何育英 蔡巧青

1.深圳市鹽田區(qū)鹽田街道計生中心,廣東深圳518000;

2.深圳市北京大學(xué)醫(yī)院婦產(chǎn)科,廣東深圳518000

反復(fù)自然流產(chǎn)(RSA)是婦產(chǎn)科常見病,約40%～60%不明原因,指連續(xù)2次及以上的自然流產(chǎn).目前多數(shù)研究表明,母體免疫系統(tǒng)能否識別并耐受胚胎抗原是關(guān)鍵.大量研究結(jié)果顯示,正常妊娠中母體對胚胎的免疫反應(yīng)以Th2體液免疫為主,而Th1細(xì)胞免疫過強極有可能導(dǎo)致流產(chǎn).為探討研究外周血淋巴細(xì)胞亞群Th1/Th2的水平及其細(xì)胞因子德變化和臨床意義,輔助臨床治療.現(xiàn)回顧性分析該院2010年10月-2011年10月收治的60例婦女的臨床資料,將結(jié)果報道如下.

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在深圳市鹽田區(qū)計生中心經(jīng)過婦檢,B超,尿HCG都正常無不孕,無死胎或流產(chǎn)史,要求人流的婦女30例為正常早孕組.同期經(jīng)我中心排除因遺傳,感染及血型不合,抗精子抗體陽性等因素,確診為RSA的婦女30例為病例組.見表1.

表1 兩組婦女臨床資料比較

1.2 設(shè)備及試劑

采用BeckmanCoulter FC500及其原裝試劑,利用表面分子將其分類細(xì)胞.ELISA試劑盒購自美國GBD公司.

1.3 標(biāo)本收集

分析前收集RSA組和對照組孕婦空腹取靜脈血5 mL,注入5.0 mL于EDTA.K2管,空腹靜脈血4 mL,分離血清,-20℃保存待檢測.嚴(yán)格按照操作程序.

1.4 統(tǒng)計方法

采用SPSS13.0統(tǒng)計學(xué)處理軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計量資料采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,進(jìn)行t檢驗.

2 結(jié)果

2.1 病例組與對照組資料比較

表2 對照組與病例組比較

表3 對照組與病例組外周血IFN-γ、IL-10水平的檢測(pg/mL)

3 討論

大多認(rèn)為早期妊娠母體對胚胎的免疫耐受主要有以下:①妊娠期對母體免疫反應(yīng)的抑制.②胎盆的屏障作用可將胚胎抗原封閉,避免與母體免疫接觸,同時將母體抗體及其免疫因子進(jìn)入胎兒導(dǎo)致免疫反應(yīng)隔離.Greco等[1]分別把妊娠與產(chǎn)婦,男性與未孕的女性的外周血淋巴細(xì)胞在體外與胎盤生物制劑進(jìn)行MLC培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)前者可令淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化而后者不能,證實了早孕期間的免疫耐受是動態(tài)的.相關(guān)研究結(jié)果顯示:"免疫細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子影響胚胎的著床、發(fā)育,生殖的神經(jīng)內(nèi)分泌以及胎盤功能,以維持正常妊娠活動".

Th1細(xì)胞分泌IL-2,TNF-α,IFN-γ等,引起局部炎癥反應(yīng)和遲發(fā)細(xì)胞免疫反應(yīng),Th2細(xì)胞分泌IL-4,IL-5,IL-6,IL-10等,引起體液免疫促進(jìn)B細(xì)胞增殖和抗體形成.Piccinni等[2]報道,孕鼠胎盤IL-4比血中高5-10倍.而流產(chǎn)鼠胎盤IL-4等濃度相對低,但I(xiàn)L-2,TNF-α,IFN-γ等濃度高.Makhseed等[3]對流產(chǎn)傾的婦女進(jìn)行實驗研究,發(fā)現(xiàn)其成功懷孕組以Th2型的細(xì)胞因子為主,而失敗的以Th1型的細(xì)胞因子為主.Th1型細(xì)胞因子通過直接或間接激活NK、細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTLs)、巨噬細(xì)胞等多種毒性細(xì)胞妨礙妊娠.Th2型細(xì)胞因子主要是通過抑制Th1型細(xì)胞因子的產(chǎn)生及其作用來維持妊娠,大部分反復(fù)自然流產(chǎn)均是由于患者機體不能產(chǎn)生足夠的Th2型細(xì)胞因子來抑制Th1型細(xì)胞因子所致.國內(nèi)劉慶之等[4]對此亦有論述.

大量研究表明Th2淋巴細(xì)胞有利于妊娠,而Th1則相反.但需注意適量的Th1型細(xì)胞是有利于促進(jìn)胎兒生長和母體抗感染能力.Haynes等[5]認(rèn)為,對妊娠來說,Th1與Th2的平衡更應(yīng)該考慮.現(xiàn)已證實,Th2型細(xì)胞因子對維持正常妊娠起重要作用,而Th1型細(xì)胞因子則不利于妊娠的正常進(jìn)行[6];兩種細(xì)胞因子之間的平衡對維持正常妊娠發(fā)揮重要作用.正常妊娠時Th1/Th2的比值下降,母體免疫反應(yīng)偏離Th1型而偏向Th2型.在RSA中Th1/Th2比值上升,母體免疫反應(yīng)呈相反變化.可見,細(xì)胞因子自身、與妊娠有關(guān)的激素、感染等因素均對兩型因子間平衡起重要調(diào)節(jié)作用

該研究主要從淋巴細(xì)胞的表面分子和淋巴細(xì)胞因子進(jìn)行實驗研究,發(fā)現(xiàn)RSA的患者和IFN-γ相對正常妊娠婦女表達(dá)增強,而,和IL-10表達(dá)相對較弱.提示正常妊娠為一種特殊的Th2現(xiàn)象,Th1受到抑制.陳巧兒[7]等報道,RSA患者經(jīng)過免疫治療后,促進(jìn)機體向Th2淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化,利于妊娠成功.綜上所述,利用流式細(xì)胞儀對RSA快速診斷,結(jié)合運用淋巴細(xì)胞免疫治療[8]或者給予細(xì)胞因子如Th2類因子制劑或抗Th1類因子制劑,調(diào)節(jié)優(yōu)勢應(yīng)答的類型,達(dá)到早預(yù)防,早治療,達(dá)到妊娠成功的目標(biāo).

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[2]Piccinni MP,Romagnana S.Regulation of fetal allograft survival byhormone-controlled[J].Th1-and Th2-type cytokines immonol Res,1996,15(2):141-150.

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[4]劉慶芝,黃山鷹姚吉龍,等.反復(fù)自然流產(chǎn)患者外周血中Th1/Th2型細(xì)胞因子的表達(dá)及其意義[J].東南大學(xué)學(xué)報,2011,30(4):565-568.

[5]Haynes MK,Smith JB.Can Th1-like immune responses esplain the immuno-pathology of recuurent miscarriage[J].Reprod Immunol,1997,35(1):65-71.

[6]Rezaei A,Dabbagh A.T-helper(1)cytokines increase during early pregnancy in women with a history of recurrent spontaneous abortion[J].Med Sci Monit,2002,8(8):607-610.

[7]陳巧兒,秦衛(wèi)兵,楊寧,等.免疫治療原因不明反復(fù)自然流產(chǎn)后Th1/Th2型細(xì)胞因子和NK細(xì)胞的變化[J].中國婦幼保健,2005,20(20):2637-2639.

[8]廖丹,李鳳英,譚秋慧,等.淋巴細(xì)胞免疫治療反復(fù)早期自然流產(chǎn)53例[J].臨床醫(yī)學(xué),2009,29(1):75-76.