何國林　王羚酈　李慶國

摘 要：目的：采用熱熔擠出法制備穿心蓮內(nèi)酯固體分散，提高其體外溶出度。方法：選用PEG6000、Poloxamer188、HPC、PVPVA、PVPK30及 PVPK12為載體，熔融擠出法制備穿心蓮內(nèi)酯固體分散體，比較不同載體及不同載藥比的固體分散體體外溶出度。制備固體分散體片劑，并比較其與物理混合物片及原藥片的體外溶出度。結(jié)果：以PVPK30、PVPK12為載體制備固體分散體，藥物-載體比為 1：5時，1h累積溶出分別為103.3%、100.2%，PVPK30載體的片劑90 min溶出91.9%，物理混合物片75.8%，原藥片63.3%。結(jié)論：PVPK30、PVPK12固體分散體能顯著提高穿心蓮內(nèi)酯體外溶出度，且其片劑溶出度增加同樣明顯。

關(guān)鍵詞：熔融擠出；熱熔擠出；穿心蓮內(nèi)酯；固體分散體；溶出度

中圖分類號：R284.2

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

文章編號：1007-2349（2013）06-0053-03

穿心蓮內(nèi)酯（andrographolide）是中藥穿心蓮的主要有效成分之一，具有解熱消炎，抗菌抗病毒，保肝利膽抗心血管疾病，抗腫瘤，免疫調(diào)節(jié)等作用[1～3]，但穿心蓮內(nèi)酯疏水性強(qiáng)，其制劑溶出度過低。提高其制劑在水中的溶解度，是目前穿心蓮內(nèi)酯研究的一個重要方向。因此，本實驗應(yīng)用熔融擠出技術(shù)制備穿心蓮內(nèi)酯固體分散體及其制劑，擬提高穿心蓮內(nèi)酯的體外溶出度，改進(jìn)生物利用度。

固體分散體常用的制備方法有：熔融法、溶劑法、熔融一溶劑法及熱熔擠出法[4]，熱熔擠出技術(shù)（hot—melt extrusion technique，HME），又可稱為熔融擠出技術(shù)（melt extrusion technique），是一種制備固體分散體的新技術(shù)，近年來受到研究者的廣泛關(guān)注。上世紀(jì)90年代，該技術(shù)被引入到制藥行業(yè)，主要用于提高難溶性藥物的溶出度，制備緩控釋制劑及局部給藥制劑，并在上述方面顯示了獨(dú)特優(yōu)勢。

目前，國內(nèi)外尚未見采用熔融擠出技術(shù)制備穿心蓮內(nèi)酯固體分散體的報道。筆者曾利用poloxamer188和PEG6000用同樣方法制備了穿心蓮內(nèi)酯固體分散體[5]。由于載體的熔點(diǎn)在40～50℃，容易出現(xiàn)分散體的老化現(xiàn)象，導(dǎo)致穩(wěn)定性差等問題。

本實驗選用6種適宜的載體，采用熔融擠出法制備穿心蓮內(nèi)酯的固體分散體，并用其制備成具有控釋性能的片劑，對提高藥物的溶解度和吸收度以及藥物的穩(wěn)定釋放具有較明顯的作用。

1 試藥與儀器

穿心蓮內(nèi)酯（自制）；穿心蓮內(nèi)酯對照品（中國藥品生物制品檢定所 批號：110797-200307）；聚乙烯吡咯烷酮K12（BASF 批號：83838124UO）；聚乙烯吡咯烷酮K30（AMRESCO 批號：20100520）；聚乙烯吡咯烷酮VA（BASF 批號：27075788QO）；聚乙二醇6000（廣州市盛強(qiáng)化工有限公司，批號：201103060）；泊洛沙姆188（BASF 批號：WPCE565D）；交聯(lián)共聚維酮XL（BASF 批號：03800202861）；CTE20雙螺桿擠出機(jī)（科倍隆科亞（南京）機(jī)械有限公司）；ZS-8G智能溶出度試驗儀（天津市盛鑫通達(dá)科技有限公司）；WFZ UV-2100型紫外分光光度計（尤尼可（上海）儀器有限公司）；ZPS8旋轉(zhuǎn)式壓片機(jī)（上海天祥·健臺制藥機(jī)械有限公司）。

2 實驗方法

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 取穿心蓮內(nèi)酯對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解，制成每1 mL含0.02 mg的溶液，即得，作為對照品貯備液。精密量取對照品溶液5 mL，置50 mL容量瓶中，甲醇稀釋至刻度，精密量取1，2，4，6，8，10 mL，分別置10 mL容量瓶中，甲醇稀釋至刻度，搖勻，以甲醇為空白，225 nm波長下測定吸光度，以濃度對吸光度進(jìn)行線性回歸。線性方程為：A=38.829C+0.039（r=0.9998），在0.0022～0.0220 mg/mL的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2 溶解度測定 取穿心蓮內(nèi)酯約50 mg，置100 mL具塞錐形瓶中，加純化水約100 mL，25℃恒溫振蕩24 h，平衡后過濾，取續(xù)濾液適量，稀釋，225 nm波長處測定吸光度，計算得到穿心蓮內(nèi)酯的平衡溶解度為75 μg/mL。

2.3 體外溶出度的測定 按《中國藥典》（2010年版二部）附錄[6]中規(guī)定的漿法測定。轉(zhuǎn)速為（100土1）r/min，溫度恒溫在（37土0.5）℃，溶出介質(zhì)為0.1mol/lHcl溶液，精密稱取藥物100 mg，固體分散體（相當(dāng)于100 mg穿心蓮內(nèi)酯），物理混合物（相當(dāng)于100 mg穿心蓮內(nèi)酯），直接投入溶出杯中，樣品接觸介質(zhì)即開始計時，分別于5，10，20，40，60 min，取樣5 mL，立即補(bǔ)充等溫等體積溶出介質(zhì)，樣品溶液經(jīng)0.8 μm濾膜過濾后，取續(xù)濾液，稀釋，于波長225 nm處測定吸光度 A，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算累積溶出百分率。

2.4 熱熔擠出法制備固體分散體 按比例稱量穿心蓮內(nèi)酯及載體PEG6000、Poloxamer188、PVPK30、PVPK12、PVPVA及 HPC，制備物理混合物，設(shè)定雙螺桿擠出機(jī)各區(qū)段至機(jī)頭的溫度，平衡30min后，設(shè)定螺桿轉(zhuǎn)速為30rpm，將各種物理混合物分別置于加料斗中，開啟主電機(jī)和喂料電機(jī)，物料與載體在機(jī)筒中熔融混煉后由機(jī)頭?？讛D出，將擠出物盛接于鋁盤中，室溫冷卻，粉碎過80目篩備用。

2.5 溶劑法制備固體分散體 按1：5比例精密稱量穿心蓮內(nèi)酯2g和PVPK30 10 g，加乙醇150 mL，水浴加熱溶解，轉(zhuǎn)入梨形燒瓶，設(shè)定旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀溫度55℃，回收乙醇，刮下瓶內(nèi)固體，100℃干燥12 h，粉碎，過80目篩，測體外溶出度。

2.6 穿心蓮內(nèi)酯片的制備 分別稱取PVPK30固體分散體（1：5）、原藥、PVPK30物理混合物（1∶5），分別與微晶纖維素、PVPP、硬脂酸鎂、微粉硅膠、滑石粉置于適當(dāng)容器中，混合均勻，過80目篩，直接粉末壓片，即得。

2.7 體外釋放度行為考察 將穿心蓮固體分散體片按《中國藥典》（2010年版二部）附錄[6]中規(guī)定的漿法測定。進(jìn)行體外釋放度試驗。

2.8 穿心蓮內(nèi)酯片的含量測定 分別取各片劑20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于穿心蓮內(nèi)酯10 mg）置50 mL量瓶中，加甲醇適量，超聲20 min，加甲醇至刻度，搖勻，過濾，精密量取續(xù)濾液5 mL，置10 mL量瓶中，甲醇稀釋至刻度，精密量取1 mL，甲醇稀釋至10 mL，搖勻，照分光光度法，在225 nm波長處測定吸光度，計算含量，結(jié)果三批平均含量為54.83 mg/片。

3 結(jié)果

3.1 不同載體考察 以藥物-載體比例=1：5（w/w）PEG6000、Poloxamer188、PVPK30、PVPK12、PVPVA及 HPC為載體，按2.4操作，制備固體分散體，測體外溶出度，結(jié)果如圖1。

由圖1可見，可知穿心蓮內(nèi)酯1h累積溶出率為24.5%，PVPK12、PVPK30和 PVPVA固體分散分別為100.2%、103.3%、85.3%，PE g，Poloxamer 和HPC 為54.9%，47.2%，64.6%?？梢娝x載體均能提高穿心蓮內(nèi)酯體外溶出度，其中PVPK30、PVPK12 和PVPVA增溶效果顯著，而且這三種載體的Tg都高于100℃，穩(wěn)定性較好。因此選擇PVPK12 和PVPK30作載藥比的考察。

3.2 不同載藥比考察 穿心蓮內(nèi)酯-PVPK12、穿心蓮內(nèi)酯-PVPK30，分別按照比例1∶3，1∶5，1∶7（w/w）制備物理混合物，按2.4操作制備固體分散體，測體外溶出度，結(jié)果如圖2和 PVPK12為載體，1 h后藥物-載體比（w/w）1：3 累積溶出91.2%，1∶5累積溶出100.2%，1∶7累積溶出102.6%，物理混合物累積溶出49.2%，穿心蓮內(nèi)酯原藥累積溶出24.5%。由此 PVPK30為載體，7，1 h后，藥物-載體（w/w）比1∶3 累積溶出92.6%，1∶5累積溶出103.3%，1∶7累積溶出96.7%，物理混合物累積溶出59.7%，穿心蓮內(nèi)酯累積溶出24.5%。由此可見，藥物-載體（w/w）1∶5是最適合的比例，藥物比例增大，藥物溶出度下降較明顯。

3.3 不同方法制備固體分散體比較 按穿心蓮內(nèi)酯和PVPK301：5比例物理混合物，按2.4和2.5方法分別制備固體分散體，測體外溶出度，結(jié)果如圖4。

由圖4可見，熔融擠出法制備的固體分散體對提高穿心蓮內(nèi)酯的體外溶出度的效果好。

3.5 片劑體外釋放度的考察 按2.7項方法測定2.6項方法制備的穿心蓮內(nèi)酯片的溶出度，結(jié)果如圖5。

原藥片90 min的累積溶出百分率為63.3%，物理混合物片90 min的累積溶出百分率為75.8%，而固體分散體片90 min的累積溶出百分率為91.9%?？梢姡腆w分散體制備的片劑體外溶出度明顯提高。

4 討論

穿心蓮內(nèi)酯是II型難溶性藥物，將其制備成固體分散體可以提高生物利用度。載體的選擇是實驗的關(guān)鍵。選擇了PVPK30、PVPK12等6種水溶性輔料為載體，均能提高穿心蓮內(nèi)酯體外溶出度，其中PVPK30、PVPK12 和PVPVA增溶效果顯著。藥物與PVP在熔融過程中，由于氫鍵作用，絡(luò)合作用和載體粘度增大而抑制藥物晶核的形成和結(jié)晶的生長，使藥物呈分子形態(tài)或無定形狀態(tài)分散，溶出度增大。

穿心蓮內(nèi)酯疏水性強(qiáng)，直接壓片臨床療效低，制備成固體分散體后成型行顯著提高，可以全粉末壓片，且可壓性好，片劑重量差異小、外觀光澤均勻。但由于載體含量高，其吸濕性較強(qiáng)、粘度大，壓制時易粘沖，因此壓片過程需注意控制環(huán)境濕度，并加適量崩解劑。

參考文獻(xiàn)：

[1]MatsudaT，kuroyannaqiM，SuqiyamaS，et al.Cell differentiation inducing diterpenes from Andrographis paniculata Nees[J]，Chem Pharm Bull，1994，42（6）：1216～1218.

[2]劉新建，王一飛，李貴生.穿心蓮內(nèi)酯及其衍生物的藥理研究進(jìn)展[J].中藥材，2003，26（2）：135～137.

[3]徐立春.蓮必治對腫瘤細(xì)胞直接殺傷與協(xié)同作用的研究[J].中國實用臨床醫(yī)藥學(xué)，1999：457.

[4]姜言麗，張慧林，曲韻智，等.固體分散技術(shù)在中藥制劑中的應(yīng)用[J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2006，13（8）：32.

[5]陳鳳珍，李慶國，何貴鋒，等.熔融擠出法制備穿心蓮固體分散體的研究[J].中藥材，2011，34（12）：1953～1955.

[6]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：附錄ⅹC.

（收稿日期：2013-02-28）