周作強(qiáng)，丁晴晴，劉其根，王有基，胡夢(mèng)紅

上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，上海201306

近年來(lái)，盲目追求高密度養(yǎng)殖使得貝類生存環(huán)境惡化，進(jìn)而引發(fā)扇貝［1-2］、九孔鮑(Haliotis diversicolor aquatilis)［3］、蛤蜊［4］和牡蠣［5］等高死亡率，從而導(dǎo)致經(jīng)濟(jì)貝類產(chǎn)量大幅下降。隨著水體富營(yíng)養(yǎng)化引發(fā)的一系列生態(tài)問(wèn)題的出現(xiàn)，如有毒水華藻類，水體缺氧等［6-7］，水體富營(yíng)養(yǎng)化受到各國(guó)學(xué)者的廣泛關(guān)注。其中，與水體富營(yíng)養(yǎng)化相伴出現(xiàn)的水體缺氧問(wèn)題已被證實(shí)是導(dǎo)致我國(guó)煙臺(tái)海域扇貝大規(guī)模死亡的主要原因［8］。Cheng等［9］的研究也表明，較低溶氧條件(低于2．05mg·L-1)會(huì)導(dǎo)致九孔鮑大量死亡。

水體溶氧是水生動(dòng)物的重要限制因子之一［10］，大量研究表明，水體缺氧將影響到貝類的行為［11］、耗氧率［12-13］、新陳代謝［14-15］、存活率［16-17］和生長(zhǎng)［18］，以及貝類的免疫應(yīng)答［9］等諸多方面。長(zhǎng)時(shí)間暴露在缺氧環(huán)境中將對(duì)貝類免疫系統(tǒng)及抗病能力造成嚴(yán)重?fù)p害，甚至導(dǎo)致貝類死亡［9，19-20］。

貝類屬于無(wú)脊椎動(dòng)物，其體內(nèi)不具備特異性免疫系統(tǒng)，沒(méi)有特異性免疫淋巴細(xì)胞、抗體、免疫球蛋白，也沒(méi)有二次免疫過(guò)程，僅具有血細(xì)胞介導(dǎo)的較為完善的非特異免疫系統(tǒng)［21］。然而貝類可以通過(guò)一些異于脊椎動(dòng)物的獨(dú)特免疫機(jī)制來(lái)抵抗外界病原體的侵入，同時(shí)能夠進(jìn)行異己物質(zhì)的識(shí)別［22-23］，貝類的這種免疫機(jī)制可以分為細(xì)胞免疫與體液免疫。本文概括了國(guó)內(nèi)外有關(guān)缺氧脅迫對(duì)貝類免疫系統(tǒng)影響及其機(jī)理的研究進(jìn)展，將為貝類養(yǎng)殖學(xué)以及病害學(xué)領(lǐng)域的深入研究提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。

1 缺氧對(duì)貝類細(xì)胞免疫的影響

1．1 缺氧對(duì)血細(xì)胞總數(shù)(THC)的影響

貝類血細(xì)胞涉及到吞噬作用、呼吸爆發(fā)、包囊作用、炎癥反應(yīng)以及傷口愈合等一系列免疫防御反應(yīng)［24］。因此，血細(xì)胞在缺乏特異性免疫以及免疫記憶功能的雙殼貝類防御系統(tǒng)中的作用至關(guān)重要［25-26］。病毒、污染物以及環(huán)境等脅迫因子不僅影響循環(huán)血細(xì)胞的數(shù)量，還影響其活力。當(dāng)然，循環(huán)血細(xì)胞和非循環(huán)血細(xì)胞處于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡中，循環(huán)血細(xì)胞的數(shù)量受血細(xì)胞在血淋巴與組織間的遷移以及細(xì)胞裂解或增值的雙重影響［27］。

大量研究證實(shí)，貝類THC與水體溶氧濃度正相關(guān)。Chen等［28］的研究證實(shí)，櫛孔扇貝(Chlamys farreri)THC會(huì)隨溶氧濃度的降低而逐漸減少，并且在溶氧降至2．5 mg·L-1時(shí)下降46%，顯著低于對(duì)照組。同樣，在 2．05 mg·L-1溶氧條件下暴露 24 h，九孔鮑 THC 下降27%［9］。Yu 等［19］的研究也表明，缺氧會(huì)導(dǎo)致四角蛤蜊(M．veneriformis)THC水平的下降。Wang等［29］的研究證實(shí)，在3種不同鹽度條件下缺氧組(1．5 mg·L-1)翡翠貽貝(Perna viridis)血淋巴中的THC始終低于正常溶氧組(6．0 mg·L-1)，該實(shí)驗(yàn)中THC的異變除以上所提到的血細(xì)胞溶解或擴(kuò)散外，還可能與鹽度導(dǎo)致血淋巴中自由水的滲透有關(guān)。THC的下降勢(shì)必導(dǎo)致免疫功能退化［26］。血淋巴中THC的下降可能是血細(xì)胞快速向外周組織擴(kuò)散所致，例如貝類在產(chǎn)卵期間會(huì)出現(xiàn)大量血細(xì)胞向生殖腺遷移現(xiàn)象［30-32］。現(xiàn)有的研究還不能確定缺氧是否會(huì)刺激血細(xì)胞的外滲。缺氧導(dǎo)致的THC減少是由血細(xì)胞裂解還是血細(xì)胞遷移引起還需深入研究。

Matozzoa等［30］指出，缺氧脅迫會(huì)導(dǎo)致雞簾蛤(Chamelea gallina)的THC降低，但暴露于缺氧條件下24 h的處理組經(jīng)過(guò)24 h的正常溶氧處理后，其THC可恢復(fù)到正常水平;而暴露于缺氧條件下48 h的處理組經(jīng)過(guò)24 h的正常溶氧處理后，其THC仍顯著低于正常水平?？諝獗┞?缺氧)被證實(shí)會(huì)導(dǎo)致四角蛤蜊THC顯著下降，24 h空氣暴露(由于貝類只能利用溶解于水中的氧氣，因此空氣暴露則表示處在一種完全無(wú)氧的狀態(tài))處理組在放回正常溶氧的海水24 h后，THC能完全恢復(fù)。但是48 h缺氧處理組在24 h復(fù)氧條件下暴露，THC只能得到部分恢復(fù)［19］。類似的情況也在雞簾蛤［33］和翡翠貽貝［29，34］的實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)?？梢?jiàn)短時(shí)間的空氣暴露導(dǎo)致貝類THC的下降具有可恢復(fù)性，而隨著暴露時(shí)間的延長(zhǎng)(如超過(guò)48 h)，這種可恢復(fù)性會(huì)逐漸減弱，甚至出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。

1．2 缺氧對(duì)吞噬作用的影響

貝類的細(xì)胞免疫主要通過(guò)吞噬作用完成，吞噬作用在控制和殺滅入侵異物上起到了關(guān)鍵作用［27，35-36］。血細(xì)胞吞噬作用過(guò)程主要包括:識(shí)別趨化、粘附、內(nèi)吞和殺滅消化4個(gè)階段。研究表明，在2．05 mg·L-1溶氧條件下暴露 24 h 以及 3．57 mg·L-1溶氧條件下處理12 h均會(huì)導(dǎo)致九孔鮑吞噬活性的顯著下降［9］。Wang 等［29］的研究結(jié)果表明，缺氧組(1．5 mg·L-1)翡翠貽貝在不同鹽度條件下均低于正常溶氧組(6．0 mg·L-1)。當(dāng)四角蛤蜊［19］暴露在缺氧環(huán)境中超過(guò)24 h后其吞噬活性也會(huì)降低。在貽貝中［37］，這種下降趨勢(shì)明顯來(lái)得更快，只需暴露于缺氧條件下30 min，其細(xì)胞吞噬活性就顯著下降。

Pampanin等［33］的研究表明，雞簾蛤的吞噬活性在缺氧條件下暴露1 d后會(huì)出現(xiàn)下降，并且這種下降至少需要3 d時(shí)間才能完全恢復(fù)。雞簾蛤的吞噬活性在2個(gè)缺氧處理組(暴露時(shí)間分別為24和48 h)中均出現(xiàn)顯著下降，而24 h復(fù)氧處理后24 h缺氧處理組吞噬活性稍高于對(duì)照組，但48 h缺氧處理組并未表現(xiàn)出恢復(fù)的跡象［33］。缺氧將導(dǎo)致四角蛤蜊吞噬效率顯著下降。24 h空氣暴露處理組在放回海水中24 h后幾乎能完全恢復(fù)。但是48 h缺氧處理組經(jīng)24 h復(fù)氧后，只有THC和酚氧化酶(PO)水平得到部分恢復(fù)［19］。Wang等［34］的研究也表明，在20°C 條件下，相對(duì)于正常溶氧組(6．0mg·L-1)，缺氧組(1．5mg·L-1)翡翠貽貝血細(xì)胞的吞噬效率顯著降低，然而轉(zhuǎn)移到正常溶氧24 h后，這種降低可以完全恢復(fù)。

雖然導(dǎo)致吞噬作用衰退現(xiàn)象的機(jī)理還不是很清楚，但能夠肯定的是缺氧確實(shí)影響了貝類的吞噬能力，并且這種衰退恢復(fù)較慢，恢復(fù)能力隨著缺氧暴露時(shí)間的延長(zhǎng)而減弱。

1．3 缺氧對(duì)活性氧(ROS)含量的影響

血細(xì)胞中的顆粒細(xì)胞在環(huán)境脅迫、微生物或異物刺激下會(huì)出現(xiàn)呼吸爆發(fā)，伴隨大量的胞毒活性氧產(chǎn)生，例如超氧陰離子(·O2-)、過(guò)氧化氫(H2O2)、單線態(tài)氧、羥自由基、硝酸鹽超氧化物陰離子和超鹵化物等。這些活性氧可造成細(xì)胞的膜損傷，DNA斷裂，酶抑制和氨基酸氧化等毒性效應(yīng)［38］。雖然活性氧具有極強(qiáng)的殺毒滅菌能力，但過(guò)多的活性氧會(huì)導(dǎo)致生物氧化應(yīng)激，使細(xì)胞損害、突變、死亡，免疫功能下降等［39-40］。

缺氧脅迫對(duì)貝類細(xì)胞活性氧含量的影響是正面還是負(fù)面還存在一定爭(zhēng)議［9，41-42］。Cheng 等［9］發(fā)現(xiàn)，在2．05mg·L-1溶氧條件下暴露24 h會(huì)導(dǎo)致臺(tái)灣九孔鮑細(xì)胞中ROS含量下降。Yu等［19］的研究結(jié)果也證實(shí)，缺氧會(huì)導(dǎo)致四角蛤蜊細(xì)胞中ROS含量顯著下降。類似的結(jié)果也出現(xiàn)在翡翠貽貝的缺氧實(shí)驗(yàn)中［34］。然而，也有研究表明，急性缺氧脅迫會(huì)使扇貝血細(xì)胞ROS含量出現(xiàn)升高的現(xiàn)象，例如扇貝在25℃空氣暴露2 h或者17℃下空氣暴露24 h時(shí)，其細(xì)胞中ROS含量顯著上升，在5°C條件下缺氧處理組經(jīng)24 h恢復(fù)后扇貝的ROS含量顯著高于其恢復(fù)之前含量甚至比最初水平還要高［43］。Wang等［34］的研究表明，翡翠貽貝在30°C 下缺氧(1．5 mg·L-1)處理24 h，其血細(xì)胞中 ROS 含量顯著高于正常溶氧組(6．0mg·L-1)。

盡管上述文獻(xiàn)表明，缺氧會(huì)影響貝類細(xì)胞中ROS的產(chǎn)生，但其影響機(jī)制尚不明確。Lacoste等［44］報(bào)道，牡蠣(Crassotrea gigas)的免疫應(yīng)答由血淋巴中去甲腎上腺素(軟體動(dòng)物主要的兒茶酚胺類物質(zhì))的釋放來(lái)調(diào)節(jié)。去甲腎上腺素的釋放，不僅對(duì)一系列的細(xì)胞免疫應(yīng)答有抑制效果還能明顯減少ROS的產(chǎn)生。Yu等［19］關(guān)于四角蛤蜊缺氧脅迫對(duì)其免疫應(yīng)答影響的實(shí)驗(yàn)，雖然沒(méi)有測(cè)定去甲腎上腺素的含量，但仍可以依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測(cè)，缺氧脅迫引發(fā)的去甲腎上腺素的釋放可能導(dǎo)致ROS產(chǎn)量的下降并伴隨著超氧化物歧化酶(SOD)活性的下降。

2 缺氧對(duì)貝類體液免疫因子的影響

體液免疫和細(xì)胞免疫是貝類免疫機(jī)制的兩個(gè)方面。體液免疫作為貝類的重要免疫防御手段，是依靠血清中的一些非特異性酶和調(diào)節(jié)因子來(lái)進(jìn)行。目前已確定的體液免疫因子主要包括溶酶體酶、抗氧化物酶、抗氧化因子、酚氧化酶、髓性過(guò)氧化物酶(MPO)、凝集素、調(diào)理素、抗菌肽、應(yīng)激蛋白和細(xì)胞因子類似物等［39］，其中溶酶體酶和抗氧化防御系統(tǒng)在免疫防御中起著至關(guān)重要的作用。大多數(shù)體液免疫因子是由貝類血細(xì)胞產(chǎn)生并分泌到血淋巴中發(fā)揮防御功能的，由此可見(jiàn)體液免疫和細(xì)胞免疫是相互聯(lián)系，協(xié)同作用的。

2．1 缺氧對(duì)貝類溶酶體酶類的影響

溶酶體酶類主要來(lái)源于血細(xì)胞和血淋巴，由血細(xì)胞的溶酶體與質(zhì)膜融合后分泌到胞外。貝類溶酶體酶主要包括溶菌酶(LSZ)、酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(ALP)等。

2．1．1 缺氧對(duì)溶菌酶(LSZ)的影響

LSZ是幾種革蘭氏陽(yáng)性和陰性菌的主要?dú)⒕鷦?9，45］。LSZ在吞噬作用過(guò)程中，由貝類的血細(xì)胞合成并分泌到血淋巴中［46］。LSZ是貝類非特異性免疫的重要組成部分。由于溶酶體中的蛋白酶、氨肽酶、脂肪酶、葡萄糖苷酶等還能消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖類，使得溶酶體兼有防御和消化的雙重功能［39］。因此LSZ活性可作為評(píng)價(jià)貝類健康狀況以及防御系統(tǒng)活力的一個(gè)重要指標(biāo)［47］。

有研究表明，在缺氧脅迫下硬殼蛤的LSZ活性表現(xiàn)出下降趨勢(shì)［48］。Wang等［29］也發(fā)現(xiàn)，暴露于缺氧條件下(24、48和72 h)會(huì)導(dǎo)致翡翠貽貝LSZ活性的降低，但只有暴露于缺氧條件下24 h的翡翠貽貝能恢復(fù)LSZ的活性。河蜆不同溶氧梯度脅迫實(shí)驗(yàn)表明，在第7天時(shí)，各組的LSZ活性均升高，而富氧組(11．0 mg·L-1)的LSZ活性最高，顯著高于對(duì)照組(8．0 mg·L-1)和低氧組(2．0 mg·L-1)。隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，各組LSZ活性均降低;到第21天時(shí)，3個(gè)組的LSZ活性均低于實(shí)驗(yàn)前的水平。富氧組和低氧組在應(yīng)激下的溶菌酶活性均高于對(duì)照組，富氧組的LSZ活性始終高于低氧組的水平，這可能與水體中各種微生物的生長(zhǎng)變化有關(guān)［49］。在翡翠貽貝的實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)缺氧組(1．5 mg·L-1)LSZ活性顯著低于正常溶氧組(6．0mg·L-1)［34］。

翡翠貽貝24和48 h缺氧處理后，血細(xì)胞裂解產(chǎn)物中與脫細(xì)胞血淋巴中的溶菌酶活性均出現(xiàn)顯著下降［29］。經(jīng)24 h復(fù)氧后，血細(xì)胞裂解產(chǎn)物中的溶菌酶活性仍然顯著低于對(duì)照組和缺氧組，而血清中的溶菌酶活性顯著高于對(duì)照組。相反，48 h缺氧處理組，雖然經(jīng)24h的恢復(fù)處理，但LSZ活性仍然都顯著低于對(duì)照組［29］。

2．1．2 缺氧對(duì)磷酸酶的影響

酸性磷酸酶(ACP)作為溶酶體的標(biāo)志性酶，在免疫反應(yīng)中起到殺滅和消化病原微生物的作用。堿性磷酸酶(ALP)屬于多功能酶，參與貝類免疫反應(yīng)，并在免疫反應(yīng)中與超氧化物歧化酶和酸性磷酸酶具有緊密的聯(lián)系［50-51］。在較低溶氧水平(4．5和2．5 mg·L-1)條件下，7d內(nèi)，櫛孔扇貝ACP活性沒(méi)有顯著變化，之后出現(xiàn)下降，直至顯著低于正常水平［28］。在感染病原菌的實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)淡水光滑雙臍螺(Biomphalariaglabrata)血清中的 ACP水平有所上升［52］。只有在2．5mg·L-1溶氧條件下處理12h，櫛孔扇貝ALP活性才出現(xiàn)顯著更高的水平，而其他不同氧溶度處理以及不同的取樣時(shí)間的ALP活性都在小范圍內(nèi)波動(dòng)［28］。大量研究表明，在貝類免疫應(yīng)答中SOD、ACP和ALP是緊密相關(guān)的［50-51］。因此，可通過(guò)檢測(cè)THC、SOD活性、ACP活性和ALP活性來(lái)監(jiān)控貝類在不同氧溶度梯度下的免疫應(yīng)答。

2．2 缺氧對(duì)貝類抗氧化防御系統(tǒng)的影響

抗氧化防御系統(tǒng)主要由酶抗氧化物酶和抗氧化物因子兩部分構(gòu)成，在抗氧化防御過(guò)程中兩者相互聯(lián)系，協(xié)同作用?？寡趸锩钢饕谐趸锲缁?SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GST)和酚氧化酶(PO)等［9］。抗氧化物因子主要包括谷胱甘肽(GSH)、維生素A、維生素C、維生素E、β—胡蘿卜素和尿酸等。

2．2．1 缺氧對(duì) SOD 的影響

在免疫應(yīng)答中，SOD作為消除自由基團(tuán)的主要酶，對(duì)于減少宿主細(xì)胞的氧化損傷是必不可少的［53-54］。胡曉等［55］對(duì)背角無(wú)齒蚌(Anodontawoodiana)和三角帆蚌(Hyriopsiscumingii)血淋巴SOD的研究顯示，活性氧可能在河蚌的正常生命活動(dòng)中發(fā)揮重要功能，而SOD則是一切需氧有機(jī)體清除

O-2·，保護(hù)機(jī)體免受氧化傷害的關(guān)鍵酶，其活性與生物的免疫功能密切相關(guān)。

Chen 等［28］指出，在較高氧溶度水平(8．5 或 6．5mg·L-1)條件下，櫛孔扇貝SOD活性在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中都維持的相當(dāng)穩(wěn)定。而在較低溶氧水平(4．5或2．5mg·L-1)，其 SOD活性呈現(xiàn)出峰形變化趨勢(shì)，12h前呈顯著上升趨勢(shì)，之后出現(xiàn)顯著下降，直至正常水平以下。Santovito等［56］報(bào)道稱，低溶氧會(huì)降低地中海貽貝消化腺中SOD的活性。河蜆的溶氧梯度實(shí)驗(yàn)也符合這一規(guī)律［49］。

2．2．2 缺氧對(duì)GPx的影響

貝類GPx主要存在于鰓組織中。由于GPx更傾向于除去SOD歧化·O2-產(chǎn)生的H2O2，故在不同溶氧梯度下貝類鰓中GPx活性與SOD活性緊密相關(guān)［56］。但是這2種抗氧化物酶在消化腺中含量較少，故不存在相關(guān)性［56］。許友卿等［57］發(fā)現(xiàn)，在缺氧條件下，8h后皺紋盤鮑SeGPx基因的表達(dá)量是正常情況下的16．8倍，這可能與缺氧導(dǎo)致的ROS含量增加有關(guān)。

2．2．3 缺氧對(duì)CAT的影響

與SOD以及GPx不同，CAT參與去除食物消化過(guò)程中產(chǎn)生的H2O2，因此消化腺CAT含量高于鰓組織中的CAT含量。CAT活性與SOD活性存在一定的相關(guān)性［56］。例如，在對(duì)皺紋盤鮑CAT的研究中，缺氧處理2h后皺紋盤鮑CAT基因表達(dá)量出現(xiàn)少量上升，之后又緩慢減少，這一變化趨勢(shì)與SOD的基因表達(dá)量的變化趨勢(shì)相吻合［57］。

2．2．4 缺氧對(duì)酚氧化酶(PO)的影響

PO是一種具有氧化活力的銅蛋白酶，作為酶類氧化蛋白酶之一，在貝類的防御系統(tǒng)中扮演著重要的角色。當(dāng)機(jī)體受到損傷時(shí)，作為貝類一系列免疫防御因子級(jí)聯(lián)反應(yīng)的最后一個(gè)組件—PO將由免疫感受態(tài)血細(xì)胞釋放到血淋巴中［58］。在開(kāi)放式的貝類循環(huán)系統(tǒng)中，能及時(shí)反應(yīng)、識(shí)別異物并通過(guò)防衛(wèi)機(jī)制阻止傷口異物的入侵，防止血液流失等［59］。四角蛤蜊在缺氧條件下表現(xiàn)出較低的PO活性，表明在缺氧環(huán)境中四角蛤蜊的免疫功能減退，此時(shí)其將變得更容易被病原菌感染［19］。臺(tái)灣九孔鮑PO活性在3．57和2．05mg·L-1溶氧條件下出現(xiàn)顯著升高，分別升高 38% 和 69%［9］。Moullac等［60］推測(cè)這可能與PrPO系統(tǒng)等離子體抑制劑數(shù)量的減少有關(guān)。

3結(jié)語(yǔ)

綜上所述，在缺氧條件下THC的下降往往伴隨著吞噬活性以及ROS含量的下降［19］。吞噬作用涉及到呼吸爆發(fā)過(guò)程所伴隨的活性氧的產(chǎn)生;呼吸爆發(fā)中活性氧的產(chǎn)生水平又取決于血淋巴中的循環(huán)血細(xì)胞含量，反過(guò)來(lái)活性氧含量又會(huì)影響血細(xì)胞的存活率。由此推測(cè)，在缺氧脅迫下貝類細(xì)胞免疫系統(tǒng)中血細(xì)胞總數(shù)、吞噬活性以及呼吸爆發(fā)的異變都是聯(lián)動(dòng)的，且都呈現(xiàn)出下降的趨勢(shì)。體液免疫中SOD活性受呼吸爆發(fā)伴隨的ROS的產(chǎn)生所誘導(dǎo)，在缺氧脅迫早期階段SOD活性會(huì)有所上升［29，48］，而隨著呼吸爆發(fā)的減弱以及循環(huán)血細(xì)胞總數(shù)的下降SOD活性也會(huì)迅速下降，在這個(gè)過(guò)程中貝類鰓組織中的CAT和GSH-Px活性幾乎與SOD活性保持一致步調(diào)［61］。缺氧環(huán)境中溶菌酶活性的降低直接影響吞噬效率，而溶菌酶又由循環(huán)血細(xì)胞分泌產(chǎn)生。因此，缺氧脅迫對(duì)貝類體液免疫系統(tǒng)的負(fù)面影響與細(xì)胞免疫系統(tǒng)的基本保持一致。因此，缺氧脅迫將導(dǎo)致貝類免疫系統(tǒng)的衰退，大量文獻(xiàn)顯示，24 h(臨界點(diǎn))以內(nèi)缺氧脅迫對(duì)貝類免疫系統(tǒng)的負(fù)面影響是可逆的，即這種強(qiáng)度的缺氧脅迫在貝類免疫系統(tǒng)的承受范圍之內(nèi)，當(dāng)暴露于缺氧環(huán)境超過(guò)一定時(shí)間，缺氧脅迫就可能對(duì)貝類細(xì)胞免疫系統(tǒng)造成不可逆損傷，甚至導(dǎo)致貝類的死亡［19，29，43］。

近年來(lái)，由于我國(guó)貝類尤其是淡水珍珠蚌養(yǎng)殖規(guī)模的迅速擴(kuò)大，導(dǎo)致水體嚴(yán)重富營(yíng)養(yǎng)化，水華頻發(fā)，致使水體中貝類急性缺氧。因此，研究貝類在缺氧環(huán)境下免疫功能的變化具有重要的生產(chǎn)實(shí)踐意義。目前，有關(guān)缺氧對(duì)貝類免疫系統(tǒng)影響的研究尚有報(bào)道，但是與其他環(huán)境因子共同影響貝類的交互作用的研究還很少，而有毒物質(zhì)例如水華藻類爆發(fā)所產(chǎn)生的生物毒素——微囊藻毒素與缺氧交互作用對(duì)貝類的研究還屬空白。然而在實(shí)際生產(chǎn)中往往又是多因素脅迫共同存在，其間的關(guān)系或者協(xié)同或者拮抗也可能相互獨(dú)立。因此，研究多因素對(duì)貝類免疫功能的影響應(yīng)該成為今后貝類毒理生理學(xué)的主要研究方向。

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