楊秋紅,趙 琛,吳煥淦,劉慧榮,殷之光,崔云華＊

(1.上海中醫(yī)藥大學(xué),上海201203;2.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬岳陽中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院,上海200437)

因?yàn)樗ダ蟍1]涉及人體各個(gè)器官和系統(tǒng),對(duì)于衰老的研究也涉及各個(gè)器官,因此衰老模型也相應(yīng)的有用于多器官組織衰老的研究的,也有專門為模擬某一個(gè)器官衰老而設(shè)計(jì)的。

1 多組織器官衰老應(yīng)用模型

1.1 自然衰老動(dòng)物模型 大、小鼠的16～20月齡為衰老早期,22～24月齡為老年期。在衰老與延緩衰老實(shí)驗(yàn)研究中,以自然老化動(dòng)物為模型是最貼近人類衰老的模型,但因其有許多缺點(diǎn):數(shù)量少,價(jià)格昂貴,死亡率高等,給實(shí)驗(yàn)帶來重重困難,因此還有許多人工致衰老的模型,可用于衰老多組織器官的研究。

1.2 大劑量D-半乳糖所致的亞急性衰老模型 有學(xué)者研究表明,該模型在眾多組織器官的生化指標(biāo)檢測(cè)以及分子生物學(xué)等各個(gè)方面都可以較好的模擬自然衰老。邱柏程等[2]研究認(rèn)為,該模型大鼠,抗應(yīng)激能力低下,免疫功能降低,學(xué)習(xí)記憶力衰退,真皮厚度變薄。李守民等[3]認(rèn)為D-gal能通過調(diào)控內(nèi)源性巰基抗氧化物(酶),減退學(xué)習(xí)記憶能力,誘導(dǎo)大鼠神經(jīng)系統(tǒng)的衰老。李盛青等[4]觀察得出,D-半乳糖可造成小鼠脾臟和胸腺衰老性萎縮。王愛梅等[5]檢測(cè)結(jié)果可見,D-半乳糖衰老模型大鼠血清中E2水平明顯降低,FSH、LH水平明顯增高,認(rèn)為該模型也可作為衰老卵巢模型。但是,也有學(xué)者認(rèn)為,D-半乳糖衰老模型并不能完全模擬自然衰老的狀態(tài)[6]。

1.3 臭氧損傷衰老模型 李軍等[7]運(yùn)用多種檢查方法發(fā)現(xiàn),臭氧損傷制作的衰老模型可使心臟、腎臟、肺臟、皮膚等多器官出現(xiàn)衰老現(xiàn)象。

1.4 γ-射線輻照的衰老大鼠模 射線輻照使大鼠體內(nèi)產(chǎn)生多種自由基,從而誘發(fā)生物膜損傷,使動(dòng)物出現(xiàn)SOD活性顯著下降、MDA含量顯著升高,同時(shí)輻射也能使氧化酶及非氧化酶活性系統(tǒng)的防御機(jī)制減弱,白細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞和血紅蛋白明顯降低[8]。該法操作較簡(jiǎn)單,時(shí)間較D-半乳糖致衰老模型短,是一種快速有效建立衰老動(dòng)物模型的方法。

1.5 去胸腺衰老模型 去胸腺衰老模型是以衰老的免疫學(xué)說而設(shè)計(jì)的,在衰老與抗衰老研究中發(fā)現(xiàn),免疫系統(tǒng)的功能狀態(tài)與衰老的發(fā)生和發(fā)展有著十分密切的關(guān)系[9],去除胸腺的動(dòng)物模型類似于人衰老后各器官的退化狀態(tài),因此可作為一種衰老模型。

2 腦衰老相關(guān)動(dòng)物模型

2.1 β-Aβ致衰老模型 有學(xué)者[10]認(rèn)為,在D-半乳糖所致動(dòng)物模型基礎(chǔ)上,海馬內(nèi)注射Aβ,可望作為一種更接近AD的動(dòng)物模型。

2.2 AlCl3致急性衰老模型 最新研究表明[11],此種模型高階段Al積累發(fā)生在內(nèi)嗅皮層細(xì)胞的起源的部位和海馬CA1細(xì)胞,導(dǎo)致微管損耗和樹突枯死。類似的病變?cè)谌祟悓?dǎo)致阿爾茨海默病癡呆。目前采用注射AlCl3的大白鼠急性衰老模型是公認(rèn)的老年性癡呆癥病理模型。

2.3 快速老化小鼠 SAMP為日本東京大學(xué)以近交方式培育成功的快速老化小鼠,目前共有12個(gè)亞系,壽命較短,僅有1年左右。

2.3.1 SAMP8 SAMP8在2個(gè)月齡就開始出現(xiàn)學(xué)習(xí)記憶功能減退,并隨增齡而加重,表現(xiàn)為被動(dòng)回避和空間學(xué)習(xí)記憶能力下降[12]。因此SAMP8是研究衰老與學(xué)習(xí)記憶功能及學(xué)習(xí)記憶功能障礙發(fā)生機(jī)制和評(píng)價(jià)益智藥物的良好動(dòng)物模型。

2.3.2 SAMP10 SAMP10不僅是研究與衰老相關(guān)神經(jīng)元丟失及腦萎縮發(fā)生機(jī)制的有益動(dòng)物模型,而且還可以作為研究與衰老相關(guān)的抑郁癥發(fā)生機(jī)制的動(dòng)物模型[13]。

3 中醫(yī)衰老證型模型

中醫(yī)關(guān)于衰老的學(xué)說有多種,如臟腑虛衰學(xué)說、陰陽失調(diào)學(xué)說、精氣神虧耗學(xué)說等[14-17]。祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)延緩衰老的機(jī)理、抗衰老藥物的研究,大多采用某一證型的衰老模型進(jìn)行研究。

有研究認(rèn)為26到28月齡的自然衰老雄性大鼠為較適宜的衰老腎陽虛動(dòng)物模型[26];老年小鼠單日游泳至耐力極限,喂飼甘藍(lán),雙日 100%精練豬脂0.5 mL/只灌胃,連續(xù)8 d可制作脾虛衰老模型[18]。也有學(xué)者認(rèn)為[19],大劑量D-半乳糖誘導(dǎo)的衰老大鼠模型具有與老年大鼠相似的血液流變學(xué)改變,可作為衰老高黏滯血癥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,也可考慮作為老年血瘀證研究的動(dòng)物模型之一。在中醫(yī)藥抗衰老的研究中還有采用在亞急性衰老大鼠基礎(chǔ)上永久性結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈制作慢性腦缺血的動(dòng)物模型,并用健脾補(bǔ)腎活血復(fù)方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)干預(yù)[20]。

近年來中醫(yī)藥在延緩衰老中取得了良好的實(shí)踐效果,但是對(duì)于中醫(yī)藥抗衰老的實(shí)驗(yàn)研究仍存在很多問題,中醫(yī)衰老證型模型的不統(tǒng)一就是其中之一,怎樣規(guī)范衰老中醫(yī)證型模型,進(jìn)而更好地研究中醫(yī)藥抗衰老的療效及機(jī)理,規(guī)范優(yōu)化中醫(yī)藥抗衰老的臨床操作是目前亟待解決的關(guān)鍵問題。

[1]Frisard M,Ravussin E.Energy metabolism and oxidative stress:impact on the metabolic syndrome and the aging process.Endocrine,2006,29(1):27-32.

[2]SongX,Bao M,Li D,etal.Advanced glycation in D-galactose induced mouse aging model[J].Mech Aging Dev,1999,108(3):239.

[3]李守民,王婷婷,胡艷麗,等.D-半乳糖調(diào)控SD大鼠海馬巰醇抗氧化物(酶)致衰老的作用研究[J].昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009(5):1-5.

[4]李盛青,林輝,許曉峰,等.玉竹提取物對(duì)衰老小鼠脾臟和胸腺的影響研究[J].中國藥房,2008,19(21):1616-1617.

[5]王愛梅,李弋,陳亞奇.葛根異黃酮對(duì)衰老大鼠卵巢形態(tài)和功能的影響[J].中國婦幼保健,2011,26(9):5786-5788.

[6]肖慧.D-半乳糖致衰老模型大鼠體征和骨髓DNA含量的改變與中藥干預(yù)作用[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志,2010,20(5):37.

[7]李軍,張洹,王彥平,等.小鼠胎盤源干細(xì)胞移植對(duì)臭氧致衰老模型的影響[J].廣東醫(yī)學(xué),2010,3l(4):404-406.

[8]李云,楊素青.急性致衰老動(dòng)物模型的探討[J].衛(wèi)生研究,2002,31(4):290-291.

[9]Chidgey AP,Boyd RL.Stemming the tide of thymic aging[J].Nat Immuno,l,2006,7(10):1013-1016.

[10]Smith Swintosky VL,Mattson MP.Glutamate,betaamyloid precursor proteins and calciummediated neurofibrillary degeneration[J].J Neural Transm Supp,1994,44:29-45.

[11]Walton JR.Cognitive deterioration and associated pathology induced by chronic low-level aluminum ingestion in a translational rat model provides an explanation of Alzheimer's disease,tests for susceptibility and avenues for treatment[J].Int J Alzheimers Dis.,2012,30:1-14.

[12]Yagi H,Akiguchi I,Ohta A,et al.Spontaneous and artificial lesions of mango cellular reticular formation of brain stemdete-riorate avoidance learning in senescence-accelerated mouse SAM[J].Brain Res,1998,791(1-2):90-98.

[13]Numata T,Saito T,Maeka wa K,etal.Bcl-2-linked apoptosis due to increase in NO synthase in brain of SA MP10[J].Biochemical and Biophysical R esearch Communications,2002,297(3):517-522.

[14]趙延龍,閆潤(rùn)紅,馮玉華.“虛-瘀-衰老”學(xué)說理論與實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J].山西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2010,11(4):70-72.

[15]劉煥蘭,鄭先貞.衰老機(jī)理的五臟相關(guān)性探討[J].新中醫(yī),2010,42(3):6-8.

[16]孫霞.痰瘀之邪與衰老、老年病的相關(guān)性研究[J].吉林中醫(yī)藥,2010,30(2):129-130.

[17]李燕.活血化瘀法在防治老年病及抗衰老中的運(yùn)用體會(huì)[J].長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2010,26(3):362-363.

[18]任漢陽,王玉英,張瑜,等.老年脾虛動(dòng)物模型的建立及脾虛與衰老相關(guān)性研究[J].河南中醫(yī),2006,26(7):31-33.

[19]李虹,白小涓,陳香美.血管衰老機(jī)理及檢測(cè)指標(biāo)的研究進(jìn)展[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2005,85(3):212-215.

[20]段成竹,任國華,賈青,等.健脾補(bǔ)腎活血方對(duì)亞急性衰老大鼠慢性腦缺血模型中腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響[J].中國老年學(xué)雜志,2012,2(32):758-760.