張靜蓉，陳忠

（海南師范大學(xué)熱帶動(dòng)植物生態(tài)學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海南?？?71158）

近年來，隨著家禽養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，禽類性別研究因其經(jīng)濟(jì)價(jià)值而日益受到重視.由于雞是最常用的研究禽類性別決定和性別分化的動(dòng)物模型，所以目前關(guān)于禽類性別決定的理解主要是源于對(duì)家雞（Gallus gallus domesticus）的研究.雞的性別與其經(jīng)濟(jì)價(jià)值有著直接的聯(lián)系，在蛋雞的集約化生產(chǎn)中，母雞的生產(chǎn)效益遠(yuǎn)高于公雞.在肉雞的生產(chǎn)養(yǎng)殖過程中，公雞的生長(zhǎng)速度快，生命力強(qiáng)，其生長(zhǎng)速度以及飼料利用率均顯著高于母雞.因此，研究禽類的性別決定機(jī)制和性別控制技術(shù)不僅在科研方面具有極其重要的意義，更在實(shí)際的生產(chǎn)當(dāng)中具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值.

1 雞的性別決定

1.1 家禽（雞）的性染色體

正常情況下，鳥類雌性為ZW異配型性染色體，雄性為ZZ同配型性染色體[1-4].早期的染色體核型分析研究表明，一些新頜型鳥類（家雞）的Z和W的相對(duì)大小明顯不同[5]，在進(jìn)化過程中，只有一小部分的Z和W區(qū)域出現(xiàn)了基因重組，且W染色體變得小于較原始的鳥類[6].家雞的Z染色體包含有7%的單倍體染色體組，而W僅包含1.5%[5]，而在更多的原始古鴿型鳥類中，如鴯鹋，鴕鳥，南方鶴鴕等，Z和W的性染色體通常是同態(tài)的[7].由此可知，在鳥類進(jìn)化的過程中，Z染色體正不停地重組產(chǎn)生新的染色體型，使得性別決定基因傾向于獨(dú)立調(diào)控性別的方向發(fā)展，同時(shí)也確保性染色體不至于因?yàn)榛虻母綦x而產(chǎn)生退化.

1.2 雞性別決定的可能機(jī)制和假說

性別決定基因是通過控制胚胎性腺的發(fā)育來實(shí)現(xiàn)性別決定的，因此性別決定的過程與性腺的發(fā)育和分化息息相關(guān).在鳥類的胚胎期，性腺形成的基本過程是保守的，但同時(shí)又具有非對(duì)稱性發(fā)育的獨(dú)特特征[8].性腺的分化在本質(zhì)上依賴于皮質(zhì)或髓質(zhì)的增殖以及生殖細(xì)胞的獲得.最早能夠發(fā)現(xiàn)性別分化的時(shí)期是在家禽孵化的第6～7d，這時(shí)在雄性性腺內(nèi)部的髓質(zhì)中曲細(xì)精管索（seminiferous cords）開始形成，同一時(shí)期在雌性性腺外部的皮質(zhì)層開始增殖[9].

1.2.1 雞性別決定的分子機(jī)制

近期的研究已獲得DMRT1、ASW、DAX1等多個(gè)可能與雞性別決定有重要關(guān)聯(lián)的候選基因，這些基因可能像哺乳動(dòng)物中的SRY基因一樣，與雞性別決定有著重要關(guān)聯(lián).

已有研究表明，同哺乳動(dòng)物的X染色體一樣，家禽的Z染色體中含有大量的控制睪丸性征表達(dá)基因[10]，其中之一就是DMRT1（DM-related tran?scription factor 1）.DMRT1位于Z染色體上，與W染色體不同源，是一種調(diào)控睪丸發(fā)育的基因，并且可能在決定雄性性別方面發(fā)揮主要的作用[11].有文獻(xiàn)報(bào)道，在雞胚胎性腺分化之前，DMRT1在雄性胚胎的性腺中的表達(dá)量遠(yuǎn)高于雌性，并且在睪丸的形成過程中發(fā)揮作用.

已經(jīng)證實(shí)，在雌性雞胚胎發(fā)育的過程中，定位在W染色體短臂端的ASW基因（avian sex-specific W-linked）起到了主導(dǎo)作用.有學(xué)者認(rèn)為，ASW基因之所以在雌性性別決定過程發(fā)揮作用，是由于其產(chǎn)物可與Z連鎖的ZPKIC基因表達(dá)產(chǎn)物結(jié)合，從而抑制某些睪丸分化所必須的因子，并且激活卵巢決定因子[12].

DAX1基因（dosage sensitive sex reversal，adre?nal hypoplasia congenital，X chromosome，number 1）是一種基因編碼蛋白，具有介導(dǎo)卵巢發(fā)育的功能.實(shí)驗(yàn)表明，在雞卵巢發(fā)育過程中，DAX1基因的表達(dá)量保持穩(wěn)定；而睪丸發(fā)育過程中，DAX1基因的表達(dá)量則顯著下降，這說明DAX1可能參與性別決定，并參與調(diào)控雌性發(fā)育[13].此外，1994年Bardoni在轉(zhuǎn)DAX1基因小鼠的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)該基因編碼蛋白發(fā)生不正常復(fù)制時(shí)，其結(jié)果會(huì)使得小鼠發(fā)生從雄性到雌性的性逆轉(zhuǎn)，并且DAX1基因發(fā)生功能性突變能引起腎上腺發(fā)育不全[14].

不同的性連鎖基因在禽類性別決定的調(diào)控中起著不同的作用，但目前對(duì)它們與其他一些性別決定基因間的聯(lián)系還知之甚少，因此禽類性別決定的分子機(jī)制還需要進(jìn)一步的探究和討論.

1.2.2 Z染色體的劑量效應(yīng)和W染色體的顯性效應(yīng)假說

假說認(rèn)為，Z染色體上攜帶雄性決定基因且具有劑量效應(yīng)，該效應(yīng)在雄性發(fā)育的初期以Z染色體的數(shù)量來誘導(dǎo)個(gè)體的性別發(fā)育，即，兩個(gè)Z染色體時(shí)為雄性，一個(gè)Z染色體時(shí)為雌性；W染色體上攜帶著顯性的卵巢決定基因，它具有顯性效應(yīng)，使ZW成為雌性[15].但是由于鳥類缺乏非整倍體的性染色體個(gè)體，所以很難驗(yàn)證Z劑量效應(yīng)和W顯性效應(yīng)假說.因此，性別決定類型為ZW型的禽類的性別決定機(jī)制是由W雌性決定基因決定，還是由Z基因的劑量差異所決定，還是兩種機(jī)制同時(shí)存在還不清楚.

1993年Thorne等報(bào)道一群ZZW三倍體雞發(fā)育成間性.這些三倍體的雞在出雛時(shí)具有雌性的外部表型，但同時(shí)具有卵巢體和睪丸，并分別位于身體左右兩側(cè)，隨著年齡的增長(zhǎng)其左側(cè)卵巢逐步退化[16].卵巢的出現(xiàn)說明W染色體可能攜帶雌性決定基因；而其卵巢組織隨年齡增長(zhǎng)而退化可能與假定的W雌性決定因子的作用被Z染色體以數(shù)量上的優(yōu)勢(shì)所削弱有關(guān).該三倍體性染色體雞的證據(jù)支持了Z劑量假說，說明W染色體具有雌性決定作用但能被Z連鎖雄性決定基因的劑量效應(yīng)所影響.

2004年，Arit等發(fā)現(xiàn)1例雌性大葦鶯（great reed warbler）具有2個(gè)Z連鎖微衛(wèi)星標(biāo)記的雜合子遺傳型，從而推斷該個(gè)體可能具有2A∶ZZW的基因型[17].這個(gè)事例支持了W可能攜帶雌性決定因子的假說，并做出了性別決定與Z染色體數(shù)目無關(guān)的推斷.但是，推斷的ZZW基因型并沒有得到核型分析的證實(shí)，且其2個(gè)Z等位基因也沒有遺傳給后代.究竟W染色體是否獨(dú)立決定性別還有待進(jìn)一步的探索和確定.

2010年，有學(xué)者提出了關(guān)于一只雌雄嵌合體家雞的詳細(xì)研究報(bào)告[18]，報(bào)告稱這只雞是側(cè)面性別嵌合，左側(cè)雄性右側(cè)雌性.在雄性一側(cè)表現(xiàn)出明顯的雄性特征，具有巨大的肌肉型胸部和鋒利的腳爪，而雌性一側(cè)則不具備任何雄性特征.經(jīng)驗(yàn)證，其雄性一側(cè)的細(xì)胞內(nèi)全部都是ZZ性染色體，而在雌性一側(cè)的卻是ZW型，但其性腺內(nèi)同時(shí)含有具有ZZ染色體的細(xì)胞和具有ZW染色體的細(xì)胞.然而，在實(shí)驗(yàn)條件下，卻無法實(shí)現(xiàn)將帶有雄性基因的細(xì)胞和帶有雌性基因的細(xì)胞混合進(jìn)入同一個(gè)雞胚細(xì)胞，并且實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)雌性細(xì)胞不能夠在雄性的性腺內(nèi)存活，反之亦然.

基于曾有研究指出沒有發(fā)現(xiàn)不帶Z基因鳥類，而哺乳動(dòng)物中有只帶X基因的性別類型的研究結(jié)論[19-20]，Zhao（2010）在討論了該嵌合體雞之后作出推斷：“高劑量的Z連鎖基因在ZZ基因型的細(xì)胞中可能起到‘增強(qiáng)雄性’的作用”[18].

因此，Z劑量和決定性的W假設(shè)仍舊都有可能，最終性別究竟是決定于Z的劑量效應(yīng)（兩個(gè)是雄性，一個(gè)是雌性）或者決定于W的顯性效應(yīng)，抑或決定于它們共同的作用仍需要進(jìn)一步的研究探討.

1.2.3 常染色體平衡假說

常染色體平衡學(xué)說最早是由美國(guó)生物學(xué)者Bridges以果蠅為材料提出并證實(shí)的.Bridges認(rèn)為生物的性別是由細(xì)胞核內(nèi)染色體上雄性化基因系統(tǒng)與雌性化基因系統(tǒng)的平衡所決定的，基因系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)會(huì)影響胚胎在發(fā)育早期向某一性別方向發(fā)育[21].1954年，Crew在文獻(xiàn)中報(bào)道，雞的性別由性染色體個(gè)數(shù)與常染色體倍數(shù)之比決定[22]，Newcomer等則認(rèn)為，常染色體數(shù)的增加使性染色體與常染色體之比的平衡趨于雌性[23].

1.2.4 H-Y抗原決定假說

雄性特異性抗原（male-specific antigen）通常也稱為雄性特異性弱組織相容性Y抗原（male-spe?cific minor histocompatibility Y antigen），簡(jiǎn)稱H-Y抗原，是一組雄性特異性基因的表達(dá)產(chǎn)物，Eich?wald等在1955年首次發(fā)現(xiàn)這一抗原，Eichwald在研究小鼠雌性時(shí)，發(fā)現(xiàn)雄鼠對(duì)移植皮膚的排斥反應(yīng)，比同種雌鼠對(duì)移植皮膚的排斥反應(yīng)更為迅速，從而推論Y染色體上存在一種很弱的移植抗原，該抗原由次要組織親和點(diǎn)（H）所決定[24]，進(jìn)而提出了H-Y抗原和H-Y抗體的名稱[25].H-Y抗原在異性間組織移植的排斥反應(yīng)和性別控制等方面的研究中具有重要的理論和實(shí)踐意義.1975年Wachel等人，提出一個(gè)假說：H-Y抗原可能是性別決定基因的產(chǎn)物.在鳥類和某些兩棲類中，該基因編碼卵巢[26]，即，在鳥類中，H-W決定雌性性別[27].然而，Muller等在研究由雌二醇誘導(dǎo)得到的雌性化的小雞時(shí)發(fā)現(xiàn)，基因型為ZZ的小雞中也有所謂的ZW抗原表達(dá)，只是抗原水平低于基因型為ZW的個(gè)體[28].

2 雞的性別控制技術(shù)

在自然界中，偶有發(fā)生禽類的性逆轉(zhuǎn)現(xiàn)象.性逆轉(zhuǎn)按照形成原因的不同劃分為：獲得性性逆轉(zhuǎn)（acquired sex reversal）和先天性性逆轉(zhuǎn)（congenital sex reversal）[29]，照發(fā)生頻次的不同劃分為：經(jīng)常性性逆轉(zhuǎn)（constant sex reversal）、偶發(fā)性性逆轉(zhuǎn)（spo?radic sex reversal）.

1949年，Hutt在經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)后認(rèn)為，發(fā)生性逆轉(zhuǎn)的母雞，其卵巢往往伴隨有瘤腫或其他病理變化[30]，這樣的結(jié)論引發(fā)了許多關(guān)于雞的性逆轉(zhuǎn)機(jī)制的探討.然而，在家雞養(yǎng)殖過程中也曾發(fā)現(xiàn)自然性逆轉(zhuǎn)的現(xiàn)象：20世紀(jì)80年代，一只曾經(jīng)產(chǎn)過卵的洛島紅母雞完全轉(zhuǎn)變?yōu)楣u，具有明顯的雄性第二性征和求偶行為.該雞的染色體組型為ZW型，但較正常的雞增加了部分常染色體.在成功與蘆花母雞交配后，該變性雞后代孵化率較低，雛雞死亡率很高，其后代雌雄比例不是1∶1[32].2010年，Zhao等報(bào)道了一只側(cè)面性別嵌合的雌雄嵌合體家雞[18]，并從細(xì)胞和基因的角度進(jìn)行了分析.

在生產(chǎn)應(yīng)用中，如何人為控制下家禽的性別比例，日益為人們所廣泛關(guān)注.薛社普發(fā)現(xiàn)用雛雞的卵巢制成組織抗原，并用該組織抗原免疫家禽所獲得的兩種抗血清分別處理性腺分化前的雞胚可顯著提高雞胚的雌性性比[33]，實(shí)驗(yàn)效果穩(wěn)定并且顯著[34].使用一定劑量的外源雌激素浸泡未開始分化的早期鴨胚，不僅改變鴨胚性比例還可以誘導(dǎo)胚胎在表現(xiàn)型上不同程度的出現(xiàn)了雌性特征[35].戴必勝認(rèn)為葡萄糖氧化代謝強(qiáng)弱可影響子代的性比，并且改變了受精卵生存的內(nèi)環(huán)境，給雞添喂葡萄糖后，實(shí)驗(yàn)組的子代較對(duì)照組相比性別比例偏差較大，效果極顯著[36].汪植三在大量的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)禽類的雌雄比例會(huì)隨著孵化溫度的變化而變化，雌雛率隨著孵化溫度下降而上升，但孵化率較低[37].王光英等利用睪丸組織勻漿液作為性控液處理母禽的產(chǎn)道和公禽的精液，發(fā)現(xiàn)性控液可顯著改變性比[38].

此外，芳香化酶抑制劑誘導(dǎo)禽類性別分化技術(shù)也日漸成熟.芳香化酶是合成雌激素的重要酶類之一，其作用是在雞的性腺分化過程中促進(jìn)雌激素生成.因此，在誘導(dǎo)禽類性別分化的過程中，運(yùn)用芳香化酶抑制劑處理雞胚，可大大抑制芳香化酶的活性，減少雌激素的生成.而睪丸酮濃度的相對(duì)增加，則會(huì)促進(jìn)睪丸組織的發(fā)育,使得胚胎向雄性轉(zhuǎn)化.Alex等驗(yàn)證了芳香化酶抑制劑誘導(dǎo)禽類性比的可行性，在他的實(shí)驗(yàn)中，使用芳香化酶抑制劑注射孵化5 d的胚蛋,結(jié)果孵出的雛雞100%為雄性，性逆轉(zhuǎn)的公雞有2個(gè)睪丸，但比正常稍小，形態(tài)不規(guī)則，睪丸有精子產(chǎn)生，亦比正常稍少[39].

近年來，已有學(xué)者證明，免疫去勢(shì)可以顯著提高雞肉品質(zhì)[40].此外，雄激素抗原免疫母雞可顯著提高其產(chǎn)蛋性能[41]；褪黑素抗原免疫母禽可增強(qiáng)其內(nèi)分泌功能，提高產(chǎn)蛋率[42-45]；抑制素可促進(jìn)卵泡成熟[46].運(yùn)用方面，費(fèi)維真等使用GnRH抗原人工免疫各日齡公雞后發(fā)現(xiàn)，GnRH免疫去勢(shì)公雞可以促進(jìn)公雞的生長(zhǎng)發(fā)育[47]，王進(jìn)榮等使用人工合成的抑制素作為免疫抗原，顯著提高了母雞的產(chǎn)蛋率，并且促進(jìn)了其卵泡的發(fā)育[48]，也有文獻(xiàn)報(bào)道，抑制素免疫母雞可以提高母雞的日產(chǎn)蛋率[49].Halawani等使用PRL免疫火雞，抑制了PRL的分泌，并且大幅提高了母雞的產(chǎn)蛋量[50].越來越多的研究表明，運(yùn)用生殖激素調(diào)控技術(shù)提高家禽品質(zhì)已成為當(dāng)今乃至今后一段時(shí)期內(nèi)的研究和運(yùn)用的熱點(diǎn).

3 小結(jié)與展望

目前禽類的性決定機(jī)制尚不十分清楚，除了公認(rèn)的性染色體理論，還有常染色體/Z染色體平衡理論的爭(zhēng)論.然而，隨著對(duì)禽類性別決定機(jī)制研究的深入，不論是從分子機(jī)制的角度還是Z劑量和W顯性效應(yīng)假說的角度來看，禽類性別決定的機(jī)制可能更多的傾向于多種機(jī)制共同作用的結(jié)果.

結(jié)合分子機(jī)制來看，Z劑量效應(yīng)和W顯性效應(yīng)假說更加適合解釋家禽的性別決定機(jī)制：Z染色體具有DMRT1等Z連鎖基因，這些基因調(diào)控睪丸的發(fā)育，并且雄性胚胎性腺中的表達(dá)量遠(yuǎn)高于雌性，因此，當(dāng)ZZ的基因型出現(xiàn)時(shí)，Z染色體由于其攜帶的多個(gè)Z連鎖基因共同作用而顯現(xiàn)Z劑量效應(yīng).同樣，W染色體同樣具有ASW等W連鎖基因，當(dāng)ZW基因型出現(xiàn)時(shí)，ASW基因的產(chǎn)物由于其可與Z連鎖的ZPKIC基因表達(dá)產(chǎn)物結(jié)合從而抑制某些睪丸分化所必須的因子并且激活卵巢決定因子而抑制Z基因型的表達(dá)，從而顯現(xiàn)出W顯性效應(yīng).這也很好的解釋了ZZW基因型的三倍體雞卵巢最終退化的原因，即，盡管W的顯性效應(yīng)抑制了Z連鎖基因?qū)π坌孕詣e的調(diào)控作用，但多出來的Z基因卻彌補(bǔ)了這一問題的出現(xiàn)，使得該三倍體雞雖然表現(xiàn)型為雌性特征，但其卵巢在ZZW基因的調(diào)控下逐漸退化.

隨著科技的進(jìn)步及更多的家禽性別調(diào)控基因的發(fā)現(xiàn)，性別決定分子機(jī)制將會(huì)逐漸成為研究的熱點(diǎn).而基于性別決定機(jī)理的性別調(diào)控技術(shù)也會(huì)，在家禽養(yǎng)殖業(yè)的優(yōu)化養(yǎng)殖方面發(fā)揮更大的作用.

[1] Fridolfsson A K,Cheng H,Copeland N G,et al.Evolution of the avian sex chromosomes from an cestral pairof auto?somes[J].PNAS,1998,95:8147-8152.

[2] Marshall Graves J A.Weird animal genomes and the evolu?tion of vertebrate sex and sex chromosomes[J].Annual Review of Genetics,2008,42:565-586.

[3] Nanda I,Shan Z,Schartl M,et al.300 million years of con?served synteny between chicken Z and human chromo?some 9[J].Nature Genetics,1999,21:258-259.

[4] Stiglec R,Ezaz T,Marshall Graves J A.A new look at the evolution of avian sex chromosomes[J].Cytogenetic and Genome Research,2007,117:103-109.

[5] Marshall Graves J A,Shetty S.Sex from W to Z:evolution of vertebrate sex chromosomes and sex determining genes[J].Journal of Experimental Zoology,2001,290:449-462.

[6] Mank J E,Ellegren H.Parallel divergence and degradation of the avian W sex chromosome[J].Trends in Ecology&Evolution,2007,22:389-391.

[7] Ogawa A,Murata K,Mizuno S.The location of Z-and W-linked marker genes and sequence on the homomor?phic sex chromosomes of the ostrich and the emu[J].PNAS,1998,95:4415-4418.

[8] Smith C A,Andrew H S.Sex determination in the chicken embryo[J].Journal of experimental Zoology,2001,290:691-699.

[9] Smith C A,Andrew H S.Sex determination:insights from the chicken[J].BioEssays,2004,26:120-132.

[10] Bellott D W,Skaletsky H,Pyntikova T,et al.Conver?gent evolution of chicken Z and human X chromosomes by expansion and gene acquisition[J].Nature,2010,466:612-616.

[11] Smith C A,Roeszler K N,Ohnesorg T,et al.The avian Z-linked gene DMRT1 is required for male sex determi?nation in the chicken[J].Nature,2009,461:267-271.

[12] 孟和.雞性別決定機(jī)制及相關(guān)基因研究進(jìn)展[J].動(dòng)物學(xué)雜志,2005,40(2):106-111.

[13] Gao Z Y.Molecular Mechanism of Sex Determination[J].Shanghai Journal of Animal Husbandry and Veteri?nary Medicine,2009,2:62-63.

[14] Bardoni B.A dosage sensitive locus at chromosome Xp21 is involved in male to female sex reversal[J].Nature Gen?et,1994,7:497-501.

[15] Melamed E,Arnold A P.Regional differences in dosage

compensation on the chicken Z chromosome[J].Ge?nome Biology,2007,8:202.

[16] Thorne M H,Sheldon B L.Triploid intersex and chime?ric chickens:useful models for studies of avian sex deter?mination[M]//K.C.Reed，JAM.Graves,Sex chromo?somes and sex-determining genes.Chur Switzerland:Harwood Academic Publishers,1993:201-208.

[17] Arit D,Bensch S,Hansson B.Observation of a ZZW fe?male in a natural population:implications for avian sex de?termination[J].Proceedings Biological Sciences,2004,271(4):249-251.

[18] Zhao D,McBride D,Nandi S,et al.Somatic sex identity is cell autonomous in the chicken[J].Nature,2010,464:237-242.

[19] Kuroda Y,Arai N,Arita M T,et al.Absence of Z-chro?mosome inactivation for five genes in male chickens[J].Chromosome Research,2001,9:457-468.

[20] Melamed E,Arnold A P.Regional differences in dosage compensation on the chicken Z chromosome[J].Ge?nome Biology,2007,8:202.

[21] Bridges B C.Genetics of sex in drosophila[J].Genetica,1932,22:951.

[22] Crew F.The inheritance of Female Dimorphism in the Damselfly[J].Ischnura Damula,Genetics,1964,49(3):513-519.

[23] Newcomer E H,Donnelly G M.A cytological Study of Sex Reversal in the Domestic Fowl[J].Poultry Science,1960,51:208.

[24] Eichwald E J,Silmse C R.Skin[J].Transplantation bulle?tin,1955,2:148-149.

[25] Eichwald E J.H-Y and serendipity[J].Hum Genet,1981,58:6-8.

[26] Wachtel S S,Ohno S,Koo G C.Possible role for H–Y antigen in the primary determination of sex[J].Nature,1975,257:235-236.

[27] 王建平.家禽的性別決定和性反轉(zhuǎn)[J].中國(guó)家禽,2001,19(3):28-30.

[28] Muller U,Zenes M T,Wolf U.Appearance of H-W(H-Y)antigen in the gonads of oestradiol sex-reversed male chicken embryos[J].Nature,1979,280:142-144.

[29] 杜繼煜.性反轉(zhuǎn)[J].生物學(xué)通報(bào),2006,10(41):35.

[30] Hutt F B.Genetics of the fowl.Journal of genetics[J].1949,32(2):277-285.

[31] Liu C K,Ku K Y.Histological changes in the gonad of Monopterus during sex transformation[J].Acta Hydro?bio Sinica,1951,2(1-2):85-109.

[32] 劉祖洞.家雞性轉(zhuǎn)換的遺傳學(xué)研究[J].遺傳學(xué)報(bào),1980,10(7):103-110.

[33] 薛社普.抗髓質(zhì)及抗皮質(zhì)血清對(duì)雞胚性分化的作用[J].實(shí)驗(yàn)生物學(xué)報(bào),1964,12（9）:53-64.

[34] 易治明,張志霞.雞性別控制的研究[J].甘肅畜牧獸醫(yī),1986（4）:17-18.

[35] Xu Y D,Gender control of home duck[J].Journal of Xiamen University,1992,21(6):692-695.

[36] 戴必勝.給雞添喂葡萄糖對(duì)雛雞性別的影響[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),1993(1):20-21.

[37] 汪植三.生態(tài)因子對(duì)雞性別比的影響[J].家畜生態(tài),1995,16(1):24-26.

[38] 王光瑛,戴求仲,王長(zhǎng)康,等.番鴨性別控制的研究[J].福建農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1998,27(2);220-226.

[39] Alex F,Smith R G.Aromatase inhibitor and sex determi?nation in chickens[J].Science,1992,255:467-470.

[40] 段金琳,邵凡,凌遙,等.去勢(shì)對(duì)雞肉品質(zhì)及風(fēng)味的影響[J].中國(guó)家禽,2012,34（2）:14-17.

[41] 張居農(nóng).雄激素主動(dòng)免役對(duì)不同生理狀況母雞產(chǎn)蛋率的影響[J].石河子農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào),1997(1):34.

[42] 劉淑英.褪黑素主動(dòng)免疫對(duì)鵪鶉生殖內(nèi)分泌影響的研究[J].內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2002,20(4):22-25.

[43] 何蘭花.褪黑激素被動(dòng)免疫對(duì)母鴨卵泡發(fā)育和垂體激素的影響[J].養(yǎng)禽與禽病防治,2004(11):7-8.

[44] 何蘭花.褪黑激素被動(dòng)免疫對(duì)母鴨性激素的影響[J].中國(guó)免疫學(xué)雜志,2005,22(3):205-206.

[45] Mashaly M M,Webb M L.Relationship between proges?terone and egg production in pheasants[J].Poultry Sci?ence,1982,(61)5:982-987.

[46] 何蘭花.抑制素免疫對(duì)禽類繁殖的影響[J].動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué),2003,21(1):8-10.

[47] 費(fèi)維真,王相友.免疫去勢(shì)對(duì)公雞生長(zhǎng)發(fā)育及睪丸組織結(jié)構(gòu)和功能的影響[J].中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào),1994,32(1):63-67.

[48] 王進(jìn)榮,楊利國(guó),王元興.人抑制素主動(dòng)免疫對(duì)母雞產(chǎn)蛋和內(nèi)分泌的影響[J].中國(guó)畜牧雜志,2001,37（2）:9-11.

[49] Satterlee D G,Cadd G G,Fiorettit W C.Active immuni?zation of broiler breeder hens with a recombinant chicken inhibin fusion protein enhances egg lay[J].Poultry Sci?ence,2002,81:519-528.

[50] Halawani E L,Whitiny S E,Silsby J L,et al.Active immu?nization with vasoactive intestinal peptide in terkey hens[J].Poult Sci,2000,79(3):349-354.