李文興 趙英

【摘要】目的評價白藜蘆醇在紫外線輻射（ultraviolet radiation， UVR）所致皮膚損傷中的作用。方法正常皮膚在白藜蘆醇和其藥物載體基質(zhì)的干預(yù)下經(jīng)設(shè)計劑量紫外線照射后，將各組樣本比較。結(jié)果白藜蘆醇組與自身空白對照組比較，豚鼠皮膚外觀及各層組織未見明顯差異；經(jīng)過同樣劑量紫外線照射，基質(zhì)對照組皮膚外觀及各層皮組織結(jié)構(gòu)均可見顯著改變。結(jié)論研究初步表明白藜蘆醇具有抗紫外線所致皮膚損傷特性。

【關(guān)鍵詞】紫外線；白藜蘆醇；皮膚；損傷

【中圖分類號】R148 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1004-4949（2013）07-10-02

白藜蘆醇即均-3，5，4-三羥基二苯乙烯（resveratrol，trans-3，5， 4'-trihydroxystilbene，stilbene）又稱作三羥基芪，其存在于葡萄、落花生、虎杖等等許多天然植物果實中。我們采用隨機(jī)配對，對白藜蘆醇抗紫外線損傷的藥學(xué)作用進(jìn)行了實驗動物學(xué)研究。實驗動物為豚鼠，經(jīng)皮膚進(jìn)行紫外線照射，觀察皮膚隨時間組織變化情況。予以分析討論。

1 材料與方法

1.1 實驗動物： 純白豚鼠500 ～ 600 g，雌雄各半，購自吉林大學(xué)動物部（動物號：2003-0007）。

1.2 光源： 采用保健紫外燈，功率30 W，含長波紫外線（UVA）和中波紫外線（UVB），購自上海富視燈泡廠。DRC-100X紫外線強(qiáng)度計由北京博朗特科技有限公司提供。JY92-Ⅱ超聲波均質(zhì)機(jī)購自寧波科生儀器廠。

1.3 白藜蘆醇： 由長春安泰生命科學(xué)研究所提供，基質(zhì)為市售冷霜，實驗時，將其配成含白藜蘆醇10%膏劑，經(jīng)過超聲和真空攪拌均質(zhì)處理。藥物基質(zhì)對照組涂有制備白藜蘆醇軟膏所用配方其余組份。自身對照組避光防曬處理。

1.4 動物處理： 參照朱愉[1]有關(guān)研究，豚鼠隨機(jī)分成白藜蘆醇干預(yù)組、藥物基質(zhì)對照組和自身對照組。實驗動物右側(cè)背部照射，另一側(cè)為遮蓋側(cè)（即自身對照組）。照射前先將豚鼠背部照射側(cè)皮膚剃毛，暴露3 cm × 5 cm范圍。均勻涂布。靜置5 min后，在距離動物皮膚10 cm處進(jìn)行紫外線光源照射。第一次正式照射前，先測定最小紅斑及光照射強(qiáng)度。開始每日1次，每次照射量：UVB為0.168 J/cm2，UVA為0.276 J/cm2，以后視皮膚對最小紅斑劑量適應(yīng)情況逐漸增加。照射60 d后，乙醚經(jīng)呼吸道麻醉，即刻取兩組背部對應(yīng)雙側(cè)皮膚，進(jìn)行組織學(xué)檢查[1～3]。觀察皮膚色澤、粗糙變硬程度、彈性及脫屑情況。

1.5 組織學(xué)檢查[3]：

將取下的皮膚用10%中性福爾馬林固定、石蠟包埋和切片，HE染色（觀察表皮厚度改變）、Van Gieson（VG）膠原纖維染色（觀察、比較各組間真皮層膠原纖維量變化）和過碘酸-雪夫反應(yīng)（PAS）染色（觀察、比較各組間基底膜厚度、均勻程度及結(jié)構(gòu)完整性）。

2 結(jié)果

皮膚組織觀察

2.1 外觀表現(xiàn)：

肉眼觀察可見經(jīng)紫外線照射豚鼠皮膚后，藥物對照組1周后可見照射皮膚輕度紅斑形成，爾后隨累積劑量增加膚色漸漸加深，出現(xiàn)表皮增厚、脫屑、粗糙變硬、失去光澤及彈性等一系列皮膚老化癥狀。白藜蘆醇組和自身對照組則無明顯異常改變。

2.2 表皮厚度：

HE染色切片顯示，白藜蘆醇組、自身對照組豚鼠皮膚較薄，由基底層、棘層、粒層和角質(zhì)層組成，其中棘細(xì)胞常散在分布。真皮內(nèi)主要細(xì)胞有成纖維細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。藥物基質(zhì)對照組表皮呈中度增厚，且見少量炎細(xì)胞浸潤。

2.3 真皮淺層成熟膠原纖維量：

VG染色切片顯示，白藜蘆醇組和自身對照組皮膚的真皮血管壁較薄，血管充盈，由結(jié)締組織及毛發(fā)、皮脂腺等皮膚附屬器官組成，膠原纖維是真皮結(jié)締組織的主要成分，呈束狀排列，在腺管周圍，纖維纖細(xì)且排列疏松。藥物對照組顯示真皮淺層膠原纖維染色減弱，纖維變細(xì)且排列稀疏，提示成熟膠原纖維減少。

2.4 基底膜厚度：

PAS染色顯示，白藜蘆醇組和自身對照組鏡下無明顯變化。藥物基質(zhì)對照組表皮與真皮交界處為基底膜帶， PAS陽性物質(zhì)增多，基底膜帶呈不規(guī)則增厚，斷裂。

3 討論

白藜蘆醇的藥用價值近年來受到國內(nèi)外廣泛關(guān)注[4]，作為一個手性天然藥物，深入研究開發(fā)其藥學(xué)性質(zhì)符合中藥現(xiàn)代化的發(fā)展要求。本文實驗結(jié)果初步表明，白藜蘆醇軟膏具有很好的抗紫外線輻射所致皮膚損傷的作用。由于地球環(huán)境質(zhì)量的惡化，地球暴露在越來越高的紫外線輻射劑量下，皮膚日光性損傷甚至皮膚癌變的危險因素增高[5]。為及時改善職業(yè)性室外作業(yè)人員的健康保護(hù)措施，研制更有效的抗紫外線所致皮膚損傷藥物顯得尤其迫切。白藜蘆醇廣泛存在于葡萄籽皮、岳樺樹葉等天然植物中，本文提示，其抗紫外線所致皮膚損傷的藥用性質(zhì)，具有一定科學(xué)價值。

參考文獻(xiàn)

[1]朱愉，多秀瀛.實驗動物的疾病模型[M].天津：天津科技翻譯公司出版，1991，557-559.

[2]羅東輝.中波紫外線的免疫抑制作用研究進(jìn)展[J].國外醫(yī)學(xué) 皮膚性病學(xué)分冊，1996，22（5）：268-271.

[3]杜卓民.實用組織學(xué)技術(shù)[M].第1版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2001，8-294.

[4]Michael Derrida. Resveratrol- Natural sources of Resveratrol[J].Science，1997，275：218-220.

[5]劉揚(yáng).紫外線致癌機(jī)理的研究狀況概述[J].中國公共衛(wèi)生學(xué)報，1999，18（3）：183-185.