李世祥等
【關(guān)鍵詞】 Rh血型;溶血病;弱D
doi:10.3969/j.issn.1004-7484(x).2013.06.148 文章編號:1004-7484(2013)-06-2992-02
Rh血型系統(tǒng)是目前已知的32個人類紅細(xì)胞血型系統(tǒng)中最復(fù)雜的一個。Rh血型由于其D抗原的強(qiáng)免疫原性而使RhD血型最具有臨床意義。RhD血型具有多態(tài)性,除RhD陽性和RhD陰性外,還存在多種變異體,包括弱D、部分D及DEL型?,F(xiàn)已有弱D、部分D及DEL型獻(xiàn)血者所獻(xiàn)血液使RhD陰性受血者產(chǎn)生抗-D報(bào)道[1-3]。筆者在1例新生兒溶血病換血治療交叉配血實(shí)驗(yàn)中,發(fā)現(xiàn)產(chǎn)婦為Rh弱D表型,產(chǎn)生抗-D抗體,引起新生兒溶血病,現(xiàn)報(bào)告如下。
1 材料與方法
1.1 對象 產(chǎn)婦張某,36歲,漢族。孕3產(chǎn)1,既往人流2次;現(xiàn)第3胎足月剖宮產(chǎn)。張某之子出生后皮膚鞏膜黃疸??偰懠t素為530umol/L,臨床診斷為新生兒溶血病,急需換血治療,因配血困難送檢。
1.2 主要試劑和儀器 四批抗-D單克隆抗體,譜細(xì)胞(上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司);Rh基因分型試劑(美國G&T公司);DNA提取試劑盒(北京天為時(shí)代生物技術(shù)有限公司)。日本久保田KUBOTAKA-2200細(xì)胞洗滌離心機(jī),美國ABI公司PE-9700擴(kuò)增儀,美國UVP公司UVPGDS-8000凝膠成像系統(tǒng)和DYY-6B型穩(wěn)壓電泳儀。
1.3 方法
1.3.1 血清學(xué)方法 ABO血型鑒定采用試管法;RhD血型鑒定選用4批不同廠家,不同批號的抗D試劑進(jìn)行抗人球蛋白方法檢測;抗體篩選及鑒定采用抗人球蛋白方法用10個O型譜細(xì)胞和2附加的特殊表型細(xì)胞做抗體鑒定。具體方法參見文獻(xiàn)[4]。
1.3.2 Rh系統(tǒng)基因分型方法 采用PCR-SSP方法,操作嚴(yán)格按照說明書操作。150V電泳15-20min,在紫外光下拍照記錄。
2 結(jié) 果
2.1 ABO血型 產(chǎn)婦張某血型為B型,患兒為B型。
2.2 Rh血型 產(chǎn)婦RhD血型在四批試劑鹽水介質(zhì)均為陰性,抗球蛋白介質(zhì)中,兩批陽性,兩批陰性。Rh因子為ce;患兒RhD血型為正常陽性,Rh因子為ce。基因分型結(jié)果同血清學(xué)結(jié)果,產(chǎn)婦張某含有RHD基因。結(jié)果見圖1。
2.3 血型抗體檢測 產(chǎn)婦和患兒血清存在游離抗體。產(chǎn)婦血清和患兒血清與1-10號譜細(xì)胞反應(yīng),鹽水介質(zhì)中無凝集,抗人球蛋白介質(zhì)中7號和9號不凝,其余都凝集。自身細(xì)胞均無凝集。增加11號Ce表型和12號cE表型細(xì)胞,確定抗體類型為抗-D抗體,見表1。采用間接抗人球蛋白方法,抗-D抗體效價(jià)為8。
2.4 交叉配血試驗(yàn) 與5例B型RhD陰性,表型為ce獻(xiàn)血員進(jìn)行交叉配血主次測均相合。采用B型Rh(D)陰性血400ml進(jìn)行臍靜脈或外周靜脈同步換血技術(shù)換血治療。
3 討 論
Rh血型是輸血醫(yī)學(xué)重要的血型系統(tǒng),主要包括D、c、c、E和e等5種抗原,其中D抗原具有很強(qiáng)的免疫原性,是引起新生兒溶血病的主要血型抗原,是最具臨床意義的Rh因子。弱D個體無論作為供者或是受者均具有臨床意義。對于弱D孕婦妊娠Rh陽性胎兒或Rh陰性孕婦妊娠弱D型胎兒時(shí)必須實(shí)施Rh同種免疫監(jiān)護(hù)[5]。
本次報(bào)道先證者為弱D孕婦,但是由于多次妊娠產(chǎn)生抗-D抗體。IgG抗D所致新生兒溶血,病情重,黃疸進(jìn)展很快,如治療不及時(shí)可致核黃疸甚至死亡。Rh系統(tǒng)新生兒溶血病換血治療原則是ABO血型同孩子,Rh血型同母親。本例患者是B型,母親是弱D表型。本例采用B型RhD陰性血進(jìn)行的換血治療。換入血液可換出大量血清中非結(jié)合膽紅素,降低血清膽紅素濃度,防止核黃疸發(fā)生。同時(shí)糾正貧血,防止心力衰竭。
由于Rh血型系統(tǒng)具有豐富而復(fù)雜的多態(tài)性和人種、民族等的差異,所以建立正確、準(zhǔn)確的檢測D變異體的基因分型策略、指導(dǎo)臨床輸血工作和新生兒溶血病等疾病的預(yù)防研究都有著重要的意義。
參考文獻(xiàn)
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[3] Kyenog-Hee,Kim,Kyung-Eum Kim:Primary anti-D immunization by DEL red blood cells.Korean J Lab Med,2009,29:361-365.
[4] 葉應(yīng)嫵,王毓三.全國臨床檢測操作規(guī)程[M].南京:東南大學(xué)出社,1991:1052-1053.
[5] 熊文,秦建江,劉艷,等.一個弱D15型家系研究.中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志,2007,2(24):35-37.