国产日韩欧美一区二区三区三州_亚洲少妇熟女av_久久久久亚洲av国产精品_波多野结衣网站一区二区_亚洲欧美色片在线91_国产亚洲精品精品国产优播av_日本一区二区三区波多野结衣 _久久国产av不卡

?

遼寧新病害核桃枝枯病病原鑒定

2013-08-15 03:26孫俊
果樹(shù)學(xué)報(bào) 2013年4期
關(guān)鍵詞:核桃

孫俊

摘 要: 【目的】為了對(duì)遼寧省近年發(fā)生的新病害—核桃枝枯病的病原進(jìn)行鑒定,【方法】采集遼寧省葫蘆島市建昌縣核桃枝枯病樣品,通過(guò)對(duì)病原菌形態(tài)觀察、致病性測(cè)定,以及rDNA-ITS序列分析?!窘Y(jié)果】經(jīng)分離純化獲得病原菌,通過(guò)柯赫氏法則證病,接種后出現(xiàn)的病害癥狀與直接采集到的病害標(biāo)樣癥狀一致,確定其為致病菌;對(duì)病原菌進(jìn)行傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)觀察,病原菌分生孢子器和分生孢子的形態(tài)與胡桃楸擬莖點(diǎn)霉較相似;將待測(cè)菌株rDNA-ITS序列與GenBank中相關(guān)菌株的ITS序列進(jìn)行同源性比較,與Phomopsis sp. (GenBank 收錄號(hào): HM595508.1)的同源性達(dá)到99%?!窘Y(jié)論】確定遼寧地區(qū)新病害核桃枝枯病的病原菌為胡桃楸擬莖點(diǎn)霉Phomopsis juglandina。

關(guān)鍵詞: 核桃; 枝枯?。?擬莖點(diǎn)霉

中圖分類號(hào):S664.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1009-9980?穴2013?雪04-0669-03

胡桃(Juglans regial L.) 原產(chǎn)中亞,又叫核桃、羌桃、合桃等,是胡桃科核桃屬多年生落葉喬木。我國(guó)的核桃栽培歷史悠久,種質(zhì)資源豐富。核桃仁中含有豐富的脂肪、蛋白質(zhì)、碳水化合物及微量元素,它還含有對(duì)人體有特殊功效的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。醫(yī)學(xué)認(rèn)為核桃性溫、味甘、無(wú)毒,有健胃、補(bǔ)血、潤(rùn)肺、養(yǎng)神等功效[1]。20世紀(jì)90年代以來(lái),美國(guó)等國(guó)科學(xué)家通過(guò)營(yíng)養(yǎng)學(xué)和病理學(xué)研究認(rèn)為,核桃對(duì)于心血管疾病、Ⅱ型糖尿病、癌癥和神經(jīng)系統(tǒng)疾病有一定的康復(fù)治療和預(yù)防效果。

而隨著核桃的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值逐漸被人們重視,核桃的種植面積越來(lái)越大,隨之而來(lái)的是病害的發(fā)生越來(lái)越嚴(yán)重。近年來(lái),在大面積種植核桃中,核桃枯枝病各地均有發(fā)生。主要危害枝條和樹(shù)干,尤其是1~2 a生枝條易受害,一般發(fā)病株率20%~30%,嚴(yán)重的發(fā)病株率超過(guò)80%,如遇濕度太大時(shí),引起枝條大量死亡,直接影響到樹(shù)體生長(zhǎng),進(jìn)而影響核桃產(chǎn)量。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)于核桃枝枯病的研究多針對(duì)矩圓黑盤(pán)孢菌Melanconium oblongum所致的枝枯病[1-2],而對(duì)于擬莖點(diǎn)霉Phomopsis juglandina引起的核桃枝枯病在我國(guó)僅在云南昆明曾見(jiàn)有報(bào)道[3-4]。在烏克蘭曾有過(guò)擬莖點(diǎn)霉引起核桃枝枯病的報(bào)道[5-6]。

作者針對(duì)遼寧省核桃枝枯病進(jìn)行了病原菌分離鑒定,柯赫氏法則證病,病原菌rDNA-ITS分析,以便為搞清病害的發(fā)病規(guī)律、核桃的科學(xué)栽培管理及其防控提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 供試材料

核桃枝枯病標(biāo)樣于2012年5月在遼寧省葫蘆島市建昌縣養(yǎng)馬甸子鄉(xiāng)平房子村采集。根據(jù)核桃枯枝危害的癥狀特點(diǎn)進(jìn)行描述記載。

1.2 病原菌鑒定

1.2.1 病菌形態(tài)特征觀察 采用常規(guī)分離方法進(jìn)行病原菌分離并純化[7]。病菌在PDA平板上25 ℃培養(yǎng),觀察并計(jì)測(cè)菌落、分生孢子器和分生孢子形態(tài)。

1.2.2 柯赫氏法則證病 選取長(zhǎng)勢(shì)一致的1 a生核桃植株,采用3種接種方法。(1)菌餅覆蓋針刺法: 在核桃枝條上用消毒的針頭刺10針,用打孔器無(wú)菌打取7 mm菌餅,將菌絲面朝向核桃枝條針刺部覆蓋。(2)孢懸液注射法: 用注射器吸取0.5 mL孢懸液(107個(gè)·mL-1)注射寄主枝條表皮中。(3)嫩枝離體接種法: 選取同一部位的嫩枝,用打孔器無(wú)菌打取7 mm菌餅,將菌絲面朝向核桃接種嫩枝切面覆蓋。接種后室溫保濕培養(yǎng)24~48 h。每種方法重復(fù)3次。跟蹤觀察致病結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

2.1 病害癥狀與病原菌形態(tài)觀察

2.2 柯赫氏法則證病結(jié)果

2.3 病菌ITS序列測(cè)定結(jié)果

3 討 論

國(guó)內(nèi)關(guān)于擬莖點(diǎn)霉引起的核桃枝枯病只在云南昆明有過(guò)發(fā)現(xiàn)[3],至今再無(wú)報(bào)道,筆者首次在遼寧地區(qū)發(fā)現(xiàn)此病害,并通過(guò)傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)鑒定及對(duì)核桃枝枯病菌進(jìn)行rDNA-ITS序列分析相結(jié)合的方法,運(yùn)用分子和生物學(xué)雙重手段對(duì)遼寧地區(qū)核桃枝枯病菌進(jìn)行鑒定,鑒定方法方便、快速、準(zhǔn)確。

在試驗(yàn)中多次重復(fù)回接過(guò)程中發(fā)現(xiàn),擬莖點(diǎn)霉對(duì)核桃嫩枝的侵染力較強(qiáng),3種接種方式,病菌均可侵染。由此分析認(rèn)為病原菌極易通過(guò)傷口侵染核桃新梢,而且在溫暖多雨多霧的環(huán)境中病菌更易侵染和傳播。從試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看,主枝接種發(fā)病的癥狀與成株期核桃樹(shù)枝條自然條件下的發(fā)病癥狀相似;而嫩枝接種后發(fā)病癥狀與成株期核桃樹(shù)枝條自然條件下發(fā)病癥狀有所差別,這可能與枝條的木質(zhì)化程度、皮層厚度、及生長(zhǎng)勢(shì)之間的差異有關(guān)。

本文針對(duì)遼寧省新見(jiàn)病害—核桃枝枯病病菌的研究,在病菌生物學(xué)特性研究方面尚需全面深入,病菌寄主范圍尚待測(cè)定,病菌侵染特性及其機(jī)制有待于深入研究,以便為生產(chǎn)上病害防治提供系統(tǒng)的理論依據(jù)。(本文圖版見(jiàn)插7)

參考文獻(xiàn) References:

[1] HU Guo-liang, LI Wen-biao, MA Liang-jin. Walnut twig blight observation and research[J]. Zhejiang Forestry Science and Technology, 1992, 12(1): 18-22.

胡國(guó)良,李文彪,馬良進(jìn). 山核桃枝枯病觀察與研究[J]. 浙江林業(yè)科技,1992,12(1): 18-22.

[2] LI Hui-qin. Walnut twig blight prevention technology[J]. Modern Rural Science and Technology, 2012, 18: 29.

李會(huì)欽. 核桃枝枯病防治技術(shù)[J]. 現(xiàn)代農(nóng)村科技,2012,18: 29.

[3] QI Pei-kun, JIANG Zi-de, XIANG Mei-mei. Chinese Journal of fungi, Phomopsis sp[M]. Beijing: Science Press,2007.

戚佩坤,姜子德,向梅梅. 中國(guó)真菌志(34),擬莖點(diǎn)霉屬[M]. 北京: 科學(xué)出版社,2007.

[4] UECKER F A. A world list of Phomopsis names with notes on nomenclature, morphology and biology[M]. Mycol Memoir,1988.

[5] ISIKOV V P. Plant pathogenic fungi causing some diseases on trees in the Crimean steppe[J]. Mycology & Phytopathology, 1978, 12 (3): 251-254.

[6] HELUTA V P,MEREZHKO T O,SMIK L V. Microfungi of Askania arboretum[J]. Ukrainian Botanical Journal,1992, 49 (6): 50-54.

[7] FANG Zhong-da. Plant pathology research methods[M]. Beijing: China Agriculture Press,1998.

方中達(dá). 植病研究方法[M]. 北京: 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1998.

猜你喜歡
核桃
核桃種子
紅仁核桃走俏
為了吃,你都做過(guò)什么不可思議的事情
熱脹冷縮巧取完整核桃
猴子拾核桃
巧剝核桃
猴子拾核桃
摻假的核桃
多功能漏斗型核桃?jiàn)A
核桃的藝術(shù)