周繼胡，丁 濤，溫富春，徐惠波

(吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院，長春 130012)

鉤藤為茜草科植物鉤藤〔Uncariarhynchophylla(Miq.)Jacks〕的帶鉤枝條。具有平肝熄風(fēng)、清泄肝火的功能。其主要成分是吲哚類生物堿，有鉤藤堿、去氫鉤藤堿、異去氫鉤藤堿等[1]?，F(xiàn)代研究[2]發(fā)現(xiàn)，鉤藤具有鎮(zhèn)靜和抗驚厥、降壓、抑制血小板聚集和血栓形成、對(duì)腦缺血有保護(hù)作用等活性。本實(shí)驗(yàn)室采用大孔樹脂提取鉤藤總生物堿，制備成膠囊劑,其純度達(dá)50%。并系統(tǒng)地從藥效學(xué)到安全性進(jìn)行了研究。本文僅對(duì)鉤藤總堿膠囊對(duì)原發(fā)性高血壓、腎性高血壓大鼠模型和正常大鼠的降壓效果進(jìn)行了研究。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 Wistar大鼠，雌性，200～250 g，購自長春市醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心，合格證號(hào):10-5112(大鼠)，原發(fā)性高血壓大鼠(SHR)雌雄各半，200～250 g，購自上海市高血壓研究所，合格證號(hào)02377。

1.2 藥物 鉤藤總堿膠囊，純度65%，0.25 g/粒，由本院化學(xué)室提供；陽性對(duì)照藥：降壓0號(hào)，由北京雙鶴藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：101419。

1.3 試劑及試劑盒 水合氯醛，河北高碑店市春光試劑廠生產(chǎn)，批號(hào)：960908；戊巴比妥鈉，上?；瘜W(xué)試劑分裝廠出品，批號(hào):84-06-12。血管緊張素Ⅱ(AgⅡ)、醛固酮(ALD)、內(nèi)皮素(ET)、心鈉素(ANP)放免試劑盒，北京市福瑞生物工程公司出品，一氧化氮(NO)測(cè)試盒,解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心出品。

1.4 儀器 RBP-1型大鼠尾動(dòng)脈血壓測(cè)定儀，中日友好臨床醫(yī)學(xué)研究所。

1.5 試驗(yàn)方法

1.5.1 對(duì)原發(fā)性高血壓模型動(dòng)物(SHR)的影響 取SHR大鼠，在動(dòng)物室適應(yīng)1周后，測(cè)定血壓。根據(jù)血壓將40只大鼠隨機(jī)分為4組，模型組，陽性藥降壓0號(hào)10.3 mg/kg給藥組，鉤藤總堿膠囊30.0、15.0 mg/kg2個(gè)劑量組；另設(shè)空白對(duì)照組10只,共計(jì)5個(gè)實(shí)驗(yàn)組。灌胃給藥1次/d，連續(xù)給藥3 d,分別于第1次給藥4 h、第2、3次給藥后1 h測(cè)定大鼠尾動(dòng)脈血壓,末次測(cè)定血壓后，用水合氯醛麻醉，腹主動(dòng)脈取血，測(cè)定NO、ANP、ALD含量或活性。

1.5.2 對(duì)腎性高血壓動(dòng)物模型的影響 取大鼠在動(dòng)物室適應(yīng)環(huán)境5 d后，測(cè)尾動(dòng)脈血壓，連續(xù)3次，取平均值為動(dòng)物手術(shù)前正常血壓。然后施二腎一夾手術(shù)，以300 mg/kg水合氯醛腹腔注射麻醉、消毒，游離左腎動(dòng)脈，用內(nèi)徑0.2 mm的銀夾夾閉，使腎動(dòng)脈狹窄，右腎不觸及，逐層縫合皮膚，手術(shù)在10 min內(nèi)完成。術(shù)后為了避免感染，腹腔注射青霉素50 U/只,連續(xù)7 d。術(shù)后第2周開始以1%NaCl溶液代飲用水，第3周以2%NaCl溶液代飲用水，正常飼養(yǎng),術(shù)后第3、4周測(cè)血壓，觀察血壓變化，待血壓平均升高30 mmHg以上,視模型成功。取模型成功的大鼠50只，隨機(jī)分為5組，分別為模型組，降壓0號(hào)10.3 mg/kg劑量給藥組，鉤藤總堿膠囊30.0、15.0、7.5 mg/kg 3個(gè)劑量組。灌胃給藥1次/d，連續(xù)給藥3 d，對(duì)照組同時(shí)給同體積的蒸餾水。分別于第1天給藥4、8、12 h及第2天給藥后1h、第3天給藥后1、24 h測(cè)尾動(dòng)脈血壓。末次測(cè)血壓后，即將動(dòng)物以水合氯醛麻醉，腹主動(dòng)脈取血，測(cè)定ET和AⅡ的活性。

1.5.3 對(duì)連續(xù)多次給藥后正常大鼠血壓的影響 取大鼠50只隨機(jī)分為5組，空白對(duì)照組，降壓0號(hào)10.3 mg/kg劑量給藥組，鉤藤總堿膠囊30.0、15.0、7.5 mg/kg 3個(gè)劑量組。給藥前，在動(dòng)物室適應(yīng)環(huán)境3 d后，測(cè)定正常的血壓。開始給藥，1次/d，連續(xù)給藥10 d,分別于給藥第3、7、10天給藥后1 h測(cè)定大鼠的血壓，觀察血壓的變化。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)原發(fā)性高血壓模型大鼠的影響 見表1。

表1 鉤藤總堿膠囊對(duì)SHR大鼠血漿中NO、ANP、ALD的影響(±s,n=10)

2.2 對(duì)腎性高血壓大鼠的影響 見表2。

表2 鉤藤總堿膠囊對(duì)SHR大鼠血漿中AⅡ、ET的影響(±s,n=10)

2.3 對(duì)連續(xù)多次給藥后正常大鼠血壓的影響 連續(xù)給藥第3天時(shí),各組動(dòng)物血壓均明顯下降，給藥7、10 d時(shí)血壓降低幅度穩(wěn)定的維持在10%左右。

3 結(jié)論

研究[3]發(fā)現(xiàn)，鉤藤具有明顯的降血壓作用，其主要有效成分為鉤藤總生物堿。因此，將鉤藤總堿研制成治療高血壓的新制劑，為臨床上高血壓患者就增加了新的選擇。

鉤藤總堿膠囊，能明顯降低原發(fā)性高血壓大鼠、腎性高血壓大鼠和正常大鼠的血壓，作用效果明顯，但起效較降壓0號(hào)慢，單次給藥降壓作用可維持12 h以上，連續(xù)多次給藥降壓幅度可維持在12%～20%左右，說明其作用效果平穩(wěn)持續(xù)。高血壓大鼠血中NO、ANP、ALD、AgⅡ及ET含量的變化結(jié)果可見，鉤藤總堿膠囊可明顯降低ALD的含量,使AgⅡ和ET有降低的趨勢(shì),但對(duì)ANP和NO沒有明顯的影響。推斷鉤藤總堿膠囊的降壓作用可能與腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)有關(guān)，與NO、ANP無關(guān)。

[1]王本祥.現(xiàn)代中藥藥理與臨床[M].天津:天津科技翻譯出版公司,2004:1100.

[2]汪江濤,丁伯平.鉤藤堿和異鉤藤堿藥理作用研究進(jìn)展[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)刊,2012,14(7):1224-1225.

[3]吳博雯.中醫(yī)藥治療高血壓病的研究進(jìn)展[J].四川中醫(yī),2012,30(7):144-146.