐，混勻置于－20℃冰箱保存。每期試驗(yàn)結(jié)束后，將各處理4d的糞樣混勻，按10%的比例取樣，在65℃的條件下烘干，回潮24h，粉碎過40目篩，用樣品袋密封保存于－20℃待測。

1.5.3 血液樣品的采集

于試驗(yàn)的第42天和第70天，各重復(fù)選取1頭接近平均體重的豬進(jìn)行前腔靜脈采血20mL，低溫下靜置30min，3 000r/min離心15min，制備血清，于－20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets（air－dry basis） %

1.6 測定指標(biāo)及方法

1.6.1 生長性能

以重復(fù)為單位對初始及試驗(yàn)第42天和第70天豬只進(jìn)行空腹稱重，以重復(fù)為單位記錄耗料量，計(jì)算每階段及全期平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.6.2 血清尿素氮（urea nitrogen，UN）

血清UN含量采用脲酶法測定［6］，試劑盒購于南京建成生物工程研究所。

1.6.3 養(yǎng)分表觀消化率

采用4mol/L鹽酸不溶灰分內(nèi)源指示劑法測定養(yǎng)分表觀消化率。按照國際官方分析化學(xué)家協(xié)會(huì)（AOAC）的方法測定飼料樣品和糞樣中粗蛋白質(zhì)（CP）、粗灰分（Ash）、能量、鈣（Ca）和磷（P）的含量，根據(jù)食入養(yǎng)分量和排出養(yǎng)分量計(jì)算各養(yǎng)分表觀消化率。

養(yǎng)分表觀消化率（%）＝100-［100×（b×c）/（a×d）］。

式中：a為飼料中某養(yǎng)分含量；c為飼料中鹽酸不溶灰分含量；b為糞樣中某養(yǎng)分含量；d為糞樣中鹽酸不溶灰分含量。

1.6.4 抗氧化指標(biāo)的測定

總 抗 氧 化 能 力 （total anti－oxidation capability，T－AOC）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性和丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量分別采用比色法、亞硝酸鹽法和硫代巴比妥酸（TBA）法［7］進(jìn)行測定，試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。

1.7 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2007進(jìn)行整理，采用SAS 8.2軟件的ANOVA程序進(jìn)行方差分析，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，差異顯著時(shí)進(jìn)行Duncan氏法多重比較，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié) 果

2.1 HSCAS對生長育肥豬生長性能和和血清UN含量的影響

由表2可知，與對照組相比，0.25%HSCAS添加組對豬各階段的ADFI、ADG、F/G和血清UN含量均無顯著影響（P＞0.05），但2.50%HSCAS添加組顯著提高了后期和全期的F/G（P＜0.05），前期和后期血清UN含量分別顯著提高了17.06%和19.46%（P＜0.05）。

表2 HSCAS對生長育肥豬生長性能和血清UN含量的影響Table 2 Effects of HSCAS on growth performance and serum UN content of growing－finishing pigs

2.2 HSCAS對生長育肥豬養(yǎng)分表觀消化率的影響

由表3可知，在試驗(yàn)前期，各處理CP、能量、Ca和P的表觀消化率均無顯著差異（P＞0.05）；與對照組相比，0.25%HSCAS添加組Ash的表觀消化率無顯著差異（P＞0.05），但2.50%HSCAS添加組Ash的表觀消化率顯著降低了29.57%（P＜0.05）。 在 試 驗(yàn) 后 期，0.25% 和 2.50%HSCAS添加組CP的表觀消化率分別比對照組顯著降低了3.16%和6.23%（P＜0.05），能量的表觀消化率分別比對照組顯著降低了1.53%和1.55%（P＜0.05）；Ash的表觀消化率與第1階段規(guī)律一致。各階段不同處理豬的Ca、P表觀消化率均無顯著差異（P＞0.05）。

表3 HSCAS對生長育肥豬養(yǎng)分表觀消化率的影響Table 3 Effects of HSCAS on nutrient apparent digestibility of growing－finishing pigs

2.3 HSCAS對生長育肥豬抗氧化能力的影響

由表4可知，隨著HSCAS添加水平的增加，試驗(yàn)前期血清T－AOC和SOD活性均有所下降（P＞0.05），MDA 含量有所升高（P＞0.05）。試驗(yàn)后期呈相同規(guī)律，且2.50%HSCAS添加組血清MDA含量比0.25%HSCAS添加組顯著提高了55.85%（P＜0.05），血清 T－AOC分別比對照組和0.25%HSCAS添加組顯著降低了30.73%和26.11%（P＜0.05），SOD活性分別比對照組和0.25%HSCAS添加組降低了12.78%（P＜0.05）和7.27%（P＞0.05）。

表4 HSCAS對生長育肥豬抗氧化能力的影響Table 4 Effects of HSCAS on antioxidant ability of growing－finishing pigs

3 討 論

3.1 HSCAS對生長育肥豬生長性能的影響

本試驗(yàn)中，與對照組相比，飼糧中添加0.25%HSCAS對生長育肥豬生長性能無顯著影響，但當(dāng)飼糧中添加2.50%HSCAS時(shí)，生長育肥豬F/G顯著提高。徐軍等［8］發(fā)現(xiàn)，通過在肉仔雞飼糧中添加3和5g/kg的蒙脫石（主要成分為HSCAS）有提高雞的ADFI和ADG的趨勢，但對F/G無影響；Gowda等［9］指出，在綿羊飼糧中添加5g/kg的HSCAS對其F/G無顯著影響；Ledoux等［10］的研究也發(fā)現(xiàn)，在肉仔雞飼糧中添加1g/kg的HSCAS未影響其生長性能。本試驗(yàn)結(jié)果與以上結(jié)果不完全一致，這可能主要源于飼糧中吸附劑添加劑量的差異。另外，飼糧中添加2.50%HSCAS導(dǎo)致生長育肥豬生長性能下降，可能是源于過量的HSCAS吸附了飼料中的營養(yǎng)物質(zhì)，降低了飼料的營養(yǎng)價(jià)值和利用率，從而抑制了豬的生長。

UN是蛋白質(zhì)代謝的主要終末產(chǎn)物，可以在一定程度上反映動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)的代謝狀況和氨基酸的平衡狀況，氨基酸平衡可降低血清UN含量，提高氮在體內(nèi)的沉積，飼料中蛋白質(zhì)利用率提高［11－13］。Abdel－Wahhab等［13］研 究 表 明，在 大 鼠飼糧中添加5g/kg的蒙脫石會(huì)顯著升高大鼠血清UN含量。而Georgievskii等［14］研究表明，在公豬飼糧中添加3g/kg的HSCAS對其血清UN含量并無顯著影響。本試驗(yàn)中，飼糧中添加0.25%HSCAS對生長育肥豬血清UN含量無顯著影響，但當(dāng)HSCAS添加劑量達(dá)到2.50%時(shí)，生長育肥豬血清UN含量顯著升高。以上研究間均存在不同程度的差異，其原因可能與HSCAS添加劑量和試驗(yàn)動(dòng)物的差異有關(guān)。而在本試驗(yàn)中，飼糧中添加2.50%HSCAS顯著提高了生長育肥豬的血清UN含量，表明其對飼料中蛋白質(zhì)的利用率降低，這也可能是飼糧中添加2.50%HSCAS影響生長育肥豬生長性能的原因之一。

3.2 HSCAS對生長育肥豬養(yǎng)分表觀消化率的影響

Edwards［15］和Schell等［16］的研究發(fā)現(xiàn)，在雛雞飼糧中添加1%的沸石會(huì)顯著降低植酸磷在體內(nèi)的沉積。但 Chestnut等［4］與 Chung等［17］研 究 表明，在綿羊或雛雞飼糧中添加1%或2%HSCAS時(shí)，不會(huì)影響其對Ca、P的利用率。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在生長育肥豬飼糧中添加0.25%和2.50%HSCAS對其Ca、P的表觀消化率無顯著影響。上述研究對于飼糧中添加HSCAS影響動(dòng)物Ca和P的利用率結(jié)果之間存在較大的差異，其可能源于HSCAS來源的差異和試驗(yàn)動(dòng)物種類不同。

本試驗(yàn)的結(jié)果也顯示，當(dāng)HSCAS添加劑量達(dá)到2.50%時(shí)，生長育肥豬對Ash的表觀消化率顯著 降 低。Chestnut 等［4］、Chung 等［5］與 Gowda等［18］研究均報(bào)道，飼糧中添加 HSCAS會(huì)削弱動(dòng)物（如肉雞、綿羊和奶牛等）對鋅的吸收；Gowda等［19］還指出，在羔羊飼糧中添加5g/kg HSCAS會(huì)降低機(jī)體對微量元素（銅、鋅、鐵、錳）的吸收。由此可推測，本試驗(yàn)中生長育肥豬對Ash吸收率的下降可能源于其對銅、鋅等微量元素消化率下降。另外，本試驗(yàn)中飼糧中添加HSCAS顯著降低了生長育肥豬后期CP和能量的表觀消化率，且隨添加劑量的增加而逐漸降低。這一結(jié)果在一定程度反映出飼糧中添加HSCAS影響了生長育肥豬對飼料營養(yǎng)成分的利用率，且與試驗(yàn)中生長育肥豬生長性能和血清UN含量的變化規(guī)律基本一致。

3.3 HSCAS對生長育肥豬抗氧化能力的影響

T－AOC是衡量機(jī)體抗氧化系統(tǒng)功能狀況的綜合指標(biāo)，它的大小可以反映機(jī)體抗氧化酶系統(tǒng)（SOD、谷胱甘肽過氧化物酶和過氧化氫酶等）和非酶系統(tǒng)（谷胱甘肽、維生素E、半胱氨酸和葡萄糖等）對外來刺激的代償能力以及機(jī)體自由基代謝的狀態(tài)［20］。血液中SOD活性和MDA含量是反映機(jī)體抗氧化能力的重要指標(biāo)［21－22］。

目前，對于HSCAS影響動(dòng)物機(jī)體抗氧化能力的研究多集中于飼喂霉菌毒素污染飼料的動(dòng)物模型中。Che等［23］研究發(fā)現(xiàn)，在受霉菌毒素污染的飼糧中添加0.2%HSCAS不能改善由霉菌毒素引起的雛雞肝臟SOD活性降低以及髓過氧化物歧化酶（MPO）活性升高；而 Gowda等［19］報(bào)道，在含黃曲霉毒素的飼糧中添加0.5%HSCAS可以改善肉雞的抗氧化能力；Abbes等［24］在含玉米赤霉烯酮的小鼠飼糧中添加0.50%HSCAS也取得了相同的效果。在本試驗(yàn)中，生長育肥豬飼糧中添加0.25%HSCAS對其抗氧化能力無顯著影響，但HSCAS添加水平達(dá)到2.50%時(shí)，試驗(yàn)后期生長育肥豬的抗氧化能力顯著降低，即T－AOC和SOD活性均顯著降低，MDA含量顯著升高。這表明長時(shí)間飼喂生長育肥豬添加較高劑量HSCAS的正常飼糧會(huì)降低機(jī)體的抗氧化能力。已有的研究表明，飼糧中銅、鋅、錳的水平及利用率均會(huì)影響機(jī)體的抗氧化能力［25－27］。本研究也發(fā)現(xiàn)，飼糧添加較高劑量HSCAS會(huì)顯著降低生長育肥豬Ash的表觀消化率，而Ca、P的表觀消化率無顯著影響，這表明飼糧添加較高劑量HSCAS可能吸附飼糧中銅、鋅、錳等微量元素，引起其利用率下降，這可能是飼糧中較高劑量HSCAS添加導(dǎo)致生長育肥豬抗氧化能力降低的重要原因。另外，由于飼糧中較高劑量HSCAS添加而引起的微量營養(yǎng)物質(zhì)吸附，也可能會(huì)導(dǎo)致肝臟等器官的損傷，這也可能是其影響機(jī)體抗氧化能力的原因。

4 結(jié) 論

① 飼糧中添加0.25%HSCAS不會(huì)影響生長育肥豬的生長性能、機(jī)體抗氧化能力和血清UN含量，但降低CP和能量的表觀消化率。

② 飼糧中添加2.50%HSCAS會(huì)顯著降低生長育肥豬的生長性能、養(yǎng)分表觀消化率和機(jī)體抗氧化能力。

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